Summary
पीओसीटी कार्ड-आधारित ल्यूकोसाइट विश्लेषक का उपयोग करके परिधीय रक्त ल्यूकोसाइट्स को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल यहां प्रस्तुत किया गया है। परिणामों की स्थिरता और सटीकता का मूल्यांकन करने के लिए दो स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषकों द्वारा एक ही रक्त के नमूनों का परीक्षण किया गया था। परिणामों से पता चला कि मूल्यांकन किए गए विश्लेषक का संदर्भ प्रणाली के साथ एक अच्छा सहसंबंध था।
Abstract
सफेद रक्त कोशिका (डब्ल्यूबीसी) शरीर में सूजन का एक महत्वपूर्ण संकेतक है, और यह जीवाणु और वायरल संक्रमण के बीच अंतर करने में मदद कर सकता है। वर्तमान में, चीन में अधिकांश प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों में रक्त-परीक्षण तकनीक को अपनाने का खराब प्रतिशत है, और प्राथमिक स्वास्थ्य देखभाल केंद्रों में प्रदर्शन अनुपात और आसान संचालन के लिए उच्च मूल्य के साथ एक हेमेटोलॉजी डिटेक्शन सिस्टम की तत्काल आवश्यकता है। यह पेपर एक पॉइंट-ऑफ-केयर टेस्टिंग (पीओसीटी) कार्ड-आधारित ल्यूकोसाइट विश्लेषक (मूल्यांकन प्रणाली) के सिद्धांत और संचालन प्रक्रियाओं का परिचय देता है, जिसका उपयोग पूरे रक्त में न्यूट्रोफिल, लिम्फोसाइट्स और मध्यवर्ती समूह कोशिकाओं (ईोसिनोफिल, बेसोफिल और मोनोसाइट्स सहित) जैसे डब्ल्यूबीसी इंडेक्स का पता लगाने के लिए किया गया था। मूल्यांकन प्रणाली के परिणामों की तुलना दो वाणिज्यिक स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषकों (संदर्भ प्रणाली) से की गई थी। मूल्यांकन प्रणाली और वाणिज्यिक संदर्भ प्रणालियों के बीच सहसंबंध और स्थिरता का विश्लेषण किया गया था। परिणामों से पता चला है कि डब्ल्यूबीसी गिनती और मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों द्वारा पता लगाए गए ग्रैनुलोसाइट्स की संख्या ने एक मजबूत सकारात्मक सहसंबंध दिखाया (आरएस = 0.972 और 0.973, क्रमशः), जबकि लिम्फोसाइटों की संख्या ने अपेक्षाकृत कम सहसंबंध दिखाया (आरएस = 0.851)। एक ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट से पता चला है कि मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणालियों द्वारा पता लगाए गए मूल्यों के बीच प्रमुख अंतर समझौते (एलओए) की 95% सीमाओं के भीतर है, यह दर्शाता है कि दो प्रणालियां अच्छे समझौते में हैं। अंत में, मूल्यांकन की गई प्रणाली में एक उत्कृष्ट सहसंबंध, मजबूत स्थिरता और व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषकों के परिणामों के साथ एक विश्वसनीय तुलना है। यह प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों में डब्ल्यूबीसी का पता लगाने के लिए आदर्श है जहां एक पूर्ण-स्वचालित पांच-श्रेणी के हेमेटोलॉजी विश्लेषक अनुपलब्ध हैं, खासकर कोविड-19 सामान्यीकृत रोकथाम और नियंत्रण अवधि के दौरान।
Introduction
सफेद रक्त कोशिका (डब्ल्यूबीसी) गिनती या अंतर शरीर की सूजन को प्रतिबिंबित करने के लिए एक महत्वपूर्ण संकेतक है, जो वायरल संक्रमण से जीवाणु संक्रमण को अलग कर सकता है। डब्ल्यूबीसी विश्लेषण अनुवर्ती निदान और उपचार1 का मार्गदर्शन करने के लिए भी सहायक है। वर्तमान में, पांच-वर्गीकरण पूरी तरह से स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषक का व्यापक रूप से बड़े और मध्यम आकार की चिकित्सा इकाइयों में उपयोग किया जाता है, क्योंकि यह स्वचालित है, इसमें उच्च दक्षता है, सटीक और विश्वसनीय परिणाम उत्पन्न करता है, और प्रयोगशाला तकनीशियनों की कार्य तीव्रता को प्रभावी ढंग से कम करता है। यह नैदानिक परीक्षा 2,3 में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। हालांकि, अधिकांश प्राथमिक चिकित्सा संस्थान, जैसे सामुदायिक स्वास्थ्य देखभाल केंद्र और निजी क्लीनिक, हेमेटोलॉजी विश्लेषक की कम गोद लेने की दर है। चीन में नैदानिक प्रयोगशाला निर्माण पर एक राष्ट्रव्यापी बहुआयामी अध्ययन के अनुसार, प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों का प्रयोगशाला निर्माण अपर्याप्त है, जैसा कि प्रयोगशालाओं के छोटे आकार, अपर्याप्त प्रतिभा संचरण और ग्रामीण इलाकों में विज्ञान और प्रौद्योगिकी के प्रसार से प्रमाणित है, अन्य कारकोंके बीच 4.
दिसंबर 2019 के बाद से, सीओवीआईडी -19 ने पूरी दुनिया में फैलना शुरू कर दिया और एक वैश्विक महामारी में विकसित हुआ। 'महामारी के बाद के युग' में, महामारी की स्थितियों की सामान्यीकृत रोकथाम और नियंत्रण उपायों को लागू करने के लिए राष्ट्रीय नीतियों की एक श्रृंखला प्रस्तावित की गई है। प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों की प्रयोगशाला जमीनी स्तर पर निदान और उपचार और रोग की रोकथाम और नियंत्रण में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। यह महामारी की स्थितियों में रक्षा और नियंत्रण की पहली पंक्ति है, और यह कोविड-19 की रोकथाम और नियंत्रणके लिए महत्वपूर्ण है। कुछ अध्ययनों से पता चला है कि परिधीय रक्त लिम्फोसाइटों और न्यूट्रोफिल का पता लगाने से कोविड-19 रोगी स्क्रीनिंग, निदान और उपचार में योगदान मिलेगा, और न्यूट्रोफिल / लिम्फोसाइट अनुपात का उपयोग गंभीर और महत्वपूर्ण सीओवीआईडी -19 6,7 के नैदानिक प्रारंभिक चेतावनी संकेतकों के रूपमें भी किया जा सकता है। इसके अलावा, ल्यूकोसाइट का पता लगाने से एक त्वरित रिपोर्ट प्रदान करने का लाभ होता है। प्राथमिक चिकित्सा और स्वास्थ्य संस्थान समय पर संदिग्ध संक्रमणों का पता लगाने और स्क्रीन करने में मदद करने के लिए ल्यूकोसाइट का पता लगाने के लिए बड़े पैमाने पर कर सकते हैं।
पीओसीटी कार्ड-आधारित ल्यूकोसाइट विश्लेषक (मूल्यांकन प्रणाली; सामग्री की तालिका देखें) सोने के मानक "कूल्टर सिद्धांत" के आधार पर एक तीन-वर्गीकरण रक्त कोशिका विश्लेषक है। मूल्यांकन प्रणाली एक डब्ल्यूबीसी हिस्टोग्राम के मात्रात्मक विश्लेषण परिणाम और डब्ल्यूबीसी गिनती, ग्रैनुलोसाइट्स (ग्रैन #) की संख्या, ग्रैनुलोसाइट्स (ग्रैन#) का प्रतिशत, लिम्फोसाइटों की संख्या (लाइम #), लिम्फोसाइटों का प्रतिशत (लाइम%), मध्यवर्ती कोशिकाओं की संख्या (मध्य #), और मध्यवर्ती कोशिकाओं का प्रतिशत (मध्य%)। यह कार्ड-आधारित अभिनव तकनीक को अपनाता है और इसमें एकल-व्यक्ति पहचान किट की उपलब्धता, तरल अपशिष्ट की अनुपस्थिति, 30 एस में तेजी से पता लगाने, नियमित रखरखाव से मुक्त होने और उपयोगकर्ता के अनुकूल संचालन जैसे फायदे हैं। इसलिए, यह विशेष रूप से प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। इस अध्ययन का उद्देश्य दो बड़े पैमाने पर सार्वजनिक अस्पतालों की प्रयोगशालाओं से दो पूरी तरह से स्वचालित वाणिज्यिक हेमेटोलॉजी विश्लेषकों (संदर्भ प्रणाली 1 और संदर्भ प्रणाली 2; सामग्री की तालिका देखें) के खिलाफ तुलना करके पीओसीटी कार्ड-आधारित ल्यूकोसाइट विश्लेषक के नैदानिक पहचान प्रदर्शन का मूल्यांकन करना है।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
इस अध्ययन और मानव रक्त के नमूनों के उपयोग को गुआंगज़ौ मेडिकल यूनिवर्सिटी (जीवाईवाईवाई-2016-73) के पहले संबद्ध अस्पताल की नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। सभी प्रतिभागियों ने स्वतंत्र रूप से या अपने माता-पिता (बच्चों के मामले में) के माध्यम से अपनी लिखित सहमति दी है।
1. अध्ययन समूह की बुनियादी जानकारी
नोट: शिरापरक रक्त उन रोगियों से एकत्र किया गया था जिन्होंने गुआंगज़ौ मेडिकल यूनिवर्सिटी (अस्पताल 1) के पहले संबद्ध अस्पताल और जुनई मेडिकल यूनिवर्सिटी (अस्पताल 2) के पांचवें संबद्ध (झुहाई) अस्पताल का दौरा किया था। अस्पताल 1 में रक्त नियमित परीक्षा के लिए उपयोग किया जाने वाला उपकरण संदर्भ प्रणाली 1 है, जबकि अस्पताल 2 संदर्भ प्रणाली 2 का उपयोग करता है।
- अस्पताल 1 (532) और अस्पताल 2 (534) का दौरा करने वाले रोगियों से कुल 1066 रक्त के नमूने एकत्र किए गए थे और जनवरी 2021 के दौरान रक्त नियमित परीक्षाएं हुईं।
नोट: रोगियों को बेतरतीब ढंग से चुना गया था, कई विभागों से आया था और विभिन्न बीमारियों से पीड़ित था। - अपूर्ण चिकित्सा रिकॉर्ड वाले रोगियों को बाहर करें, और जो सहकारी नहीं थे या सूचित सहमति देने से इनकार कर दिया था। उन रोगियों को बाहर करें जिनके रक्त के नमूनों ने हेमोलिसिस, काइल रक्त, या बादलों का प्रदर्शन किया, या यदि रक्त मात्रा में अपर्याप्त था या 24 घंटे से अधिक समय तक संग्रहीत किया गया था।
2. अध्ययन प्रवाह और ब्याज के माप
नोट: मूल्यांकन प्रणाली डब्ल्यूबीसी और तीन वर्गीकरण मापदंडों का निर्धारण करने के लिए रक्त नमूने के 5 μL की जरूरत है। रक्त एकत्र करने के बाद, रक्त नियमित परीक्षा के लिए मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली का उपयोग किया गया था।
- डब्ल्यूबीसी और क्रमशः संदर्भ प्रणाली और मूल्यांकन प्रणाली का उपयोग करके 532 और 534 रक्त के नमूनों के तीन वर्गीकरण मापदंडों का पता लगाएं।
- संदर्भ प्रणाली के साथ नैदानिक परीक्षण पूरा करने के बाद एक उच्च प्रशिक्षित तकनीशियन को बेतरतीब ढंग से चयनित रक्त के नमूनों को फिर से संख्या में लाने दें। फिर, मूल्यांकन प्रणाली का उपयोग करके डब्ल्यूबीसी और वर्गीकरण मापदंडों का पता लगाने के लिए नमूनों को एक और उच्च प्रशिक्षित तकनीशियन को सौंप दें।
- दो प्रणालियों के परिणामों को प्रकट करें।
- केवल मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों दोनों द्वारा साझा किए गए पांच संकेतकों (अर्थात् डब्ल्यूबीसी गिनती, ग्रैन #, ग्रैन%, लिम #, लिम%) का विश्लेषण करने के लिए तीसरे तकनीशियन से पूछें।
3. मूल्यांकन प्रणाली का उपयोग करने के लिए प्रक्रिया
नोट: मूल्यांकन प्रणाली का पता लगाने तत्व में डब्ल्यूबीसी की गणना करने के लिए विद्युत प्रतिबाधा सिद्धांत (कूल्टर सिद्धांत) का उपयोग करता है। परीक्षण प्रोटोकॉल को छह भागों में विभाजित किया गया है: विश्लेषक, परीक्षण तैयारी, रक्त संग्रह, अभिकर्मक मिश्रण, नमूना विश्लेषण शुरू करें, और विश्लेषक को बंद कर दें।
- विश्लेषक प्रारंभ करें
- विश्लेषक के पीछे [ओ / आई] पावर स्विच को [आई] में बदल दें। जांचें कि विश्लेषक का सूचक प्रकाश चालू है।
- लॉगिन संवाद बॉक्स में सही उपयोगकर्ता नाम और पासवर्ड दर्ज करें और लॉगिन पर क्लिक करें। सुनिश्चित करें कि सिस्टम स्वचालित रूप से स्वयं-जाँच और स्टार्ट-अप प्रारंभ करता है और फिर नमूना विश्लेषण मुख पृष्ठ प्रदर्शित करता है।
- टेस्ट की तैयारी
नोट: एक पूर्ण रक्त नमूना परीक्षण के लिए चार उपभोग्य सामग्रियों की आवश्यकता होती है: रक्त लांसेट, हेमोलिटिक अभिकर्मक, अंदर एक केशिका ट्यूब के साथ मात्रात्मक विंदुक, और रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल (चित्रा 1)।- अगला नमूना पर क्लिक करें, लिंग, नाम और अन्य नैदानिक जानकारी (आवश्यकतानुसार) को सही ढंग से दर्ज करें, और एक उपयुक्त संदर्भ समूह का चयन करें। जानकारी को सेव करने के लिए ओके पर क्लिक करें।
नोट: विभिन्न आयु समूहों का अपना संदर्भ अंतराल होता है, इसलिए सही संदर्भ समूह चुनने से अधिक उपयुक्त अलार्म प्रॉम्प्ट मिल सकता है। नवजात शिशु: 1-28 दिन पुराना; बच्चे: 29 दिन से 14 साल की उम्र तक; वयस्क पुरुष / महिला / सामान्य: 15 वर्ष से अधिक या उसके बराबर। - रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल की पतली फिल्म को फाड़ें, प्रवेश / निकास गोदाम बटन दबाएं , और रक्त कोशिका का पता लगाने वाले मॉड्यूल को मशीन गोदाम में सही ढंग से रखें, इसके छिद्र को बाहर की ओर सामना करना पड़ रहा है।
- एक मात्रात्मक विंदुक की नोक के साथ हेमोलिटिक अभिकर्मक सीलिंग फिल्म पंचर।
- अगला नमूना पर क्लिक करें, लिंग, नाम और अन्य नैदानिक जानकारी (आवश्यकतानुसार) को सही ढंग से दर्ज करें, और एक उपयुक्त संदर्भ समूह का चयन करें। जानकारी को सेव करने के लिए ओके पर क्लिक करें।
- रक्त संग्रह
- केशिका रक्त संग्रह: एक कपास झाड़ू के साथ बाईं अनामिका उंगली कीटाणुरहित एक तरह से और एक बार शराब में डूबा हुआ। शराब स्वाभाविक रूप से सूखने के बाद, बाईं अनामिका उंगली की त्वचा को पंचर करने के लिए रक्त लैंसेट का उपयोग करें।
- धीरे-धीरे रक्त की पहली बूंद को निचोड़ें और इसे एक कपास झाड़ू से पोंछ लें। एक पूर्ण "वाटरड्रॉप" बनाने के लिए पर्याप्त रक्त निचोड़ें और मात्रात्मक विंदुक के अंदर केशिका ट्यूब का उपयोग करके रक्त के नमूने के 5 μL एकत्र करें।
- शिरापरक रक्त संग्रह: मात्रात्मक विंदुक के अंदर केशिका ट्यूब का उपयोग करके पूर्व-प्राप्त शिरापरक रक्त नमूने के 5 μL एकत्र करें। इस अध्ययन में सभी परीक्षणों में शिरापरक रक्त का उपयोग किया गया था जो ईडीटीए-के2 एंटीकोआगुलेंट युक्त वैक्यूम पोत का उपयोग करके प्रत्येक रोगी (5 एमएल) से एकत्र किया गया था। 30 मिनट से 24 घंटे के भीतर सभी परीक्षणों को पूरा करें।
- केशिका रक्त संग्रह: एक कपास झाड़ू के साथ बाईं अनामिका उंगली कीटाणुरहित एक तरह से और एक बार शराब में डूबा हुआ। शराब स्वाभाविक रूप से सूखने के बाद, बाईं अनामिका उंगली की त्वचा को पंचर करने के लिए रक्त लैंसेट का उपयोग करें।
- अभिकर्मक मिश्रण
- हेमोलिटिक अभिकर्मक (2.5 एमएल) में मात्रात्मक विंदुक डालें और केशिका ट्यूब से रक्त के नमूने को छोड़ने के लिए इसे कसकर दबाएं।
- केशिका ट्यूब और हेमोलिटिक अभिकर्मक में रक्त को निरंतर गति से 15-20 बार उल्टा करके मिलाएं, जब तक कि केशिका ट्यूब में कोई स्पष्ट लाल रक्त नहीं रहता है। इस अध्ययन में, रक्त के नमूने को 1: 500 के अनुपात में हेमोलिटिक अभिकर्मक के साथ मिलाया जाता है।
- नमूना विश्लेषण
- ढक्कन खोलें और रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल में समाधान निचोड़ें।
- प्रविष्टि/निकास वेयरहाउस बटन दबाएँ। रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल गोदाम में प्रवेश करने के बाद, गिनती बटन दबाएँ।
नोट: एक चमकती हरी संकेतक प्रकाश इंगित करता है कि विश्लेषक गिनती कर रहा है। रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल स्वचालित रूप से गिनती के बाद गोदाम से बाहर निकल जाएगा, और इसे हटा दिया जाना चाहिए और ठीक से निपटाया जाना चाहिए। प्रत्येक परीक्षण में केवल 30 सेकंड लगते हैं। - विश्लेषक इंटरफ़ेस पर, रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल बाहर निकाल दिया गया है की पुष्टि करने के लिए दो बार ओके बटन पर क्लिक करें।
- विश्लेषक इंटरफ़ेस पर, परीक्षण परिणामों को मुद्रित करने के लिए प्रिंट बटन पर क्लिक करें।
- विश्लेषक बंद करें
- विश्लेषक इंटरफ़ेस पर, शटडाउन बटन पर क्लिक करें, और इंटरफ़ेस पर पॉप अप करने वाले संवाद बॉक्स में हाँ का चयन करें। जाँचें कि सिस्टम शटडाउन अनुक्रम निष्पादित करने के लिए प्रारंभ होता है।
- शटडाउन अनुक्रम पूरा होने के बाद मेनफ्रेम के पीछे [ओ /आई] स्विच को [ओ] पर सेट करें।
4. सांख्यिकीय विश्लेषण
- अमेरिकन एसोसिएशन फॉर क्लीनिकल लेबोरेटरी स्टैंडर्डाइजेशन (सीएलएसआई) ईपी 9-ए 3 दस्तावेज़ 8 की आवश्यकताओं के अनुसार सामान्यीकृत चरम छात्रीकृत विचलित (ईएसडी) विधि का उपयोग करके आउटलायर का पता लगाएं और अनुवर्ती सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए इन आउटलायरको खत्म करें।
- सामान्य रूप से वितरित निरंतर डेटा के लिए साधन और मानक विचलन (एसडी) जैसे वर्णनात्मक मापदंडों की गणना करें; गैर-सामान्य रूप से वितरित डेटा के लिए माध्यिकाएं और 25% -75% इंटरक्वार्टाइल श्रेणियां; और श्रेणीबद्ध डेटा के लिए आवृत्तियों और प्रतिशत।
- श्रेणीबद्ध चर के बीच संबंधों की डिग्री निर्धारित करने के लिए पियर्सन χ2 परीक्षण या फिशर के सटीक परीक्षण का उपयोग करें। समूहों के बीच संख्यात्मक डेटा की तुलना करने के लिए युग्मित-नमूना टी-परीक्षण या मान-व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग करें।
- तितर बितर भूखंडों द्वारा दो प्रणालियों के पता लगाए गए परिणामों के वितरण और रैखिक संघ को दिखाएं। मात्रात्मक चर के बीच संबंधों की डिग्री तक पहुंचने के लिए स्पीयरमैन के गैर-पैरामीट्रिक सहसंबंध परीक्षण को लागू करें। दो प्रणालियों द्वारा पता लगाए गए मात्रात्मक मूल्यों के बीच समझौते को सत्यापित करने के लिए ब्लैंड-ऑल्टमैन भूखंडों और इंट्राक्लास सहसंबंध गुणांक (आईसीसी) का उपयोग करें।
- पसंद के सांख्यिकीय सॉफ़्टवेयर द्वारा डेटा का विश्लेषण करें। 0.05 < पी-वैल्यू को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता है।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
नमूना डेटा
अस्पताल 1 (एन = 532) और अस्पताल 2 (एन = 534) सहित दो शोध केंद्रों में कुल 1066 रोगियों को नामांकित किया गया था। रोगी विशेषताओं को तालिका 1 में दिखाया गया है। पुरुषों का प्रतिशत 49.9% है और औसत आयु 52 (32, 66) वर्ष है। अध्ययन में नामांकित रोगियों में इनपेशेंट (51.1%), आउटपेशेंट (39.0%), और शारीरिक परीक्षा रोगियों (8.4%) शामिल थे। परीक्षण किए गए नमूने उन रोगियों से थे जिन्होंने आंतरिक चिकित्सा विभागों (30.6%), सर्जरी विभागों (19.1%), प्रसूति और स्त्री रोग विभागों (9.0%), बाल चिकित्सा विभागों (3.9%), आदि का दौरा किया था।
असामान्य परिणामों का पता लगाना (आउटलायर)
क्षैतिज अक्ष के रूप में संदर्भ प्रणाली के परिणामों और ऊर्ध्वाधर अक्ष के रूप में मूल्यांकन प्रणाली के परिणामों को लेते हुए, 1066 नमूनों के पांच ल्यूकोसाइट इंडेक्स का एक स्कैटर प्लॉट प्राप्त किया गया था (परिणाम नहीं दिखाए गए हैं)। संदिग्ध असामान्य अंक पांच ल्यूकोसाइट इंडेक्स के तितर बितर साजिश में स्पष्ट हैं। ईएसडी विधि के परिणामों के अनुसार, 1066 नमूनों में से, डब्ल्यूबीसी गिनती में 16 आउटलायर, ग्रैन # में 27 आउटलायर, ग्रैन में 8 आउटलायर, लिम # में 15 आउटलायर और लाइम% में 9 आउटलायर थे। आउटलायर को खत्म करने के बाद डेटा का विश्लेषण किया गया था, जो कुल मिलाकर 5% से कम के लिए जिम्मेदार है।
मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणालियों में सहसंबंध विश्लेषण
चित्रा 2 स्कैटर प्लॉट और परीक्षण परिणामों के स्पीयरमैन सहसंबंध विश्लेषण को दर्शाता है। परिणाम बताते हैं कि डब्ल्यूबीसी गिनती, ग्रैन #, ग्रैन%, लिम #, और लिम% में दो प्रणालियों के बीच अच्छी रैखिकता और सहसंबंध है; रैखिक गुणांक आर2 0.7759 और 0.9676 के बीच है, और सहसंबंध गुणांक आरस्पीयरमैन 0.851 और 0.973 (सभी पी-मान < 0.001) के बीच है। डब्ल्यूबीसी और ग्रैन # दो प्रणालियों के बीच सबसे मजबूत सहसंबंध प्रदर्शित करते हैं (आर2 = 0.9608 और 0.9676, क्रमशः; आरस्पीयरमैन = 0.972 और 0.973, क्रमशः), जबकि लिम # सिस्टम के बीच सबसे कमजोर सहसंबंध प्रदर्शित करते हैं (आर2 = 0.7759; आरस्पीयरमैन = 0.851)। हालांकि, हम मध्यवर्ती कोशिकाओं (मध्य # / %) के सहसंबंध और स्थिरता का मूल्यांकन नहीं कर सके, क्योंकि वे संदर्भ प्रणाली में छोटे डिवीजनों (यानी, ईोसिनोफिल, बेसोफिल और मोनोसाइट्स) में अलग हो जाते हैं।
संगति विश्लेषण
स्थिरता विश्लेषण की कल्पना करने के लिए एक ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट प्राप्त किया गया है और ±2 एसडी को समझौते (एलओए) की सीमा के रूप में चिह्नित किया गया है। परिणाम चित्रा 3 में दिखाए गए हैं। डब्ल्यूबीसी के लिए, अंतर का औसत मूल्य मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों के बीच0.9 x 10 9 / एल है, और अंतर का 95% आत्मविश्वास अंतराल (सीआई) -0.7 एक्स 109 ~ 2.5 × 10 9 / एल है95% सीआई के भीतर 94.48% (992/1050) नमूने हैं, जिसका अर्थ है कि मूल्यांकन प्रणाली द्वारा पता लगाए गए डब्ल्यूबीसी परिणाम संदर्भ प्रणाली के साथ अच्छे समझौते में हैं। ग्रैन # और ग्रैन के लिए, मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों के बीच अंतर का औसत मूल्य क्रमशः 0.8 x 109/एल और 2.0% है, जबकि अंतर का 95% सीआई क्रमशः 0.7 x 109 ~ 2.2 x 109 / एल और -7.7% ~ 11.7% है। 95% सीआई के भीतर क्रमशः 94.23% (979/1039) और 94.99% (1005/1058) नमूने हैं। लिम # और लिम के लिए, 95% सीआई के भीतर 93.82% (986/1051) और 93.76% (991/1057) नमूने हैं, और औसत अंतर मूल्य क्रमशः 0.33 x 109 / एल और 1.8% है। ल्यूकोसाइट इंडेक्स में अंतर के औसत मूल्य 0 से ऊपर हैं, यह दर्शाता है कि मूल्यांकन प्रणाली के परीक्षण परिणाम संदर्भ प्रणाली की तुलना में थोड़ा अधिक हैं।
विभिन्न रोगी समूहों में सहसंबंध विश्लेषण
विभिन्न उम्र और लिंग के रोगियों और विभिन्न विभागों के लोगों के नमूनों के लिए डब्ल्यूबीसी गिनती परिणामों की तुलना की गई और सहसंबंधों के लिए विश्लेषण किया गया। परिणामों से पता चला है कि मूल्यांकन प्रणाली का डब्ल्यूबीसी स्तर संदर्भ प्रणाली की तुलना में अधिक है। पुरुष और महिला रोगियों के बीच स्थिरता और सहसंबंध में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं है (आईसीसी: 0.97 बनाम 0.98; आरस्पीयरमैन: 0.98 बनाम 0.97)। निरंतरता और सहसंबंध बाह्य रोगियों की तुलना में इनपेशेंट के लिए बेहतर हैं (आईसीसी: 0.98 बनाम 0.96; आरस्पीयरमैन: 0.98 बनाम 0.96), जैसा कि तालिका 2 में दिखाया गया है।
चित्रा 1: मूल्यांकन प्रणाली और इसके सहायक अभिकर्मकों और उपभोग्य सामग्रियों की प्रतिनिधि तस्वीरें। (ए) विश्लेषक तीन वर्गीकरणों द्वारा रक्त में ल्यूकोसाइट्स का पता लगाने के लिए कूल्टर सिद्धांत का उपयोग करता है। इसका छोटा आकार (242 मिमी x 397 मिमी x 321 मिमी) परिवहन करना आसान बनाता है। (बी) सीमित सहायक अभिकर्मकों और उपभोग्य सामग्रियों को एक सूट में एकल-व्यक्ति का पता लगाने वाली किट के रूप में जोड़ा जाता है, जिसे कमरे के तापमान पर संग्रहीत और उपयोग किया जा सकता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 2: मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली द्वारा पता लगाए गए पांच ल्यूकोसाइट इंडेक्स के तितर बितर भूखंड। आर2 = रैखिकता गुणांक, आरएस = स्पीयरमैन सहसंबंध गुणांक (95% सीआई), और एन = नमूना आकार। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3: मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली द्वारा पता लगाए गए पांच ल्यूकोसाइट इंडेक्स के ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट। वाई-अक्ष मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों के बीच मापा मूल्यों के अंतर को दर्शाता है जबकि एक्स-अक्ष मूल्यांकन और संदर्भ प्रणालियों द्वारा मापा गया ल्यूकोसाइट इंडेक्स के औसत मूल्य को दर्शाता है। निरंतर काली रेखा नमूनों के पूरे पूल के लिए औसत अंतर मूल्य का प्रतिनिधित्व करती है और धराशायी काली रेखाएं समझौते की 95% ऊपरी और निचली सीमाओं का प्रतिनिधित्व करती हैं (समझौते की औसत सीमाएं ± 1.96 एसडी)। ईएसआई मूल्यांकन प्रणाली द्वारा मापा गया मूल्यों को दर्शाता है और आरएसआई संदर्भ प्रणाली द्वारा मापा गया मूल्यों को दर्शाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
तालिका 1: अध्ययन आबादी का सामान्य डेटा। एन = नमूना आकार, आईक्यूआर = इंटरक्वार्टाइल रेंज। पी-वैल्यू अस्पताल 1 और अस्पताल 2 से नमूना डेटा की तुलना से मेल खाती है। ची-स्क्वायर परीक्षण (π 2) का उपयोग समूहों में श्रेणीबद्ध चर के बीच अंतर की तुलना करने के लिए किया गया था (जब सैद्धांतिक आवृत्ति 5 से कम थी, फिशर सटीक संभाव्यता विधि का उपयोग कैलिब्रेट करने के लिए किया गया था), और टी-टेस्ट या मान-व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग समूहों के बीच संख्यात्मक डेटा की तुलना करने के लिए किया गया था। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।
तालिका 2: विभिन्न रोगी समूहों में मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली द्वारा पता लगाए गए डब्ल्यूबीसी परिणामों का सहसंबंध विश्लेषण। एन = नमूना आकार; आईक्यूआर = इंटरक्वार्टाइल रेंज; और आईसीसी = इंट्राक्लास सहसंबंध गुणांक (0.75 > मूल्य अच्छी विश्वसनीयता को इंगित करता है)। आरएस = स्पीयरमैन का सहसंबंध गुणांक; 0.90-1.00, 0.70-0.90, 0.50-0.70, 0.30-0.50 और 0-0.30के आर एस क्रमशः, बहुत अधिक, उच्च, मध्यम, निम्न और नगण्य सकारात्मक सहसंबंध का संकेत देते हैं। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
आधुनिक प्रयोगशाला चिकित्सा की उन्नति के साथ, अब एक ही नैदानिक मार्कर की पहचान करने के लिए एक ही या विभिन्न प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाने वाली कई पहचान प्रौद्योगिकियों को देखना विशिष्ट है। नतीजतन, परीक्षण परिणामों की सटीक व्याख्या और निर्णय लेने में क्लीनिकों की सहायता के लिए परीक्षण परिणामों की स्थिरता पर अधिक जोर दिया जाना चाहिए। जांच के अनुसार, तृतीयक अस्पतालों और स्वतंत्र प्रयोगशालाओं में प्रयोगशाला उपकरणों का कुल मूल्य प्राथमिक अस्पतालों और अन्यचिकित्सा संस्थानों की तुलना में काफी अधिक है। यद्यपि इस प्रकार के उपकरणों में कई आइटम का पता लगाने, उच्च सटीकता, स्थिरता और बड़े पहचान प्रवाह के फायदे हैं, लेकिन इसमें महंगे, बड़े और भारी, जटिल संचालन, कई अभिकर्मकों के लिए एक आवश्यकता और पेशेवर गुणवत्ता ऑपरेटरों के लिए उच्च मांग जैसे नुकसान हैं, दूसरों के बीच, प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों के उपयोग के लिए अनुपयुक्त बनाते हैं। पता लगाने के उपकरणों और उपकरणों का विकास लगातार स्वचालन, खुफिया, मानकीकरण, निजीकरण और छोटे पोर्टेबिलिटी 9 की दिशा में विकसितहो रहा है। पीओसीटी परीक्षण उपकरण के फायदे, जैसे कि उच्च समयबद्धता, हल्के और ले जाने में आसान होने के साथ-साथ कोई रखरखाव नहीं, बड़े रक्त विश्लेषकों की कमियों के लिए बनाते हैं और प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों10 द्वारा अधिक आसानी से स्वीकार किए जाते हैं। विभिन्न परीक्षण उपकरणों द्वारा एक ही नमूने और वस्तुओं के परीक्षण परिणामों की तुलनात्मकता को महसूस करना प्रयोगशाला गुणवत्ता प्रबंधन11 की मुख्य सामग्री है। हालांकि, कुछ अध्ययन पीओसीटी हेमेटोलॉजी विश्लेषक और इसी तरह के नैदानिक उत्पादों के बीच सहसंबंध और स्थिरता का मूल्यांकन करते हैं।
इस अध्ययन में रोगियों को गुआंगज़ौ (अस्पताल 1) और झुहाई (अस्पताल 2) शहर, चीन में दो केंद्रों से यादृच्छिक रूप से भर्ती किया गया था। दोनों केंद्रों के बीच लिंग अनुपात में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। नामांकित रोगियों में वे लोग शामिल थे जो शारीरिक परीक्षा के लिए अस्पतालों का दौरा करते थे, और आंतरिक चिकित्सा, सर्जरी, प्रसूति और स्त्री रोग, बाल चिकित्सा, महत्वपूर्ण देखभाल विभागों आदि से बाह्य रोगियों और रोगियों को शामिल किया गया था। अस्पताल 1 में रोगियों की औसत आयु अस्पताल 2 (58 (37, 68) बनाम 46 (31, 63) की तुलना में काफी अधिक है; पी < 0.001)। अस्पताल 1 श्वसन रोगों के लिए एक राष्ट्रीय प्रमुख विशेष अस्पताल है, जिसमें श्वसन रोगों से पीड़ित अधिकांश रोगी हैं जोबुजुर्गों को प्रभावित करने की अधिक संभावना रखते हैं 12. उम्र बढ़ने के वैज्ञानिक अध्ययन में पाया गया कि अस्पताल 1 में 65 वर्ष से अधिक उम्र के लोगों का अनुपात अस्पताल 2 (6.67% बनाम 5.01%) की तुलना में अधिक है।
ग्रैनुलोसाइट गिनती में कुछ आउटलायर हैं, जो 2.5% के लिए लेखांकन करते हैं, लेकिन सभी वस्तुओं के आउटलायर 5% से कम हैं, जो स्वीकार्य सीमा के भीतर है। मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली के परीक्षण परिणामों के रैखिक गुणांक आर2 सभी 0.75 से अधिक हैं, यह दर्शाता है कि दो प्रणालियों की रैखिक प्रतिगमन रेखाओं में फिट की अच्छी रैखिक अच्छाई है, सफेद रक्त कोशिका गिनती और न्यूट्रोफिल गिनती में फिट की बेहतर रैखिक अच्छाई है। ल्यूकोसाइट्स और ग्रैनुलोसाइट्स (आर एस = 0.972 और 0.973, क्रमशः)की संख्या के बीच सबसे मजबूत सहसंबंध पाया गया था, इसके बाद ग्रैनुलोसाइट प्रतिशत और लिम्फोसाइट प्रतिशत(आर एस = 0.939 और 0.932, क्रमशः), और लिम्फोसाइट संख्या (आरएस = 0.851)। एक रिपोर्ट किए गए अध्ययन के समान, सफेद रक्त कोशिका गिनती पर पीओसीटी श्रृंखला के उपकरण का प्रभाव वर्गीकृत इंडेक्स14 के परिणामों से बेहतर है। इसके अलावा, दो प्रणालियों के परीक्षण डेटा के बीच अंतर के ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट से पता चलता है कि अधिकांश परीक्षण बिंदु 95% स्थिरता सीमा के भीतर हैं, यह दर्शाता है कि मूल्यांकन प्रणाली और संदर्भ प्रणाली के परीक्षण परिणाम अच्छे समझौते में हैं। हालांकि परिणाम बताते हैं कि लिम्फोसाइटों का स्थिरता विश्लेषण डब्ल्यूबीसी और ग्रैनुलोसाइट्स की तुलना में थोड़ा कम है, लिम्फोसाइटों का सहसंबंध गुणांक अभी भी 0.85 से ऊपर है, जिसका अर्थ है कि लिम्फोसाइटों का पता लगाते समय दो प्रणालियों में भी अच्छी स्थिरता होती है। दूसरी ओर, ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट से पता चलता है कि मूल्यांकन प्रणाली के परीक्षण परिणाम संदर्भ प्रणाली के परीक्षण मूल्यों की तुलना में थोड़ा अधिक हैं। यह अनुमान लगाया जाता है कि यह मूल्यांकन प्रणाली में व्यवस्थित त्रुटियों के कारण हो सकता है, जो समग्र परिणाम को उच्च बनाता है। सबसे पहले, किसी को सावधानीपूर्वक जांचना चाहिए कि परीक्षण शुरू होने से पहले विश्लेषक को सही ढंग से रखा गया है या नहीं; उदाहरण के लिए, उपकरण के आसपास के क्षेत्र को दीवार या बाधाओं से एक निश्चित दूरी (≥ 20 सेमी) पर रखा जाना चाहिए, और जिस स्थान पर उपकरण रखा गया है, उसे अच्छी तरह से हवादार होना चाहिए। दूसरे, आर और डी टीम व्यवस्थित त्रुटि को ठीक करने के लिए सिस्टम के आंतरिक मापदंडों को भी समायोजित कर सकती है।
उपन्यास कार्ड आधारित पीओसीटी ल्यूकोसाइट डिटेक्शन सिस्टम ल्यूकोसाइट्स और उनके वॉल्यूम वितरण15,16 का पता लगाने के लिए विद्युत प्रतिबाधा सिद्धांत का उपयोग करता है। रक्त कोशिकाओं और इलेक्ट्रोलाइट समाधानों के बीच विद्युत चालकता में अंतर का लाभ उठाते हुए, जब विभिन्न मात्रा आकारों वाली रक्त कोशिकाएं गिनती छेद से गुजरती हैं, तो यह छेद के अंदर और बाहर वर्तमान या वोल्टेज में परिवर्तन का कारण बन सकती है, जिससे पल्स वोल्टेज बन सकता है। यह पल्स वोल्टेज रक्त कोशिकाओं की संख्या के बराबर है और मात्रा के आकार से मेल खाती है, इस प्रकार अप्रत्यक्ष रूप से रक्त कोशिकाओं के समूहों को अलग करती है और उन्हें अलग से गिनती करती है। मूल्यांकन किए गए विश्लेषक का उपयोग करके ल्यूकोसाइट का पता लगाने में कई महत्वपूर्ण चरणों पर ध्यान देने की आवश्यकता है, जो परीक्षण परिणामों की सटीकता से निकटता से संबंधित है। सबसे पहले, रक्त एकत्र करते समय, रक्त की पहली बूंद को बाँझ सूखे झाड़ू के साथ मिटा दिया जाना चाहिए, क्योंकि इसमें अतिरिक्त ऊतक तरल पदार्थ हो सकता है जो परीक्षण परिणामों को प्रभावित कर सकता है। दूसरा, एक केशिका ट्यूब के साथ रक्त की दूसरी बूंद एकत्र करने के बाद, ट्यूब के बाहर से जुड़े रक्त को यह सुनिश्चित करने के लिए मिटा दिया जाना चाहिए कि एकत्र किए गए रक्त नमूने की मात्रा बिल्कुल 5 μ है L.In इसके अलावा, रक्त के नमूने और हेमोलिटिक अभिकर्मकों को पूरी तरह से मिश्रित किया जाना चाहिए। इसी समय, सुनिश्चित करें कि सभी समाधान पूरी तरह से रक्त कोशिका का पता लगाने मॉड्यूल में निचोड़ा जाता है।
कम लागत, सरल संचालन, तेज होने और दैनिक रखरखाव से मुक्त होने सहित इसके बकाया फायदों के कारण, यह पीओसीटी प्रणाली आउट पेशेंट केंद्रों या प्राथमिक चिकित्सा इकाइयों में उपयोग के लिए बहुत उपयुक्त है, जो वर्तमान नैदानिक अनुप्रयोग4 के लिए एक महत्वपूर्ण पूरक है। इस प्रणाली का अनुप्रयोग चीन के सभी विकासशील क्षेत्रों में सभी प्राथमिक चिकित्सा संस्थानों में रक्त नियमित परीक्षा को कवर कर सकता है और रोगों, विशेष रूप से संक्रामक रोगों और रक्त रोगों17,18 की प्रारंभिक जांच के लिए महत्वपूर्ण नैदानिक महत्व है। हालांकि, एक महत्वपूर्ण सीमा यह है कि ल्यूकोसाइट्स को केवल तीन श्रेणियों (न्यूट्रोफिल, लिम्फोसाइट्स, मध्यवर्ती कोशिकाओं) में विभाजित किया जा सकता है। भविष्य में, सटीक निदान के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए सिस्टम की वर्गीकरण क्षमता में और सुधार किया जाना चाहिए।
अंत में, एक उपन्यास ल्यूकोसाइट विश्लेषण उपकरण के रूप में, पीओसीटी ल्यूकोसाइट विश्लेषक में पोर्टेबल, कम लागत, आसान संचालन, तेज और सटीक पहचान होने के फायदे हैं; यह क्लीनिकों में व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषक के साथ अच्छा सहसंबंध, मजबूत स्थिरता और विश्वसनीय तुलना प्रदर्शित करता है, और इसलिए, प्राथमिक चिकित्सा इकाइयों में उपयोग के लिए उपयुक्त है।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
इस अध्ययन को गुआंग्डोंग प्रांत, चीन (ए 2019224) के मेडिकल साइंटिफिक रिसर्च फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था। फंडिंग समूह अध्ययन डिजाइन, डेटा विश्लेषण, पांडुलिपि तैयारी और प्रकाशित करने के निर्णय से सहमत थे। इस अध्ययन के लिए कोई अन्य धन प्राप्त नहीं हुआ था।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blood cell detection module | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Blood lancet | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Hemolytic reagent | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| IBM SPSS Statistics 25 | International Business Machines Corp., Armonk, NY | Software for data analysis | |
| MedCalc 11.4.2.0 | 2021 MedCalc Software Ltd | Software for data analysis | |
| Microsoft Excel 2019 | Microsoft | Software for data analysis | |
| Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | CX-2000 | Evaluated system |
| Quantitative pipette with capillary tube inside | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | ADVIA 2120i | Reference system 2 |
| UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables | Beckman Coulter, Inc. | DxH 800 | Reference system 1 |
References
- Agbaria, A. H., et al. Diagnosis of inaccessible infections using infrared microscopy of white blood cells and machine learning algorithms. The Analyst. 145 (21), 6955-6967 (2020).
- Mlinaric, A., et al. Autovalidation and automation of the postanalytical phase of routine hematology and coagulation analyses in a university hospital laboratory. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 56 (3), 454-462 (2018).
- Genzen, J. R., et al. Challenges and opportunities in implementing total laboratory automation. Clinical Chemistry. 64 (2), 259-264 (2018).
- Kang, F., Li, W., Wang, W., Chen, B., Wang, Z. A nationwide multicenter study on clinical laboratory construction in China. Chinese Journal of Hospital Administration. 35 (10), 867-871 (2019).
- Rawaf, S., et al. Lessons on the COVID-19 pandemic, for and by primary care professionals worldwide. The European Journal of General Practice. 26 (1), 129-133 (2020).
- Balla, M., et al. COVID-19, Modern pandemic: a systematic review from front-line health care providers' perspective. Journal of Clinical Medicine Research. 12 (4), 215-229 (2020).
- Cheng, B., et al. Predictors of progression from moderate to severe coronavirus disease 2019: a retrospective cohort. Clinical Microbiology and Infection. 26 (10), 1400-1405 (2020).
- Budd, J. Measurement procedure comparison and bias estimation using patient samples; approved guideline-third edition. Clinical and Laboratory Standards Institute. 33 (11), (2013).
- Wang, Y. Development trend of testing instruments in grass-roots hospitals. Medical Equipment. 24 (03), 26-27 (2011).
- Miesler, T., Wimschneider, C., Brem, A., Meinel, L. Frugal innovation for point-of-care diagnostics controlling outbreaks and epidemics. ACS Biomaterials Science & Engineering. 6 (5), 2709-2725 (2020).
- Vesper, H. W., Myers, G. L., Miller, W. G. Current practices and challenges in the standardization and harmonization of clinical laboratory tests. The American Journal of Clinical Nutrition. 104, Suppl 3 907-912 (2016).
- Vaz Fragoso, C. A. Epidemiology of lung disease in older persons. Linics in Geriatric Medicine. 33 (4), 491-501 (2017).
- Qian, C., Xie, T. Regional differences and demographic reasons of population aging in Guangdong Province. Scientific Research on Aging. 5 (01), 46-56 (2017).
- de Graaf, A. J., Hiemstra, S. W., Kemna, E. W. M., Krabbe, J. G. Evaluation of a POCT device for C-reactive protein, hematocrit and leukocyte differential. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 55 (11), 251-253 (2017).
- Chabot-Richards, D. S., George, T. I. White blood cell counts: reference methodology. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 11-24 (2015).
- Green, R., Wachsmann-Hogiu, S. Development, history, and future of automated cell counters. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 1-10 (2015).
- Henry, B. M., de Oliveira, M. H. S., Benoit, S., Plebani, M., Lippi, G. Hematologic, biochemical and immune biomarker abnormalities associated with severe illness and mortality in coronavirus disease 2019 (COVID-19): a meta-analysis. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 58 (7), 1021-1028 (2020).
- Flanagan, B., Keber, B., Mumford, J., Lam, L. Hematologic conditions: leukocytosis and leukemia. FP Essentials. 485, 17-23 (2019).
