Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses

Nitin Shirole; Sreeram Balasubramanian; Charles Yanofsky; Luis Cruz-Vera

doi:10.3791/2498

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기능 및 구조 분석을위한 Peptidyl - tRNAs를 포함 번역 리보솜의 분리

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Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses

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기능 및 구조 분석을위한 Peptidyl - tRNAs를 포함 번역 리보솜의 분리

DOI:

10.3791/2498-v

•

11:19 min

•

February 25, 2011

•

Nitin Shirole, Sreeram Balasubramanian, Charles Yanofsky, Luis Cruz-Vera

¹Department of Biological Sciences,University of Alabama Huntsville, ²Department of Biology,Stanford University

Chapters

00:05Title
02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
04:28Preparation of a DNA Template
05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
09:23Representative Results
10:52Conclusion

Summary

Automatic Translation

어렸을때 peptidyl - tRNAs를 포함하는 리보솜의 생화 학적 분석에 대한 주요 장애가 동일한 샘플의 다른 변이의 존재를했습니다, 분석되는 특정 mRNA 순서의 번역에 참여하지 리보솜. 우리는, 독점적으로, 관심의 초기 peptidyl - tRNA를 포함하는 변이를 정화하는 간단한 방법을 개발했습니다.

기능 및 구조 분석을위한 Peptidyl - tRNAs를 포함 번역 리보솜의 분리

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