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リコンビナーゼ媒介カセット交換を用いて、マウス胚性幹細胞における構造と機能の研究
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange
DOI:

15:13 min

April 27, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11The RMCE Principle
  • 02:15Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells
  • 05:22Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells
  • 07:29Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning
  • 09:25RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies
  • 12:41Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

タンパク質は、多くの場合、異なる細胞機能を発揮することができ、複数のドメインを含みます。遺伝子ノックアウト(KO)は、この機能的多様性を考慮していません。ここでは、様々な機能ドメインまたはタンパク質の変異体の分子解剖を可能KO胚性幹細胞における組み換え媒介カセット交換(RMCE)ベースの構造と機能のアプローチを報告しています。

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