Constriction chronique du nerf sciatique et les essais hypersensibilité à la douleur chez le rat

Summary

Grâce à la simplicité de la chirurgie et le résultat robuste du comportement, de constriction chronique du nerf sciatique est l'un des modèles animaux pré-éminents de la douleur neuropathique. Dans les 24 heures suivant la chirurgie, hypersensibilité à la douleur est établi et peut être mesurée quantitativement l'aide d'un von Frey esthésiomètre (essais mécaniques) et le compteur analgésie plantaire (essai thermique).

Abstract

Douleur neuropathique chronique, résultant de dommages au système nerveux central ou périphérique, est une condition fréquente et invalidante, affectant 7-18% de la population ^1,2. Les symptômes comprennent spontanée (picotements, sensation de brûlure, des chocs électriques comme) la douleur, dysesthésie, paresthésie, allodynie (douleur résultant de normalement non douloureuses stimuli) et l'hyperalgésie (une réponse accrue aux stimuli douloureux). Les symptômes sensoriels sont co-morbide avec des troubles du comportement, comme l'insomnie et la dépression. Pour étudier la douleur neuropathique chronique des modèles animaux mimant plusieurs lésion du nerf périphérique ont été développés, l'un des plus couramment utilisé est Bennett et Xie (1988) du nerf sciatique unilatérale de constriction blessure chronique (ICC) ³ (Figure 1). Nous présentons ici une méthode pour effectuer des CCI et hypersensibilité à la douleur des tests.

CCI est réalisée sous anesthésie, avec le nerf sciatique d'un côté exposé en faisant le plusincision parents, et couper à travers le tissu conjonctif entre les fessiers et superficiel biceps fémoral muscles. Quatre ligatures intestinale chromiques sont liés de façon lâche autour du nerf sciatique à intervalles de 1 mm, à un peu boucher, mais pas arrêter le flux sanguin epineural. La plaie est refermée avec des sutures dans le muscle et les agrafes dans la peau. L'animal est ensuite autorisé à récupérer d'une chirurgie pendant 24 heures avant le test hypersensibilité à la douleur commence.

Pour les tests comportementaux, les rats sont placés dans l'appareil d'essai et sont autorisés à s'habituer à la procédure de test. La zone testée est la surface mi-plantaire de la patte arrière (Figure 2), qui s'inscrit dans la distribution du nerf sciatique. Seuil de retrait mécanique est évaluée par les deux pattes de derrière mécaniquement stimuler blessés et saufs en utilisant une électronique dynamique plantaire von Frey esthésiomètre ou manuel von Frey poils ^4. Le seuil de retrait mécanique est la pression maximale exercée(En grammes) qui déclenche retrait de la patte. Pour la mesure de temps de latence de retrait thermique, la première fois par Hargreaves et al (1988), la patte arrière est exposée à un faisceau de chaleur rayonnante à travers une surface de verre transparente à l'aide d'un compteur plantaire analgésie ^5,6. Le temps de latence de retrait de la relance de la chaleur est comptabilisé comme du temps de retrait de la patte dans les deux pattes de derrière blessés et saufs. Après l'ICC, seuil de retrait mécanique, ainsi que la latence de retrait thermique dans la patte blessée sont à la fois considérablement réduit, par rapport à des mesures de référence et la patte indemne (figure 3). Le modèle CCI de lésion du nerf périphérique associée à des tests hypersensibilité à la douleur constitue un système modèle pour étudier l'efficacité d'agents thérapeutiques potentiels pour modifier la douleur neuropathique chronique. Dans notre laboratoire, nous utilisons CCI aux côtés de la sensibilité thermique et mécanique des pattes postérieures pour enquêter sur le rôle des interactions neuro-immunes dans la pathogenèseet le traitement de la douleur neuropathique.

Protocol

1. Constriction du nerf sciatique chronique Des techniques aseptiques devraient être utilisées pour la procédure chirurgicale. Désinfecter la surface de travail chirurgical avec de l'éthanol 70% et se préparer à l'avance des instruments stériles (par exemple, des ciseaux fins, pinces, et rétracteurs), les gazes, des agrafes et des prélèvements à l'autoclave. Pour de multiples interventions chirurgicales, nettoyer et instruments restériliser d'éthanol à 70% ou un …

Discussion

CCI est largement utilisé modèle de périphérique des lésions nerveuses de la douleur neuropathique chronique. Il est relativement simple à réaliser, et produit hypersensibilité à la douleur robuste et stable pour au moins un mois après une blessure. Après l'ICC, les rats présentent une posture anormale de la patte arrière lésée (orteils maintenues ensemble et flexion plantaire et la patte éversée), ainsi que répété en secouant, de gardiennage et le léchage de la patte arrière lésée suggérant…

Materials

Name of the reagent/equipment	Company	Catalogue number	Comments
Chromic gut	Ethicon	G-211	4-0 thickness
Isoflurane	Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW	n/a
Mersilk	Ethicon	W-580	5-0 thickness
Autoclip	Becton Dickinson	427631	9 mm stainless steel
Riodine	Orion	R1000802F	1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument	Ugo Basile	37370
Dynamic plantar aesthesiometer	Ugo Basile	37400