This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
- 04:28Preparation of a DNA Template
- 05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
- 06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
- 07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
- 09:23Representative Results
- 10:52Conclusion
Ett stort hinder för biokemiska analyser av ribosomer som innehåller begynnande peptidyl-tRNAs har närvaron av andra ribosomer i samma prov, ribosomer inte inblandad i översättningen av specifika mRNA sekvens som analyseras. Vi utvecklade en enkel metod att rena, exklusivt, ribosomerna som innehåller den begynnande peptidyl-tRNA av intresse.
Tags
IsolationTranslating RibosomesPeptidyl-tRNAsFunctional AnalysisStructural AnalysisAntibioticsProtein Synthesis InhibitionNascent Polypeptide SynthesisPeptide Bond Formation InhibitionTranslation Termination InhibitionTranslational ArrestGene Expression RegulationRibosome Function AlterationMRNA PurificationBiotin-labeled MRNA
