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Studi struttura-funzione nel topo cellule staminali embrionali Uso ricombinasi mediata Cassette Scambio
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange
DOI:

15:13 min

April 27, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11The RMCE Principle
  • 02:15Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells
  • 05:22Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells
  • 07:29Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning
  • 09:25RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies
  • 12:41Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Le proteine ​​contengono spesso più domini che possono esercitare diverse funzioni cellulari. Gene knock-out (KO) non considerano questa diversità funzionale. Qui riportiamo un cambio cassette ricombinazione mediata (RMCE) approccio basato lo struttura-funzione in cellule staminali embrionali KO che consente la dissezione molecolare dei vari domini funzionali o varianti di una proteina.

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