Summary
Ein Protokoll zur Messung peripherer Blutleukozyten mit einem POCT-kartenbasierten Leukozytenanalysator wird hier vorgestellt. Dieselben Blutproben wurden von zwei automatisierten Hämatologie-Analysatoren getestet, um die Konsistenz und Genauigkeit der Ergebnisse zu bewerten. Die Ergebnisse zeigten, dass der ausgewertete Analysator eine gute Korrelation mit dem Referenzsystem hatte.
Abstract
Weiße Blutkörperchen (WBC) sind ein wichtiger Indikator für Entzündungen im Körper und können helfen, zwischen bakteriellen und viralen Infektionen zu unterscheiden. Derzeit haben die meisten primärmedizinischen Einrichtungen in China einen schlechten Prozentsatz der Einführung von Bluttesttechnologie, und ein hämatologie-Erkennungssystem mit einem hohen Preis-Leistungs-Verhältnis und einfacher Bedienung ist in primären Gesundheitszentren dringend erforderlich. Dieses Papier stellt das Prinzip und die Funktionsverfahren eines Point-of-Care-Tests (POCT) kartenbasierten Leukozytenanalysators (evaluiertes System) vor, der zum Nachweis von WBC-Indizes wie Neutrophilen, Lymphozyten und Zellen der Zwischengruppe (einschließlich Eosinophilen, Basophilen und Monozyten) im Vollblut verwendet wurde. Die Ergebnisse des ausgewerteten Systems wurden mit denen von zwei kommerziellen automatischen Hämatologie-Analysatoren (Referenzsystem) verglichen. Die Korrelation und Konsistenz zwischen dem ausgewerteten System und den kommerziellen Referenzsystemen wurde analysiert. Die Ergebnisse zeigten, dass die Leukozytenzahl und die Anzahl der Granulozyten, die von denausgewerteten und Referenzsystemen nachgewiesen wurden, eine starke positive Korrelation aufwiesen (rs = 0,972 bzw. 0,973), während die Anzahl der Lymphozyten eine relativ geringe Korrelation aufwies (r s = 0,851). Ein Bland-Altman-Diagramm zeigte, dass der Hauptunterschied zwischen den vom ausgewerteten System und den Referenzsystemen ermittelten Werten innerhalb der 95%-Grenzen der Übereinstimmung (LoA) liegt, was darauf hindeutet, dass die beiden Systeme in guter Übereinstimmung sind. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass das bewertete System eine ausgezeichnete Korrelation, eine robuste Konsistenz und einen zuverlässigen Vergleich mit den Ergebnissen der weit verbreiteten automatischen Hämatologie-Analysatoren aufweist. Es ist ideal für die WBC-Erkennung in primärmedizinischen Einrichtungen, in denen ein vollautomatischer Hämatologie-Analysator mit fünf Kategorien nicht verfügbar ist, insbesondere während der normalisierten COVID-19-Präventions- und Kontrollphase.
Introduction
Die Anzahl der weißen Blutkörperchen (WBC) oder das Differential ist ein wichtiger Indikator, um die Entzündung des Körpers widerzuspiegeln, die eine bakterielle Infektion von einer Virusinfektion unterscheiden kann. Die WBC-Analyse ist auch hilfreich, um die Follow-up-Diagnose und -Behandlungzu steuern 1. Derzeit ist der vollautomatische Hämatologie-Analysator mit fünf Klassifizierungen in großen und mittleren medizinischen Einheiten weit verbreitet, da er automatisch ist, eine hohe Effizienz aufweist, genaue und zuverlässige Ergebnisse liefert und die Arbeitsintensität von Labortechnikern effektiv reduziert. Es spielt eine wichtige Rolle bei der klinischen Untersuchung 2,3. Die meisten primären medizinischen Einrichtungen, wie kommunale Gesundheitszentren und Privatkliniken, haben jedoch eine niedrige Adoptionsrate eines hämatologischen Analysators. Laut einer landesweiten multizentrischen Studie zum Bau klinischer Labore in China ist der Laborbau primärmedizinischer Einrichtungen unzureichend, wie unter anderem die geringe Größe der Labore, die unzureichende Talentübertragung und die Verbreitung von Wissenschaft und Technologie auf dem Land belegen4.
Seit Dezember 2019 begann sich COVID-19 auf der ganzen Welt auszubreiten und entwickelte sich zu einer globalen Pandemie. In der "Post-Epidemie-Ära" wurde eine Reihe von nationalen Politiken vorgeschlagen, um die normalisierten Präventions- und Kontrollmaßnahmen für epidemische Situationen umzusetzen. Das Labor der primärmedizinischen Einrichtungen spielt eine wichtige Rolle bei der Diagnose und Behandlung an der Basis sowie bei der Prävention und Bekämpfung von Krankheiten. Es ist die erste Verteidigungs- und Kontrolllinie in epidemischen Situationen und für die Prävention und Bekämpfung von COVID-19 von entscheidender Bedeutung5. Einige Studien haben gezeigt, dass der Nachweis von peripheren Blutlymphozyten und Neutrophilen zum Screening, zur Diagnose und Behandlung von COVID-19-Patienten beiträgt und dass das Neutrophilen/Lymphozyten-Verhältnis auch als klinische Frühwarnindikatoren für schwere und kritische COVID-19 verwendet werdenkann 6,7. Darüber hinaus hat die Leukozytendetektion den Vorteil, dass sie einen schnellen Bericht liefert. Primäre medizinische und Gesundheitseinrichtungen können den Leukozytennachweis umfassend durchführen, um vermutete Infektionen rechtzeitig zu erkennen und zu untersuchen.
Der POCT-Karten-basierte Leukozytenanalysator (ausgewertetes System; siehe Materialverzeichnis) ist ein Blutzellanalysator mit drei Klassifizierungen, der auf dem Goldstandard "Coulter-Prinzip" basiert. Das ausgewertete System liefert quantitative Analyseergebnisse eines WBC-Histogramms und sieben Blutparametern, einschließlich WBC-Zahl, Anzahl der Granulozyten (Gran #), Prozentsatz der Granulozyten (Gran%), Anzahl der Lymphozyten (Lym #), Prozentsatz der Lymphozyten (Lym), Anzahl der Zwischenzellen (Mitte #) und Prozentsatz der Zwischenzellen (Mittel). Es übernimmt die kartenbasierte innovative Technologie und hat Vorteile wie die Verfügbarkeit eines Einzelpersonen-Detektionskits, die Abwesenheit von flüssigem Abfall, die schnelle Erkennung in 30 s, die Freiheit von routinemäßigen Wartungsarbeiten und den benutzerfreundlichen Betrieb. Daher eignet es sich besonders gut für primäre medizinische Einrichtungen. Diese Studie zielt darauf ab, die klinische Nachweisleistung von POCT-kartenbasierten Leukozytenanalysatoren zu bewerten, indem sie mit zwei vollautomatischen kommerziellen Hämatologie-Analysatoren (Referenzsystem 1 und Referenzsystem 2; siehe Materialtabelle) aus Labors zweier großer öffentlicher Krankenhäuser verglichen wird.
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Protocol
Diese Studie und die Verwendung von menschlichen Blutproben wurden von der Ethikkommission des First Affiliated Hospital der Guangzhou Medical University (GYYY-2016-73) genehmigt. Alle Teilnehmer haben ihre schriftliche Einwilligung selbständig oder über ihre Eltern (bei Kindern) erteilt.
1. Basisinformationen der Studiengruppe
HINWEIS: Venöses Blut wurde von Patienten gesammelt, die das erste angeschlossene Krankenhaus der Guangzhou Medical University (Krankenhaus 1) und das fünfte angeschlossene (Zhuhai) Krankenhaus der Zunyi Medical University (Krankenhaus 2) besuchten. Das Instrument, das für die Blutroutineuntersuchung in Krankenhaus 1 verwendet wird, ist das Referenzsystem 1, während Krankenhaus 2 das Referenzsystem 2 verwendet.
- Insgesamt wurden 1066 Blutproben von Patienten entnommen, die im Januar 2021 das Krankenhaus 1 (532) und das Krankenhaus 2 (534) besuchten und sich Blutroutineuntersuchungen unterzogen.
HINWEIS: Die Patienten wurden zufällig ausgewählt, kamen aus mehreren Abteilungen und litten an verschiedenen Krankheiten. - Schließen Sie Patienten mit unvollständigen Krankenakten und diejenigen aus, die nicht kooperativ waren oder sich weigerten, eine Einwilligung nach Aufklärung zu geben. Schließen Sie diejenigen Patienten aus, deren Blutproben Hämolyse, Chylblut oder Trübung aufwiesen oder bei denen das Blutvolumen unzureichend war oder länger als 24 Stunden gelagert wurde.
2. Studieren Sie den Fluss und die Messungen von Interesse
HINWEIS: Das ausgewertete System benötigt 5 μL der Blutprobe zur Bestimmung des WBC und der drei Klassifikationsparameter. Nach der Blutentnahme wurden das ausgewertete System und das Referenzsystem für die Blutroutineuntersuchung verwendet.
- Nachweis des WBC und der drei Klassifikationsparameter von 532 bzw. 534 Blutproben unter Verwendung des Referenzsystems bzw. des ausgewerteten Systems.
- Lassen Sie einen hochqualifizierten Techniker die ausgewählten Blutproben nach Abschluss des klinischen Tests mit dem Referenzsystem nach dem Zufallsprinzip neu nummerieren. Übergeben Sie dann die Proben an einen anderen hochqualifizierten Techniker zur Erkennung der WBC- und Klassifizierungsparameter mit dem ausgewerteten System.
- Zeigen Sie die Ergebnisse der beiden Systeme an.
- Bitten Sie einen dritten Techniker, die fünf Indikatoren (nämlich WBC-Anzahl, Gran#, Gran%, Lym#, Lym%) zu analysieren, die sowohl von ausgewerteten als auch von Referenzsystemen geteilt werden.
3. Verfahren zur Nutzung des ausgewerteten Systems
HINWEIS: Das ausgewertete System verwendet das elektrische Impedanzprinzip (Coulter-Prinzip), um den WBC im Detektionselement zu zählen. Das Testprotokoll ist in sechs Teile unterteilt: Starten Sie den Analysator, Testvorbereitung, Blutentnahme, Reagenzienmischung, Probenanalyse und schalten Sie den Analysator aus.
- Starten Sie den Analysator
- Drehen Sie den [O/I]-Netzschalter auf der Rückseite des Analysators auf [I]. Überprüfen Sie, ob die Kontrollleuchte des Analysators leuchtet.
- Geben Sie den richtigen Benutzernamen und das richtige Passwort in das Anmeldedialogfeld ein und klicken Sie auf Anmelden. Stellen Sie sicher, dass das System die Selbstprüfung und die Initialisierung des Starts automatisch durchführt und dann die Homepage Stichprobenanalyse anzeigt.
- Testvorbereitung
HINWEIS: Ein vollständiger Blutprobentest erfordert vier Verbrauchsmaterialien: Blutlanzette, hämolytisches Reagenz, quantitative Pipette mit Kapillarröhrchen im Inneren und Blutzellerkennungsmodul (Abbildung 1).- Klicken Sie auf Nächste Probe, geben Sie Geschlecht, Name und andere klinische Informationen (je nach Bedarf) korrekt ein und wählen Sie eine geeignete Referenzgruppe aus. Klicken Sie auf OK, um die Informationen zu speichern.
HINWEIS: Verschiedene Altersgruppen haben ihr eigenes Referenzintervall, so dass die Auswahl der richtigen Referenzgruppe eine geeignetere Alarmaufforderung erhalten kann. Neugeborene: 1-28 Tage alt; Kinder: 29 Tage bis 14 Jahre; Erwachsener Mann/Weibchen/Allgemein: mehr oder gleich 15 Jahre alt. - Reißen Sie den dünnen Film des Blutzellerkennungsmoduls, drücken Sie die Taste Entry/Exit warehouse und platzieren Sie das Blutzellerkennungsmodul korrekt im Maschinenlager mit seiner nach außen gerichteten Öffnung.
- Punktieren Sie die hämolytische Reagenzien-Siegelfolie mit der Spitze einer quantitativen Pipette.
- Klicken Sie auf Nächste Probe, geben Sie Geschlecht, Name und andere klinische Informationen (je nach Bedarf) korrekt ein und wählen Sie eine geeignete Referenzgruppe aus. Klicken Sie auf OK, um die Informationen zu speichern.
- Blutentnahme
- Kapillarblutentnahme: Desinfizieren Sie den linken Ringfinger mit einem in Alkohol getauchten Wattestäbchen ein- und einmal. Nachdem der Alkohol auf natürliche Weise ausgetrocknet ist, verwenden Sie eine Blutlanzette, um die Haut des linken Ringfingers zu punktieren.
- Drücken Sie den ersten Tropfen Blut vorsichtig aus und wischen Sie ihn mit einem Wattestäbchen ab. Drücken Sie genug Blut aus, um einen vollen "Wassertropfen" zu bilden, und sammeln Sie 5 μL der Blutprobe mit dem Kapillarröhrchen in der quantitativen Pipette.
- Venöse Blutentnahme: Sammeln Sie 5 μL der vorab erhaltenen venösen Blutprobe mit dem Kapillarröhrchen in der quantitativen Pipette. Alle Tests in dieser Studie verwendeten venöses Blut, das von jedem Patienten (5 ml) mit einem Vakuumgefäß gesammelt wurde, das EDTA-K 2 Antikoagulans enthielt. Führen Sie alle Tests innerhalb von 30 Minuten bis 24 Stunden durch.
- Kapillarblutentnahme: Desinfizieren Sie den linken Ringfinger mit einem in Alkohol getauchten Wattestäbchen ein- und einmal. Nachdem der Alkohol auf natürliche Weise ausgetrocknet ist, verwenden Sie eine Blutlanzette, um die Haut des linken Ringfingers zu punktieren.
- Mischen von Reagenzien
- Setzen Sie die quantitative Pipette in das hämolytische Reagenz (2,5 ml) ein und drücken Sie es fest, um die Blutprobe aus dem Kapillarröhrchen freizusetzen.
- Mischen Sie das Blut in der Kapillarröhre und dem hämolytischen Reagenz, indem Sie es 15-20 Mal mit konstanter Geschwindigkeit auf den Kopf stellen, bis kein offensichtliches rotes Blut mehr in der Kapillarröhre verbleibt. In dieser Studie wird die Blutprobe mit hämolytischem Reagenz im Verhältnis 1:500 gemischt.
- Probenanalyse
- Öffnen Sie den Deckel und drücken Sie die Lösung in das Blutzellerkennungsmodul.
- Drücken Sie die Taste Entry/Exit warehouse . Nachdem das Blutzellerkennungsmodul das Lager betreten hat, drücken Sie die Zähltaste .
HINWEIS: Eine blinkende grüne Kontrollleuchte zeigt an, dass der Analysator zählt. Das Blutzellerkennungsmodul verlässt das Lager nach der Zählung automatisch und sollte entnommen und ordnungsgemäß entsorgt werden. Jeder Test dauert nur 30 Sekunden. - Klicken Sie auf der Benutzeroberfläche des Analysators zweimal auf die Schaltfläche OK , um zu bestätigen, dass das Blutzellerkennungsmodul herausgenommen wurde.
- Klicken Sie auf der Benutzeroberfläche des Analysators auf die Schaltfläche Drucken , um die Testergebnisse zu drucken.
- Schalten Sie den Analysator aus.
- Klicken Sie auf der Benutzeroberfläche des Analysators auf die Schaltfläche Herunterfahren, und wählen Sie Ja im Dialogfeld, das auf der Benutzeroberfläche angezeigt wird. Überprüfen Sie, ob das System mit der Ausführung der Abschaltsequenz beginnt.
- Setzen Sie den [O/I]-Schalter auf der Rückseite des Mainframes auf [O], nachdem die Abschaltsequenz abgeschlossen ist.
4. Statistische Auswertung
- Erkennen Sie die Ausreißer mit der generalisierten ESD-Methode (Generalized Extreme Studentized Deviate) und eliminieren Sie diese Ausreißer für die statistische Folgeanalyse gemäß den Anforderungen der American Association for Clinical Laboratory Standardization (CLSI) EP9-A3 Dokument8.
- Berechnen Sie die beschreibenden Parameter wie Mittelwerte und Standardabweichungen (SDs) für normalverteilte kontinuierliche Daten; Mediane und 25%-75% Interquartilsbereiche für nicht normalverteilte Daten; und Häufigkeiten und Prozentsätze für kategoriale Daten.
- Verwenden Sie den Pearson χ2-Test oder den exakten Fisher-Test, um den Grad der Beziehung zwischen kategorialen Variablen zu bestimmen. Verwenden Sie den T-Test mit gepaarter Probe oder den Mann-Whitney U-Test, um numerische Daten zwischen Gruppen zu vergleichen.
- Zeigen Sie die Verteilung und lineare Assoziation der detektierten Ergebnisse der beiden Systeme durch Streudiagramme. Wenden Sie Spearmans nichtparametrischen Korrelationstest an, um auf den Grad der Beziehung zwischen den quantitativen Variablen zuzugreifen. Verwenden Sie Bland-Altman-Parzellen und den Intraklassenkorrelationskoeffizienten (ICC), um die Übereinstimmung zwischen den von den beiden Systemen erfassten quantitativen Werten zu überprüfen.
- Analysieren Sie die Daten mit einer statistischen Software Ihrer Wahl. Der P-Wert < 0,05 gilt als statistisch signifikant.
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Representative Results
Beispieldaten
Insgesamt wurden 1066 Patienten in zwei Forschungszentren aufgenommen, darunter Krankenhaus 1 (n = 532) und Krankenhaus 2 (n = 534). Die Patientenmerkmale sind in Tabelle 1 dargestellt. Der Prozentsatz der Männer beträgt 49,9% und das Durchschnittsalter beträgt 52 (32, 66) Jahre. Die in die Studie aufgenommenen Patienten bestanden aus stationären (51,1%), ambulanten (39,0%) und körperlichen Untersuchungspatienten (8,4%). Die getesteten Proben stammten von Patienten, die die Abteilungen für Innere Medizin (30,6%), Chirurgie (19,1%), Geburtshilfe und Gynäkologie (9,0%), Kinderabteilungen (3,9%) usw. besuchten.
Erkennung abweichender Ergebnisse (Ausreißer)
Nimmt man die Referenzsystemergebnisse als horizontale Achse und die ausgewerteten Systemergebnisse als vertikale Achse, so ergab sich ein Streudiagramm von fünf Leukozytenindizes von 1066 Proben (Ergebnisse sind nicht dargestellt). Verdächtige abnormale Punkte sind im Streudiagramm von fünf Leukozytenindizes offensichtlich. Nach den Ergebnissen der ESD-Methode gab es unter den 1066 Stichproben 16 Ausreißer in der WBC-Zählung, 27 Ausreißer in Gran#, 8 Ausreißer in Gran, 15 Ausreißer in Lym# und 9 Ausreißer in Lym%. Die Daten wurden nach Beseitigung der Ausreißer analysiert, die insgesamt weniger als 5% ausmachen.
Korrelationsanalyse im ausgewerteten System und Referenzsystemen
Abbildung 2 zeigt das Streudiagramm und die Spearman-Korrelationsanalyse der Testergebnisse. Die Ergebnisse zeigen, dass die WBC-Anzahl, Gran#, Gran%, Lym# und Lym% eine gute Linearität und Korrelation zwischen den beiden Systemen aufweisen; der lineare Koeffizient R2 liegt zwischen 0,7759 und 0,9676 und der Korrelationskoeffizient RSpearman zwischen 0,851 und0,973 (alle P-Werte < 0,001). WBC und Gran# weisen die stärkste Korrelation zwischen den beiden Systemen auf (R 2 =0,9608 bzw. 0,9676; r spearman = 0,972 bzw. 0,973), während Lym# die schwächste Korrelation zwischen den Systemen aufweist (R2 = 0,7759; rspearman = 0,851). Wir konnten jedoch die Korrelation und Konsistenz von Zwischenzellen (Mitte # / %) nicht bewerten, da sie im Referenzsystem in kleinere Teilungen (dh Eosinophile, Basophile und Monozyten) unterteilt sind.
Konsistenzanalyse
Ein Bland-Altman-Grundstück wurde erhalten, um die Konsistenzanalyse zu visualisieren, und der ±2 SD wurde als Limits of Agreement (LoA) markiert. Die Ergebnisse sind in Abbildung 3 dargestellt. Für den WBC beträgt der Mittelwert der Differenz 0,9 x 10 9/L zwischen dem ausgewerteten und dem Referenzsystem, und das 95%-Konfidenzintervall (CI) der Differenz beträgt -0,7 x 10 9 ~ 2,5 × 109/L.Es gibt 94,48% (992/1050) Proben innerhalb des 95% CI, was bedeutet, dass die vom ausgewerteten System erfassten WBC-Ergebnisse in guter Übereinstimmung mit dem Referenzsystem stehen. Für Gran# und Gran% beträgt der Mittelwert der Differenz zwischen dem ausgewerteten und dem Referenzsystem 0,8 x 10 9/L bzw. 2,0%, während der 95% CI der Differenz 0,7 x 10 9 ~ 2,2 x 109/L bzw. -7,7% ~ 11,7% beträgt. Es gibt 94,23% (979/1039) bzw. 94,99% (1005/1058) Proben innerhalb der 95% CI. Für Lym# und Lym gibt es 93,82% (986/1051) und 93,76% (991/1057) Proben innerhalb des 95% CI, und der durchschnittliche Differenzwert beträgt 0,33 x 109/L bzw. 1,8%. Die Durchschnittswerte der Unterschiede in den Leukozytenindizes liegen alle über 0, was darauf hindeutet, dass die Testergebnisse des ausgewerteten Systems etwas höher sind als die des Referenzsystems.
Korrelationsanalyse in verschiedenen Patientengruppen
Die WBC-Zählergebnisse für die Proben von Patienten unterschiedlichen Alters und Geschlechts sowie von Patienten aus verschiedenen Abteilungen wurden verglichen und auf Korrelationen analysiert. Die Ergebnisse zeigten, dass das WBC-Niveau des ausgewerteten Systems höher ist als das des Referenzsystems. Es gibt keinen signifikanten Unterschied in Konsistenz und Korrelation zwischen männlichen und weiblichen Patienten (ICC: 0,97 gegenüber 0,98; rspearman: 0,98 versus 0,97). Die Konsistenz und Korrelation sind für die stationären Patienten besser als für die ambulanten Patienten (ICC: 0,98 gegenüber 0,96; rspearman: 0,98 gegenüber 0,96), wie in Tabelle 2 dargestellt.
Abbildung 1: Repräsentative Fotos des bewerteten Systems und seiner unterstützenden Reagenzien und Verbrauchsmaterialien. (A) Der Analysator verwendet das Coulter-Prinzip, um Leukozyten im Blut anhand von drei Klassifikationen nachzuweisen. Seine geringe Größe (242 mm x 397 mm x 321 mm) erleichtert den Transport. (B) Begrenzte unterstützende Reagenzien und Verbrauchsmaterialien werden in einem Anzug als Einzelpersonen-Detektionskit kombiniert, das bei Raumtemperatur gelagert und verwendet werden kann. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.
Abbildung 2: Streudiagramme von fünf Leukozytenindizes, die vom ausgewerteten System und Referenzsystem erfasst wurden. R2 = Linearitätskoeffizient, r s = Spearman-Korrelationskoeffizient (95 % CI) und n = Stichprobenumfang. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.
Abbildung 3: Bland-Altman-Plot der fünf Leukozytenindizes, die vom ausgewerteten System und Referenzsystem entdeckt wurden. Die Y-Achse stellt die Differenz der Messwerte zwischen dem ausgewerteten und dem Referenzsystem dar, während die X-Achse den Mittelwert der Leukozytenindizes darstellt, die von den ausgewerteten und Referenzsystemen gemessen werden. Die durchgehende schwarze Linie stellt den durchschnittlichen Differenzwert für den gesamten Stichprobenpool dar, und die gestrichelten schwarzen Linien stellen 95 % der oberen und unteren Übereinstimmungsgrenzen dar (mittlere Übereinstimmungsgrenzen ± 1,96 SD). ES i bezeichnet Werte, die mit dem ausgewerteten System gemessen werden, und RSi bezeichnet Werte, die vom Referenzsystem gemessen werden. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.
Tabelle 1: Allgemeine Daten der Studienpopulation. n = Stichprobenumfang, IQR = Interquartilsbereich. Der P-Wert entspricht dem Vergleich der Stichprobendaten aus Krankenhaus 1 und Krankenhaus 2. Der Chi-Quadrat-Test (χ2) wurde verwendet, um die Unterschiede zwischen kategorialen Variablen in Gruppen zu vergleichen (wenn die theoretische Häufigkeit kleiner als 5 war, wurde die genaue Wahrscheinlichkeitsmethode von Fisher zur Kalibrierung verwendet), und der t-Test oder der Mann-Whitney-U-Test wurde verwendet, um numerische Daten zwischen Gruppen zu vergleichen. Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.
Tabelle 2: Korrelationsanalyse der WBC-Ergebnisse, die vom ausgewerteten System und Referenzsystem in verschiedenen Patientengruppen erfasst wurden. n = Stichprobenumfang; IQR = Interquartilsbereich; und ICC = Intraklassen-Korrelationskoeffizient (ein Wert > 0,75 zeigt eine gute Zuverlässigkeit an). rs = Spearmans Korrelationskoeffizient; RS von 0,90-1,00, 0,70-0,90, 0,50-0,70, 0,30-0,50 und 0-0,30 zeigen jeweils eine sehr hohe, hohe, moderate, niedrige und vernachlässigbare positive Korrelation an. Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.
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Discussion
Mit dem Fortschritt der modernen Labormedizin ist es heute typisch, dass mehrere Nachweistechnologien in denselben oder verschiedenen Labors eingesetzt werden, um denselben klinischen Marker zu identifizieren. Infolgedessen sollte mehr Wert auf die Konsistenz der Testergebnisse gelegt werden, um Kliniken bei der genauen Interpretation und Beurteilung der Testergebnisse zu unterstützen. Der Untersuchung zufolge ist der Gesamtwert der Laborgeräte in tertiären Krankenhäusern und unabhängigen Laboratorien wesentlich höher als in Primärkrankenhäusern und anderen medizinischen Einrichtungen4. Obwohl diese Art von Ausrüstung die Vorteile der Erkennung mehrerer Gegenstände, der hohen Genauigkeit, Stabilität und des großen Detektionsflusses hat, hat sie Nachteile wie teure, große und schwere, komplexe Operationen, eine Anforderung an viele Reagenzien und eine hohe Nachfrage nach professionellen Qualitätsbetreibern, unter anderem, was sie für primäre medizinische Einrichtungen ungeeignet macht. Die Entwicklung von Detektionsinstrumenten und -geräten entwickelt sich ständig in Richtung Automatisierung, Intelligenz, Standardisierung, Personalisierung und kleine Portabilität9. Vorteile von POCT-Testgeräten, wie hohe Aktualität, Leichtigkeit und einfache Tragbarkeit sowie keine Wartung, gleichen die Mängel großer Blutanalysatoren aus und werden von primärmedizinischen Einrichtungen leichter akzeptiert10. Die Realisierung der Vergleichbarkeit der Prüfergebnisse derselben Probe und Gegenstände durch verschiedene Prüfgeräte ist der Kerninhalt des Laborqualitätsmanagements11. Allerdings bewerten nur wenige Studien die Korrelation und Konsistenz zwischen POCT-Hämatologie-Analysator und ähnlichen klinischen Produkten.
Die Patienten in dieser Studie wurden nach dem Zufallsprinzip aus zwei Zentren in Guangzhou (Krankenhaus 1) und Zhuhai (Krankenhaus 2), China, rekrutiert. Es gab keinen signifikanten Unterschied im Geschlechterverhältnis zwischen den beiden Zentren. Zu den eingeschriebenen Patienten gehörten diejenigen, die Krankenhäuser zur körperlichen Untersuchung besuchten, sowie ambulante und stationäre Patienten aus der Inneren Medizin, Chirurgie, Geburtshilfe und Gynäkologie, Pädiatrie, Intensivstation usw. Das Durchschnittsalter der Patienten in Krankenhaus 1 ist signifikant höher als das in Krankenhaus 2 (58 (37, 68) gegenüber 46 (31, 63); P < 0,001). Krankenhaus 1 ist ein national wichtiges spezialisiertes Krankenhaus für Atemwegserkrankungen, wobei die meisten Patienten an Atemwegserkrankungen leiden, die eher ältere Menschen betreffen12. Die wissenschaftliche Studie zum Altern ergab, dass der Anteil der über 65-Jährigen in Krankenhaus 1 höher ist als der in Krankenhaus 2 (6,67% gegenüber 5,01%)13.
Das neuartige kartenbasierte POCT-Leukozyten-Detektionssystem nutzt das Prinzip der elektrischen Impedanz, um Leukozyten und ihre Volumenverteilungzu erkennen 15,16. Wenn man den Unterschied in der elektrischen Leitfähigkeit zwischen Blutzellen und Elektrolytlösungen ausnutzt, kann es bei Blutzellen mit unterschiedlichen Volumengrößen durch das Zählloch zu Strom- oder Spannungsänderungen innerhalb und außerhalb des Lochs kommen und eine Impulsspannung bilden. Diese Pulsspannung ist vergleichbar mit der Anzahl der Blutzellen und entspricht der Volumengröße, wodurch indirekt Gruppen von Blutzellen unterschieden und separat gezählt werden. Mehrere kritische Schritte bei der Leukozytendetektion mit dem ausgewerteten Analysator müssen beachtet werden, was eng mit der Genauigkeit der Testergebnisse zusammenhängt. Erstens sollte bei der Blutentnahme der erste Tropfen Blut mit einem sterilen Trockentupfer abgewischt werden, da er überschüssige Gewebeflüssigkeit enthalten kann, die die Testergebnisse beeinflussen kann. Zweitens sollte nach dem Sammeln des zweiten Bluttropfens mit einem Kapillarröhrchen das an der Außenseite des Röhrchens befestigte Blut abgewischt werden, um sicherzustellen, dass das gesammelte Blutprobenvolumen genau 5 μ beträgt L.In Zusätzlich sollten Blutproben und hämolytische Reagenzien vollständig gemischt werden. Stellen Sie gleichzeitig sicher, dass alle Lösungen vollständig in das Blutzellerkennungsmodul gequetscht werden.
Aufgrund seiner herausragenden Vorteile, einschließlich niedriger Kosten, einfacher Bedienung, Schnelligkeit und Freiheit von täglicher Wartung, eignet sich dieses POCT-System sehr gut für den Einsatz in ambulanten Zentren oder primärmedizinischen Einheiten, was eine wichtige Ergänzung zur aktuellen klinischen Anwendungdarstellt 4. Die Anwendung dieses Systems kann die Blutroutineuntersuchung in allen primären medizinischen Einrichtungen in allen Entwicklungsgebieten Chinas abdecken und hat eine wichtige klinische Bedeutung für das Frühscreening von Krankheiten, insbesondere Infektionskrankheiten und Blutkrankheiten17,18. Eine wichtige Einschränkung ist jedoch, dass Leukozyten nur in drei Kategorien unterteilt werden können (Neutrophile, Lymphozyten, Zwischenzellen). In Zukunft soll die Klassifikationsfähigkeit des Systems weiter verbessert werden, um den Zweck einer genauen Diagnose zu erreichen.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass der POCT-Leukozytenanalysator als neuartiges Leukozytenanalysegerät die Vorteile hat, tragbar, kostengünstig, einfach zu bedienen und schnell und genau zu erkennen. Es weist eine gute Korrelation, eine starke Konsistenz und einen zuverlässigen Vergleich mit dem in Kliniken weit verbreiteten automatischen Hämatologie-Analysator auf und eignet sich daher für den Einsatz in primärmedizinischen Einheiten.
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Disclosures
Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Acknowledgments
Diese Studie wurde von der Medical Scientific Research Foundation der Provinz Guangdong, China (A2019224) unterstützt. Die Fördergruppen stimmten dem Studiendesign, der Datenanalyse, der Manuskriptvorbereitung und der Entscheidung zur Veröffentlichung zu. Für diese Studie wurden keine weiteren Mittel erhalten.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blood cell detection module | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Blood lancet | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Hemolytic reagent | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| IBM SPSS Statistics 25 | International Business Machines Corp., Armonk, NY | Software for data analysis | |
| MedCalc 11.4.2.0 | 2021 MedCalc Software Ltd | Software for data analysis | |
| Microsoft Excel 2019 | Microsoft | Software for data analysis | |
| Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | CX-2000 | Evaluated system |
| Quantitative pipette with capillary tube inside | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | ADVIA 2120i | Reference system 2 |
| UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables | Beckman Coulter, Inc. | DxH 800 | Reference system 1 |
References
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