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Los estudios de estructura-función en las células madre embrionarias de ratón Usando mediada por recombinasa Cambio de Cassette
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange
DOI:

15:13 min

April 27, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11The RMCE Principle
  • 02:15Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells
  • 05:22Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells
  • 07:29Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning
  • 09:25RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies
  • 12:41Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Las proteínas a menudo contienen varios dominios que pueden ejercer diferentes funciones celulares. Genes knock-out (KO) no tienen en cuenta esta diversidad funcional. Aquí, se presenta un enfoque basado en la estructura-función de intercambio de casete de recombinación mediada (RMCE) en células madre embrionarias de KO que permite la disección molecular de varios dominios funcionales o variantes de una proteína.

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