Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 1型糖尿病是一种人类疾病,免疫系统破坏胰腺中制造β细胞的胰岛素。 链球菌素可诱发斑马鱼1型糖尿病。首先,在鱼水中的2苯氧乙醇溶液中麻醉鱼。 取鱼,放在培养皿上,腹侧朝上。 根据每克鱼的重量0.35毫克计算链球菌素的剂量,并在盐水溶液中稀释。
通过在斑马鱼腹腔侧的骨盆腰带下进行腹腔注射来管理链球菌素。链球菌素在结构上类似于N-甲基聚氰胺,一种将GLUT2受体结合在胰腺β细胞上的配体,导致胰岛素分泌。因此,链霉素与存在于胰腺β细胞上的GLUT2受体结合,后者将其输送到细胞内。
进入β细胞后,链球菌素会触发免疫反应,导致自身抗体的释放。自身抗体导致免疫系统识别β细胞为异物,并破坏β细胞,导致胰岛素水平降低。在第三天和第五天反复服用链球菌素,然后每周剂量一次,每七天服用一次,以维持免疫反应。
在下列示例中,我们将生成 1 型糖尿病斑马鱼模型。以生成带有糖尿病的斑马鱼,用普通鱼水准备一个回收罐和一个麻醉罐,用1到1000稀释2苯氧乙醇。在烟气罩下,通过在2毫升0.09%氯化钠中加入6毫克STZ,立即将溶液放在冰上,准备0.3%的链球菌素或STZ溶液。
在单独的管子里,用足够的盐水来控制鱼。用 STZ填充一个半 CC 注射器,配备 27和1/2 仪表针或控制解决方案确保没有气泡被捕获。麻醉一条鱼,将其放入麻醉水中,等待游泳运动停止,约一至两分钟。
麻醉后,将鱼短暂地放在纸巾上以吸收多余的水。 然后,将鱼放入称重船上称重。 接下来,将鱼放在一个牢固的表面上。 然后将针头穿过斜面进入腹膜的后部,每克 STZ或同等量的控制溶液注入鱼的腹腔中。
注射后,将鱼放在回收水箱中,并监测其正常游泳活动。 注射足够的鱼进行实验后,将鱼转移到正常生活水箱,并在22至24摄氏度的温度下维持。 降低温度对于有效诱导高血糖至关重要。要诱导高血糖的长时间状态,请按照诱导阶段频繁注射的时间表,然后每周进行维护注射(如此处所示)。