Summary

좌골 신경 및 쥐의 통증 과민성 시험의 만성 수축

Published: March 13, 2012
doi:

Summary

수술의 단순하고 강력한 행동 결과로 인해 좌골 신경의 만성적인 수축이 neuropathic 고통의 사전 저명한 동물 모델 중 하나입니다. 수술에 따라 24 시간 내에 통증 과민성 설립되고 양적 폰 프라이 aesthesiometer (기계적 시험)과 발바닥 진통제 측정기 (온도 시험)를 사용하여 측정할 수있다.

Abstract

만성 neuropathic 고통은 중앙 또는 주변 신경계 손상으로 인한, 인구 1,2의 7~18% 영향을 만연하고 쇠약 조건이다. 증상은 자연 (같은 간지, 굽기, 전기 충격) 고통, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (통증이 보통이 아닌 고통스러운 자극으로 인한) 및 hyperalgesia합니다 (통증 자극에 대한 향상된 응답)가 있습니다. 감각 증상은 불면증과 우울증과 같은 행동 장애와 공동 병적입니다. 만성 neuropathic 고통을 공부하고 말초 신경 손상을 흉내낸 여러 동물 모델이 개발되었고, 가장 널리 사용되는 중 하나는 베넷과 샤오의 (1988) 일방적 좌골 신경 만성 수축 상해 (CCI) 3 (그림 1)입니다. 여기 CCI 및 테스트 고통 과민성을 수행하기위한 방법을 제시한다.

CCI는 다음과 같이함으로써 노출된 한쪽에서 좌골 신경으로 마취하에 수행됩니다친척 절개하고 gluteus superficialis와 팔뚝 femoris 근육 사이의 결합 조직을 통해 절단. 네 삼가의 크롬을 함유하는 제품 내장 ligatures 그냥 윗니와 아랫니가 맞물리다 위해, 1 밀리미터 간격으로 좌골 신경 주위에 느슨하게 연결되어 있지만 epineural 혈류를 체포되지 않습니다. 상처가 피부의 근육 및 스테이플의 봉합으로 닫힙니다. 동물 그때 통증 과민성 시험이 시작되기 전에 24 시간 동안 수술에서 회복하기 위해 허용됩니다.

행동 테스트를 위해 쥐나는 테스트 장치에 배치하고 테스트 절차에 길들 수있게됩니다. 테스트 영역은 좌골 신경 분포에 속하는 hindpaw의 중반 발바닥 표면 (그림 2)이다. 기계 인출 한도는 기계 전자 동적 발바닥 폰 프라이 aesthesiometer 또는 수동 폰 프라이 머리카락 4를 사용하여 부상 및 손상되지 않은 hindpaws을 모두 자극에 의해 평가된다. 기계 인출 한도는 진력 최대 압력(g)를 그것의 발자국이 탈퇴를 실행시킵니다. 첫째 학스다 (1988)에 기술된 열 인출 지연의 측정은 hindpaw는 발바닥 진통제 측정기 5,6를 사용하여 투명한 유리 표면을 통해 복사열의 광선에 노출됩니다. 열 자극에 대한 탈퇴 대기 시간은 부상과 손상되지 않은 hindpaws 모두에서 발자국 철회를위한 시간으로 기록됩니다. 이어 CCI, 부상 한것 땜에 기계적 인출 한도뿐만 아니라 열 인출 지연 시간 기준 측정과 손상되지 않은 앞발로 땅을 차다 (그림 3)에 비해 모두 크게 줄일 수 있습니다. 통증 과민성 테스트와 함께 말초 신경 손상의 CCI 모델은 만성 neuropathic 고통을 수정하는 잠재적인 치료 대리인의 효과를 조사하기위한 모델 시스템을 제공합니다. 저희 연구실에서는 pathogenesis에 신경 면역 상호 작용의 역할을 조사하기 위해 hindpaws의 열 및 기계적 감도와 함께 CCI를 활용neuropathic 고통과 치료.

Protocol

1. 좌골 신경 만성 수축 무균 기술은 수술을 위해 사용해야합니다. 70 % 에탄올로 수술 작업 표면을 소독하고 autoclaving에 의해 사전에 멸균 악기 (예 : 미세 가위, 포셉, 그리고 견인기), gauzes, 스테이플과 면봉으로 준비합니다. 여러 수술의 경우 청소 및 70 % 에탄올이나 쥐 사이에 마른 비드 steriliser와 resterilise 악기. 외과 마스크, 헤어 모자와 멸균 장갑을 착용한다. <p class="jove_…

Discussion

CCI는 만성 neuropathic 고통의 널리 사용되는 말초 신경 손상 모델입니다. 그것은 수행 비교적 간단하고, 부상 후 최소 한 달 동안 강력하고 안정적​​인 통증 과민성을 생산하고 있습니다. CCI 따라 쥐가 부상 hindpaw (발가락이 함께 개최되어 발바닥 – 근육이 수축과 앞발로 땅을 차다는 everted)뿐만 아니라, 흔들림 지키고 자발적인 고통 9 존재를 암시 부상 hindpaw으로 핥아 반복 비정상적인 자?…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 베넷과 샤오 (1988)에 의해 CCI 모델의 원래 설명을 인정하고 싶습니다.

이 작품은 과학 그리니치 표준시에 의학 연구를위한 국민 건강과 호주의 의료 연구 협의회 (ID # 568637)과 뉴사우스 웨일즈 사무소에서 교부금에 의해 부분적으로 지원되었다.

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number Comments
Chromic gut Ethicon G-211 4-0 thickness
Isoflurane Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW n/a  
Mersilk Ethicon W-580 5-0 thickness
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 mm stainless steel
Riodine Orion R1000802F 1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument Ugo Basile 37370  
Dynamic plantar aesthesiometer Ugo Basile 37400  

Referenzen

  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population. Pain Med. 10, 918-929 (2009).
  3. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  4. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).
  5. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  6. Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat. Pain. 59, 85-94 (1994).
  7. Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat. Brain Research. 570, 109-115 (1992).
  8. Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. Models of neuropathic pain in the rat. Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).
  9. Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. Further evidence for 'pain-related' behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy. Pain. 41, 235-251 (1990).
  10. Hu, B., Doods, H., Treede, R. -. D., Ceci, A. Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833. Pain. 143, 206-212 (2009).
  11. Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion. Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).
  12. Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury. Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).
  13. Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin. Pain. 139, 349-357 (2008).
  14. Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy. Pain. 80, 341-346 (1999).
  15. Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity. Pain. 152, 990-1000 (2011).
  16. Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia. Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).
  17. Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).
  18. Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury (CCI) produced with different suture materials. Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).
  19. Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat. Pain. 64, 503-509 (1996).
  20. Sommer, C., Schafers, M. Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity. Brain. Res. 784, 154-162 (1998).
  21. Walczak, J. S., Beaulieu, P. Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique. Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).
  22. Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 54, 57-69 (1993).
  23. Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain. Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).
  24. Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model. Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).
  25. Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats. Pain. 51, 313-316 (1992).
  26. Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats. Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).
  27. Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors. Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).
  28. Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. The necessity of animal models in pain research. Pain. 151, 12-17 (2010).
  29. Mogil, J. S. Animal models of pain: progress and challenges. Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).
  30. Langford, D. J. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).
  31. Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines. J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).
check_url/de/3393?article_type=t

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats. J. Vis. Exp. (61), e3393, doi:10.3791/3393 (2012).

View Video