A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:15Loading Cells with Calcium Indicators
- 02:23Microinjecting Cells
- 03:42Co-immunofluorescence Studies
- 04:49Fast Calcium Imaging and Data Analysis
- 06:28Dissecting the Timing of Ca++ Fluxes Facilitates Evaluation of Their Impact on Cellular Events
- 11:22Conclusion
Vi presenterar en metod för att isolera snabb (mikrosekund) kalcium händelser från långsammare flöden i levande celler med hjälp av laserskanning konfokalmikroskopi. Metoden åtgärder fluorescensintensitet variationer av kalcium indikatorer skannar in raden av flera hundra pixlar i en cell. Histogram analys tillåter oss att isolera tidsskalor för olika kalcium flöden.
Tags
Calcium FluxesCardiomyocytesMeasuringFastCa2+ ActivityPhospholipase Cβ- Gαq PathwayAcetylcholineCaveolaeEntrapmentGαqProlonged Ca2+ SignalsDynamic Calcium ResponsesFluorescent Ca2+ IndicatorCa2+ GreenFluorescence Emission IntensityLine-scan ModeLaser Scanning Confocal MicroscopeTime CourseMicrosecond Time ScaleExcel AnalysisSigmaplot AnalysisFlux Rate
