Summary
Здесь представлен протокол измерения лейкоцитов периферической крови с помощью анализатора лейкоцитов на основе карты POCT. Одни и те же образцы крови были протестированы двумя автоматизированными гематологическими анализаторами для оценки согласованности и точности результатов. Результаты показали, что оцениваемый анализатор имел хорошую корреляцию с системой отсчета.
Abstract
Лейкоциты (лейкоциты) являются важным показателем воспаления в организме, и они могут помочь различать бактериальные и вирусные инфекции. В настоящее время большинство первичных медицинских учреждений в Китае имеют низкий процент внедрения технологии анализа крови, и в центрах первичной медико-санитарной помощи срочно необходима система обнаружения гематологии с высоким соотношением цены и эффективности и простотой работы. В этой статье представлен принцип и процедуры работы анализатора лейкоцитов на основе карт на основе карт poCT (оцениваемой системы), который использовался для обнаружения индексов лейкоцитов, таких как нейтрофилы, лимфоциты и клетки промежуточной группы (включая эозинофилы, базофилы и моноциты) в цельной крови. Результаты оцениваемой системы сравнивались с результатами двух коммерческих автоматических гематологических анализаторов (эталонная система). Проанализирована корреляция и согласованность между оцениваемой системой и коммерческими эталонными системами. Результаты показали, что количество лейкоцитов и количество гранулоцитов, обнаруженных оцениваемой и референсной системами, показали сильную положительную корреляцию (rs = 0,972 и 0,973 соответственно), в то время как количество лимфоцитов показало относительно низкую корреляцию (rs = 0,851). График Бланда-Альтмана показал, что основное различие между значениями, обнаруженными оцениваемой системой и системами отсчета, находится в пределах 95% согласия (LoA), что указывает на то, что две системы находятся в хорошем согласии. В заключение, оцениваемая система имеет отличную корреляцию, надежную согласованность и надежное сравнение с результатами широко используемых автоматических гематологических анализаторов. Он идеально подходит для выявления лейкоцитов в первичных медицинских учреждениях, где отсутствует полностью автоматический пятикатегорийный гематологический анализатор, особенно в период нормализации профилактики и контроля COVID-19.
Introduction
Количество лейкоцитов (WBC) или дифференциал является важным показателем, отражающим воспаление организма, который может отличить бактериальную инфекцию от вирусной. Анализ WBC также полезен для последующей диагностики и лечения1. В настоящее время пятиклассификаторный полностью автоматический гематологический анализатор широко применяется в крупных и средних медицинских подразделениях, поскольку он является автоматическим, обладает высокой эффективностью, дает точные и надежные результаты, эффективно снижает интенсивность работы лаборантов. Играет важную роль при клиническом обследовании 2,3. Тем не менее, большинство первичных медицинских учреждений, таких как общественные медицинские центры и частные клиники, имеют низкий уровень внедрения гематологического анализатора. Согласно общенациональному многоцентровому исследованию по строительству клинических лабораторий в Китае, лабораторное строительство первичных медицинских учреждений является недостаточным, о чем свидетельствуют небольшие размеры лабораторий, недостаточная передача талантов и распространение науки и техники в сельской местности, среди других факторов4.
С декабря 2019 года COVID-19 начал распространяться по всему миру и перерос в глобальную пандемию. В «постэпидемическую эпоху» был предложен ряд национальных стратегий по осуществлению нормализованных мер профилактики и контроля эпидемических ситуаций. Лаборатория первичных медицинских учреждений играет важную роль в диагностике и лечении на низовом уровне, а также в профилактике и борьбе с болезнями. Это первая линия обороны и контроля в эпидемических ситуациях, и она имеет решающее значение для профилактики и борьбы с COVID-195. Некоторые исследования показали, что обнаружение лимфоцитов периферической крови и нейтрофилов будет способствовать скринингу, диагностике и лечению пациентов с COVID-19, и что соотношение нейтрофилов / лимфоцитов также может быть использовано в качестве клинических показателей раннего предупреждения о тяжелой и критической COVID-19 6,7. Кроме того, обнаружение лейкоцитов имеет то преимущество, что обеспечивает быстрый отчет. Первичные медицинские учреждения и учреждения здравоохранения могут широко проводить обнаружение лейкоцитов, чтобы помочь своевременно обнаружить и провести скрининг подозреваемых инфекций.
Лейкоцитарный анализатор на основе карт POCT (оцениваемая система; см. Таблицу материалов) представляет собой трехклассификаторный анализатор клеток крови, основанный на золотом стандарте «Принцип Култера». Оцениваемая система предоставляет результаты количественного анализа одной гистограммы WBC и семи параметров крови, включая количество лейкоцитов, количество гранулоцитов (Gran#), процент гранулоцитов (Gran%), количество лимфоцитов (Lym#), процент лимфоцитов (Lym%), количество промежуточных клеток (Mid#) и процент промежуточных клеток (Mid%). Он использует инновационную технологию на основе карт и имеет такие преимущества, как наличие комплекта для обнаружения одного человека, отсутствие жидких отходов, быстрое обнаружение в течение 30 секунд, отсутствие регулярного обслуживания и удобная эксплуатация. Поэтому он особенно хорошо подходит для первичных медицинских учреждений. Это исследование направлено на оценку эффективности клинического обнаружения лейкоцитарного анализатора на основе карт POCT путем сравнения с двумя полностью автоматическими коммерческими гематологическими анализаторами (эталонная система 1 и эталонная система 2; см. Таблицу материалов) из лабораторий двух крупных государственных больниц.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Это исследование и использование образцов крови человека были одобрены Комитетом по этике Первой аффилированной больницы Медицинского университета Гуанчжоу (GYYY-2016-73). Все участники дали свое письменное согласие самостоятельно или через своих родителей (в случае детей).
1. Основная информация исследовательской комиссии
ПРИМЕЧАНИЕ: Венозная кровь была собрана у пациентов, которые посетили Первую аффилированную больницу Медицинского университета Гуанчжоу (больница 1) и пятую аффилированную (Чжухай) больницу Медицинского университета Цзуньи (больница 2). Инструментом, используемым для планового обследования крови в больнице 1, является референсная система 1, в то время как больница 2 использует референс-систему 2.
- В общей сложности 1066 образцов крови были взяты у пациентов, которые посетили больницу 1 (532) и больницу 2 (534) и прошли плановые обследования крови в течение января 2021 года.
ПРИМЕЧАНИЕ: Пациенты были выбраны случайным образом, пришли из нескольких отделений и страдают от различных заболеваний. - Исключить пациентов с неполной медицинской документацией, а также тех, кто не сотрудничал или отказался дать информированное согласие. Исключите тех пациентов, у которых образцы крови показали гемолиз, хилевую кровь или помутнение, или если кровь была недостаточной по объему или хранилась более 24 ч.
2. Исследование потока и измерений, представляющих интерес
ПРИМЕЧАНИЕ: Оцениваемой системе требуется 5 мкл образца крови для определения лейкоцитов и трех классификационных параметров. После сбора крови оцениваемая система и система отсчета использовались для планового обследования крови.
- Обнаружение лейкоцитов и трех классификационных параметров 532 и 534 образцов крови с использованием системы отсчета и оцениваемой системы соответственно.
- Пусть высококвалифицированный техник случайным образом перенумерует выбранные образцы крови после завершения клинического теста с помощью эталонной системы. Затем передайте образцы другому высококвалифицированному специалисту для обнаружения WBC и классификации параметров с использованием оцениваемой системы.
- Раскройте результаты двух систем.
- Попросите третьего специалиста проанализировать пять показателей (а именно WBC count, Gran#, Gran%, Lym#, Lym%), разделяемых только оцениваемыми и эталонными системами.
3. Порядок использования оцениваемой системы
ПРИМЕЧАНИЕ: Оцениваемая система использует принцип электрического импеданса (принцип Култера) для подсчета WBC в элементе обнаружения. Протокол тестирования разделен на шесть частей: запуск анализатора, подготовка теста, забор крови, смешивание реагентов, анализ образцов и выключение анализатора.
- Запустите анализатор
- Поверните переключатель питания [O/I] на задней панели анализатора в [I]. Убедитесь, что индикатор анализатора горит.
- Введите правильное имя пользователя и пароль в диалоговом окне входа и нажмите «Войти». Убедитесь, что система автоматически выполняет самопроверку и инициализацию запуска, а затем отображает домашнюю страницу Анализ образцов .
- Подготовка к тестам
ПРИМЕЧАНИЕ: Для полного анализа образца крови требуется четыре расходных материала: ланцет крови, гемолитический реагент, количественная пипетка с капиллярной трубкой внутри и модуль обнаружения клеток крови (рисунок 1).- Нажмите «Следующий образец», правильно введите пол, имя и другую клиническую информацию (по мере необходимости) и выберите соответствующую референс-группу. Нажмите OK , чтобы сохранить информацию.
ПРИМЕЧАНИЕ: Разные возрастные группы имеют свой собственный контрольный интервал, поэтому выбор правильной референтной группы может получить более подходящую подсказку тревоги. Новорожденный: 1-28 дней; Дети: от 29 дней до 14 лет; Взрослый мужчина/женщина/общий: старше 15 лет. - Разорвите тонкую пленку модуля обнаружения клеток крови, нажмите кнопку Вход/Выход из склада и правильно поместите модуль обнаружения клеток крови в склад машины, с его отверстием, обращенным наружу.
- Прокол гемолитического реагента герметизирующей пленкой кончиком количественной пипетки.
- Нажмите «Следующий образец», правильно введите пол, имя и другую клиническую информацию (по мере необходимости) и выберите соответствующую референс-группу. Нажмите OK , чтобы сохранить информацию.
- Забор крови
- Забор капиллярной крови: Продезинфицируйте левый безымянный палец ватным тампоном, смоченным в спирте одним способом и один раз. После того, как спирт естественным образом высохнет, используйте кровяной ланцет, чтобы проколоть кожу левого безымянного пальца.
- Аккуратно выдавите первую каплю крови и протрите ее ватным тампоном. Выжмите достаточно крови, чтобы сформировать полный «каплю воды» и собрать 5 мкл образца крови, используя капиллярную трубку внутри количественной пипетки.
- Забор венозной крови: Соберите 5 мкл предварительно полученного образца венозной крови с помощью капиллярной трубки внутри количественной пипетки. Все тесты в этом исследовании использовали венозную кровь, которая была собрана у каждого пациента (5 мл) с использованием вакуумного сосуда, содержащего антикоагулянт ЭДТА-К2. Пройдите все тесты в течение от 30 мин до 24 ч.
- Забор капиллярной крови: Продезинфицируйте левый безымянный палец ватным тампоном, смоченным в спирте одним способом и один раз. После того, как спирт естественным образом высохнет, используйте кровяной ланцет, чтобы проколоть кожу левого безымянного пальца.
- Смешивание реагентов
- Вставьте количественную пипетку в гемолитический реагент (2,5 мл) и плотно прижмите его, чтобы освободить образец крови из капиллярной трубки.
- Смешайте кровь в капиллярной трубке и гемолитическом реагенте, перевернув ее вверх дном 15-20 раз с постоянной скоростью, пока в капиллярной трубке не останется явной красной крови. В этом исследовании образец крови смешивают с гемолитическим реагентом в соотношении 1:500.
- Анализ образцов
- Откройте крышку и сожмите раствор в модуль обнаружения клеток крови.
- Нажмите кнопку Вход/Выход со склада . После того, как модуль обнаружения клеток крови войдет на склад, нажмите кнопку Подсчет .
ПРИМЕЧАНИЕ: Мигающий зеленый индикатор указывает на то, что анализатор ведет подсчет. Модуль обнаружения клеток крови автоматически покинет склад после подсчета, и его следует удалить и утилизировать должным образом. Каждый тест занимает всего 30 с. - На интерфейсе анализатора дважды нажмите кнопку OK , чтобы подтвердить, что модуль обнаружения клеток крови был удален.
- На интерфейсе анализатора нажмите на кнопку Печать , чтобы распечатать результаты теста.
- Выключите анализатор
- В интерфейсе анализатора нажмите на кнопку завершения работы и выберите Да в диалоговом окне, которое появляется на интерфейсе. Убедитесь, что система начинает выполнять последовательность завершения работы.
- Установите переключатель [O/I] на задней панели мэйнфрейма в [O] после завершения последовательности завершения работы.
4. Статистический анализ
- Обнаруживайте выбросы с помощью обобщенного метода экстремального студенческого отклонения (ESD) и устраняйте эти выбросы для последующего статистического анализа в соответствии с требованиями Американской ассоциации по стандартизации клинических лабораторий (CLSI) EP9-A3 документ8.
- Вычисление описательных параметров, таких как средние значения и стандартные отклонения (SD) для нормально распределенных непрерывных данных; медианы и 25%-75% межквартильные диапазоны для ненормально распределенных данных; и частоты и процентные показатели для категориальных данных.
- Используйте тест Пирсона χ2 или точный тест Фишера для определения степени взаимосвязи между категориальными переменными. Используйте Т-тест парной выборки или тест Манна-Уитни U для сравнения числовых данных между группами.
- Покажите распределение и линейную ассоциацию обнаруженных результатов двух систем с помощью точечных графиков. Примените непараметрический корреляционный тест Спирмена для доступа к степени взаимосвязи между количественными переменными. Используйте графики Блэнда-Альтмана и внутриклассовый коэффициент корреляции (ICC) для проверки соответствия между количественными значениями, обнаруженными двумя системами.
- Анализируйте данные с помощью статистического программного обеспечения по выбору. P-значение < 0,05 считается статистически значимым.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Пример данных
В общей сложности 1066 пациентов были зачислены в два исследовательских центра, включая больницу 1 (n = 532) и больницу 2 (n = 534). Характеристики пациента приведены в таблице 1. Средний возраст мужчин составляет 49,9%, средний возраст — 52 (32, 66) лет. Пациенты, включенные в исследование, состояли из стационарных пациентов (51,1%), амбулаторных пациентов (39,0%) и пациентов с физическим обследованием (8,4%). Образцы были протестированы у пациентов, посетивших отделения внутренней медицины (30,6%), хирургические отделения (19,1%), отделения акушерства и гинекологии (9,0%), педиатрические отделения (3,9%) и др.
Обнаружение аберрантных результатов (выбросов)
Взяв результаты системы отсчета как горизонтальную ось и оцениваемые результаты системы как вертикальную ось, был получен точечный график пяти лейкоцитарных индексов 1066 образцов (результаты не показаны). Подозрительные аномальные точки очевидны на графике рассеяния пяти лейкоцитарных индексов. Согласно результатам метода ESD, среди 1066 образцов было 16 выбросов в подсчете WBC, 27 выбросов в Gran#, 8 выбросов в Gran%, 15 выбросов в Lym# и 9 выбросов в Lym%. Данные были проанализированы после устранения выбросов, которые в общей сложности составляют менее 5%.
Корреляционный анализ в оцениваемой системе и эталонных системах
На рисунке 2 показана точечная диаграмма и корреляционный анализ результатов теста Спирмена. Результаты показывают, что WBC count, Gran#, Gran%, Lym# и Lym% имеют хорошую линейность и корреляцию между двумя системами; линейный коэффициент R2 находится между 0,7759 и 0,9676, а коэффициент корреляции rspearman составляет от 0,851 до 0,973 (все значения P < 0,001). WBC и Gran# демонстрируют самую сильную корреляцию между двумя системами (R2 = 0,9608 и 0,9676 соответственно; rspearman = 0,972 и 0,973 соответственно), тогда как Lym# демонстрируют самую слабую корреляцию между системами (R2 = 0,7759; rspearman = 0,851). Однако мы не смогли оценить корреляцию и консистенцию промежуточных клеток (Mid#/%), поскольку они разделены на более мелкие деления (т.е. эозинофилы, базофилы и моноциты) в системе отсчета.
Анализ согласованности
Для визуализации анализа согласованности был получен участок Бланда-Альтмана, а SD ±2 был обозначен как пределы согласия (LoA). Результаты показаны на рисунке 3. Для WBC среднее значение разницы составляет 0,9 x 109/l между оцениваемой и эталонной системами, а 95% доверительный интервал (CI) разницы составляет -0,7 x 109 ~ 2,5 × 109/L.В пределах 95% ДИ находится 94,48% (992/1050) выборок, что означает, что результаты WBC, обнаруженные оцениваемой системой, хорошо согласуются с системой отсчета. Для Gran# и Gran% среднее значение разницы между вычисляемой и эталонной системами составляет 0,8 x 109/л и 2,0% соответственно, в то время как 95% ДИ разницы составляет 0,7 x 109 ~ 2,2 x 109/л и -7,7% ~ 11,7% соответственно. В пределах 95% ДИ имеется 94,23% (979/1039) и 94,99% (1005/1058) выборок, соответственно. Для образцов Lym# и Lym% в пределах 95% ДИ имеется 93,82% (986/1051) и 93,76% (991/1057), а среднее значение разницы составляет 0,33 х 109/л и 1,8% соответственно. Средние значения различий в индексах лейкоцитов все выше 0, что указывает на то, что результаты тестов оцениваемой системы несколько выше, чем у системы отсчета.
Корреляционный анализ в разных группах пациентов
Результаты подсчета WBC для образцов от пациентов разного возраста и пола, а также из разных отделений были сопоставлены и проанализированы на предмет корреляций. Результаты показали, что уровень WBC оцениваемой системы выше, чем у системы отсчета. Нет существенной разницы в консистенции и корреляции между пациентами мужского и женского пола (ICC: 0,97 против 0,98; rspearman: 0,98 против 0,97). Последовательность и корреляция лучше для стационарных пациентов, чем для амбулаторных (ICC: 0,98 против 0,96; rspearman: 0,98 против 0,96), как показано в таблице 2.
Рисунок 1: Репрезентативные фотографии оцениваемой системы и поддерживающих ее реагентов и расходных материалов. (A) Анализатор использует принцип Култера для обнаружения лейкоцитов в крови по трем классификациям. Его небольшой размер (242 мм x 397 мм x 321 мм) позволяет легко транспортировать. (B) Ограниченные вспомогательные реагенты и расходные материалы объединены в костюм в виде комплекта для обнаружения одного человека, который можно хранить и использовать при комнатной температуре. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Точечные графики пяти лейкоцитарных индексов, обнаруженных оцениваемой системой и системой отсчета. R2 = коэффициент линейности, r s = коэффициент корреляцииСпирмена (95% ДИ) и n = размер выборки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: График Блэнда-Альтмана из пяти лейкоцитарных индексов, обнаруженных оцениваемой системой и системой отсчета. Ось Y отображает разницу измеренных значений между вычисляемой и эталонной системами, в то время как ось X отображает среднее значение индексов лейкоцитов, измеренных оцениваемой и эталонной системами. Непрерывная черная линия представляет собой среднее значение разницы для всего пула выборок, а пунктирные черные линии представляют собой 95% верхней и нижней границ соглашения (средние пределы согласия ± 1,96 SD). ESi обозначает значения, измеренные оцениваемой системой, а RSi обозначает значения, измеренные системой отсчета. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Таблица 1: Общие данные исследуемой популяции. n = размер выборки, IQR = межквартильный диапазон. Значение P соответствует сравнению выборочных данных из больницы 1 и больницы 2. Тест хи-квадрата (χ2) использовался для сравнения различий между категориальными переменными в группах (когда теоретическая частота была меньше 5, для калибровки использовался метод точной вероятности Фишера), а t-тест или тест Манна-Уитни U использовался для сравнения числовых данных между группами. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу.
Таблица 2: Корреляционный анализ результатов лейкоцитов, выявленных оцениваемой системой и референтной системой в разных группах пациентов. n = размер выборки; IQR = межквартильный диапазон; и ICC = коэффициент внутриклассовой корреляции (значение > 0,75 указывает на хорошую надежность). rs = коэффициент корреляции Спирмена; rs 0,90-1,00, 0,70-0,90, 0,50-0,70, 0,30-0,50 и 0-0,30 указывают, соответственно, на очень высокую, высокую, умеренную, низкую и незначительную положительную корреляцию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
С развитием современной лабораторной медицины в настоящее время типично видеть несколько технологий обнаружения, используемых в одних и тех же или разных лабораториях для идентификации одного и того же клинического маркера. В результате следует уделять больше внимания последовательности результатов тестов, чтобы помочь клиникам в точных интерпретациях и суждениях о результатах тестов. По данным следствия, общая стоимость лабораторного оборудования в третичных больницах и независимых лабораториях существенно выше, чем в первичных больницах и других медицинских учреждениях4. Хотя этот тип оборудования имеет преимущества обнаружения нескольких предметов, высокой точности, стабильности и большого потока обнаружения, у него есть недостатки, такие как дорогая, большая и тяжелая, сложная работа, потребность во многих реагентах и высокий спрос на профессиональных операторов качества, среди прочего, что делает его непригодным для использования первичными медицинскими учреждениями. Развитие приборов и оборудования обнаружения постоянно развивается в направлении автоматизации, интеллекта, стандартизации, персонализации и малой переносимости9. Преимущества оборудования для тестирования POCT, такие как высокая своевременность, легкость и удобство переноски, а также отсутствие технического обслуживания, восполняют недостатки больших анализаторов крови и легче принимаются первичными медицинскими учреждениями10. Осознание сопоставимости результатов испытаний одного и того же образца и изделий различными испытательными приборами является основным содержанием лабораторного управления качеством11. Тем не менее, немногие исследования оценивают корреляцию и согласованность между гематологическим анализатором POCT и аналогичными клиническими продуктами.
Пациенты в этом исследовании были набраны случайным образом из двух центров в Гуанчжоу (больница 1) и Чжухай (больница 2), Китай. Существенных различий в соотношении полов между двумя центрами не было. Среди зарегистрированных пациентов были те, кто посещал больницы для физического осмотра, а также амбулаторные и стационарные пациенты из внутренней медицины, хирургии, акушерства и гинекологии, педиатрических отделений, отделений интенсивной терапии и т. Д. Средний возраст пациентов в больнице 1 значительно выше, чем в больнице 2 (58 (37, 68) против 46 (31, 63); P < 0,001). Больница 1 является национальной ключевой специализированной больницей для респираторных заболеваний, причем большинство пациентов страдают от респираторных заболеваний, которые с большей вероятностью затрагивают пожилыхлюдей в возрасте 12 лет. Научное исследование старения показало, что доля людей старше 65 лет в больнице 1 выше, чем в больнице 2 (6,67% против 5,01%)13.
Есть некоторые выбросы в количестве гранулоцитов, составляющие 2,5%, но выбросы всех элементов составляют менее 5%, что находится в допустимом диапазоне. Линейный коэффициентR2 результатов испытаний оцениваемой системы и системы отсчета превышает 0,75, что указывает на то, что линии линейной регрессии двух систем имеют хорошую линейную пригодность, при этом количество лейкоцитов и количество нейтрофилов имеют лучшую линейную хорошую пригодность соответствия. Наиболее сильная корреляция была обнаружена между количеством лейкоцитов и гранулоцитов (rs = 0,972 и 0,973 соответственно), обнаруженных двумя системами, за которым следуют процент гранулоцитов и процент лимфоцитов (rs = 0,939 и 0,932 соответственно) и число лимфоцитов (rs = 0,851). Подобно исследованию, влияние оборудования серии POCT на подсчет лейкоцитов лучше, чем результаты классифицированных индексов14. Кроме того, график Блэнда-Альтмана разницы между тестовыми данными двух систем показывает, что большинство тестовых точек находятся в пределах 95% предела согласованности, что указывает на то, что результаты испытаний системы оценки и системы отсчета находятся в хорошем согласии. Хотя результаты показывают, что консистенция анализа лимфоцитов немного ниже, чем у лейкоцитов и гранулоцитов, коэффициент корреляции лимфоцитов все же выше 0,85, что означает, что две системы также имеют хорошую согласованность при обнаружении лимфоцитов. С другой стороны, график Бланда-Альтмана показывает, что результаты испытаний оцениваемой системы несколько выше тестовых значений системы отсчета. Предполагается, что это может быть связано с систематическими ошибками в оцениваемой системе, что делает общий результат высоким. Во-первых, перед началом теста следует тщательно проверить, правильно ли размещен анализатор; например, окружающая часть инструмента должна находиться на определенном расстоянии (≥ 20 см) от стены или препятствий, а пространство, в котором размещен инструмент, должно хорошо вентилироваться. Во-вторых, команда R и D также может корректировать внутренние параметры системы для исправления систематической ошибки.
Новая карточная система обнаружения лейкоцитов POCT использует принцип электрического импеданса для обнаружения лейкоцитов и их объемного распределения15,16. Пользуясь разницей в электропроводности между клетками крови и растворами электролитов, когда клетки крови с разными объемными размерами проходят через счетное отверстие, это может вызвать изменения тока или напряжения внутри и снаружи отверстия, образуя импульсное напряжение. Это напряжение импульса сопоставимо с количеством клеток крови и соответствует объемному размеру, тем самым косвенно выделяя группы клеток крови и подсчитывая их отдельно. Необходимо обратить внимание на несколько критических этапов в обнаружении лейкоцитов с помощью оцениваемого анализатора, что тесно связано с точностью результатов теста. Во-первых, при сборе крови первую каплю крови следует вытереть стерильным сухим тампоном, так как он может содержать избыток тканевой жидкости, что может повлиять на результаты анализов. Во-вторых, после сбора второй капли крови капиллярной трубкой кровь, прикрепленную к внешней стороне пробирки, следует вытереть, чтобы убедиться, что объем собранного образца крови составляет ровно 5 мкм L.In добавления образцы крови и гемолитические реагенты должны быть полностью перемешаны. В то же время убедитесь, что все растворы полностью втиснуты в модуль обнаружения клеток крови.
Благодаря своим выдающимся преимуществам, включая низкую стоимость, простую эксплуатацию, быстроту и отсутствие ежедневного обслуживания, эта система POCT очень подходит для использования в амбулаторных центрах или первичных медицинских учреждениях, что является важным дополнением к текущему клиническому применению4. Применение этой системы может охватывать плановое обследование крови во всех первичных медицинских учреждениях во всех развивающихся районах Китая и имеет важное клиническое значение для раннего скрининга заболеваний, особенно инфекционных заболеваний и заболеваний крови17,18. Однако важным ограничением является то, что лейкоциты можно разделить только на три категории (нейтрофилы, лимфоциты, промежуточные клетки). В будущем классификационная способность системы должна быть дополнительно улучшена для достижения цели точной диагностики.
В заключение, как новое оборудование для анализа лейкоцитов, анализатор лейкоцитов POCT имеет преимущества портативности, низкой стоимости, простоты в эксплуатации, быстрого и точного обнаружения; он демонстрирует хорошую корреляцию, сильную консистенцию и надежное сравнение с автоматическим гематологическим анализатором, широко используемым в клиниках, и поэтому подходит для использования в первичных медицинских подразделениях.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторам нечего раскрывать.
Acknowledgments
Это исследование было поддержано Фондом медицинских научных исследований провинции Гуандун, Китай (A2019224). Группы финансирования согласились с дизайном исследования, анализом данных, подготовкой рукописей и решением о публикации. Никакого другого финансирования для этого исследования получено не было.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blood cell detection module | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Blood lancet | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Hemolytic reagent | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| IBM SPSS Statistics 25 | International Business Machines Corp., Armonk, NY | Software for data analysis | |
| MedCalc 11.4.2.0 | 2021 MedCalc Software Ltd | Software for data analysis | |
| Microsoft Excel 2019 | Microsoft | Software for data analysis | |
| Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | CX-2000 | Evaluated system |
| Quantitative pipette with capillary tube inside | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | ADVIA 2120i | Reference system 2 |
| UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables | Beckman Coulter, Inc. | DxH 800 | Reference system 1 |
References
- Agbaria, A. H., et al. Diagnosis of inaccessible infections using infrared microscopy of white blood cells and machine learning algorithms. The Analyst. 145 (21), 6955-6967 (2020).
- Mlinaric, A., et al. Autovalidation and automation of the postanalytical phase of routine hematology and coagulation analyses in a university hospital laboratory. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 56 (3), 454-462 (2018).
- Genzen, J. R., et al. Challenges and opportunities in implementing total laboratory automation. Clinical Chemistry. 64 (2), 259-264 (2018).
- Kang, F., Li, W., Wang, W., Chen, B., Wang, Z. A nationwide multicenter study on clinical laboratory construction in China. Chinese Journal of Hospital Administration. 35 (10), 867-871 (2019).
- Rawaf, S., et al. Lessons on the COVID-19 pandemic, for and by primary care professionals worldwide. The European Journal of General Practice. 26 (1), 129-133 (2020).
- Balla, M., et al. COVID-19, Modern pandemic: a systematic review from front-line health care providers' perspective. Journal of Clinical Medicine Research. 12 (4), 215-229 (2020).
- Cheng, B., et al. Predictors of progression from moderate to severe coronavirus disease 2019: a retrospective cohort. Clinical Microbiology and Infection. 26 (10), 1400-1405 (2020).
- Budd, J. Measurement procedure comparison and bias estimation using patient samples; approved guideline-third edition. Clinical and Laboratory Standards Institute. 33 (11), (2013).
- Wang, Y. Development trend of testing instruments in grass-roots hospitals. Medical Equipment. 24 (03), 26-27 (2011).
- Miesler, T., Wimschneider, C., Brem, A., Meinel, L. Frugal innovation for point-of-care diagnostics controlling outbreaks and epidemics. ACS Biomaterials Science & Engineering. 6 (5), 2709-2725 (2020).
- Vesper, H. W., Myers, G. L., Miller, W. G. Current practices and challenges in the standardization and harmonization of clinical laboratory tests. The American Journal of Clinical Nutrition. 104, Suppl 3 907-912 (2016).
- Vaz Fragoso, C. A. Epidemiology of lung disease in older persons. Linics in Geriatric Medicine. 33 (4), 491-501 (2017).
- Qian, C., Xie, T. Regional differences and demographic reasons of population aging in Guangdong Province. Scientific Research on Aging. 5 (01), 46-56 (2017).
- de Graaf, A. J., Hiemstra, S. W., Kemna, E. W. M., Krabbe, J. G. Evaluation of a POCT device for C-reactive protein, hematocrit and leukocyte differential. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 55 (11), 251-253 (2017).
- Chabot-Richards, D. S., George, T. I. White blood cell counts: reference methodology. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 11-24 (2015).
- Green, R., Wachsmann-Hogiu, S. Development, history, and future of automated cell counters. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 1-10 (2015).
- Henry, B. M., de Oliveira, M. H. S., Benoit, S., Plebani, M., Lippi, G. Hematologic, biochemical and immune biomarker abnormalities associated with severe illness and mortality in coronavirus disease 2019 (COVID-19): a meta-analysis. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 58 (7), 1021-1028 (2020).
- Flanagan, B., Keber, B., Mumford, J., Lam, L. Hematologic conditions: leukocytosis and leukemia. FP Essentials. 485, 17-23 (2019).
