Summary

ラットの坐骨神経と疼痛過敏テストの慢性的なくびれ

Published: March 13, 2012
doi:

Summary

手術のシンプルかつ堅牢な行動の結果により、坐骨神経の慢性収縮は、神経因性疼痛の卓越した動物モデルの一つです。手術後24時間以内に、疼痛過敏症は、von Freyの角膜知覚計(機械試験)と足鎮痛メーター(温度試験)を使用して確立されており、定量的に測定することができます。

Abstract

慢性の神経因性疼痛は、中枢または末梢神経系への損傷に起因する、人口の1,2の7から18パーセントに影響を与え、流行と衰弱状態です。症状は、自発的(のようなうずき、燃焼、電気ショック)の痛み、dysaesthesia、感覚異常、アロディニア(痛みは通常は非痛み刺激に起因する)と痛覚過敏を(痛み刺激に対する応答の増加)が含まれています。感覚症状は、不眠やうつ病などの行動障害との併存である。慢性神経因性疼痛を勉強する末梢神経損傷を模倣するいくつかの動物モデルが開発されている、最も広く使用されているの一つは、ベネットと謝(1988年)一方的な坐骨神経の慢性狭窄損傷(CCI)3( 図1)。ここでは、CCIとテストの疼痛過敏を実行するための手法を提案する。

CCIは、次のようにすることによって公開された一方の側の坐骨神経で、全身麻酔下で行われる親族切開し、中殿浅と大腿二頭筋の筋肉の間に結合組織を切断する。四クロム腸の字だけ閉塞するために、1ミリメートルの間隔で坐骨神経の周りにゆるく結んが神経鞘の血流を逮捕されていません。傷は皮膚の筋肉やステープルで縫合閉鎖しています。疼痛過敏症テストを開始する前に、動物は、その後24時間の手術から回復するために許可されています。

行動テストのために、ラットを試験装置に配置され、テスト手順に慣らすために許可されています。テストエリアは、坐骨神経の分布範囲内に後足の半ばに底表面( 図2)です。機械的な撤退のしきい値は機械的に電子の動的足底のフォン·フレイ角膜知覚計またはマニュアル·フォン·フレイ毛4を使用して負傷し、無傷の後肢の両方を刺激することによって評価されています。機械的な撤退のしきい値は、作用する最大圧力です。(グラム)足の撤退をトリガします。第一ハーグリーブス (1988)によって記述され、熱回収の遅延の測定については、後足は足鎮痛メーター5,6を使用して、透明なガラス表面からの放射熱のビームにさらされている。熱刺激に撤退レイテンシが負傷し、無傷の両方の後肢の足撤退のための時間として記録されます。以下CCI、負傷した足に機械的な撤退のしきい値と同様に、熱回収の遅延は、ベースラインの測定と無傷の足( 図3)と比較して、両方とも大幅に減少しています。疼痛過敏症テストを組み合わせた末梢神経損傷のCCIモデルでは、慢性の神経因性疼痛を変更するには、潜在的な治療薬の有効性を検討するためのモデルシステムを提供します。私たちの研究室では、病因に神経免疫相互作用の役割を調べるために後肢の熱的、機械的な感度と一緒にCCIを活用神経因性疼痛の治療と。

Protocol

1。坐骨神経の慢性くびれ無菌テクニックは外科的処置に使用する必要があります。 70%エタノールで手術の作業面を消毒し、オートクレーブで滅菌し、事前の機器(例えば、微細なハサミ、鉗子、およびトラクター)、ガーゼ、ステープルと綿棒で準備します。複数の手術については、70%エタノールまたはラットの間に乾燥したビーズ滅菌器と楽器をきれいにし、resteri…

Discussion

CCIは、慢性神経因性疼痛の広く使われている末梢神経損傷モデルです。それは、実行するのは比較的簡単であり、受傷後少なくとも1ヶ月堅牢で安定した疼痛過敏を生成します。 CCIに続いて、ラット(つま先が一緒に開催し、足底、屈曲と足がeverted)負傷した後足の異常な姿勢を示し、同様に、振とう保護したり、自発痛9の存在を示唆して負傷した後足をなめることを繰り返す。感…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、ベネットと謝(1988)によってCCIモデルの元の説明を確認したいと思います。

この作品は、GMTに科学と医学研究のための国民健康、オーストラリアの医学研究評議会(ID#568637)とNSW事務局からの補助金によって部分的にサポートされていました。

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number Comments
Chromic gut Ethicon G-211 4-0 thickness
Isoflurane Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW n/a  
Mersilk Ethicon W-580 5-0 thickness
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 mm stainless steel
Riodine Orion R1000802F 1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument Ugo Basile 37370  
Dynamic plantar aesthesiometer Ugo Basile 37400  

Referenzen

  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population. Pain Med. 10, 918-929 (2009).
  3. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  4. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).
  5. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  6. Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat. Pain. 59, 85-94 (1994).
  7. Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat. Brain Research. 570, 109-115 (1992).
  8. Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. Models of neuropathic pain in the rat. Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).
  9. Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. Further evidence for 'pain-related' behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy. Pain. 41, 235-251 (1990).
  10. Hu, B., Doods, H., Treede, R. -. D., Ceci, A. Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833. Pain. 143, 206-212 (2009).
  11. Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion. Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).
  12. Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury. Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).
  13. Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin. Pain. 139, 349-357 (2008).
  14. Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy. Pain. 80, 341-346 (1999).
  15. Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity. Pain. 152, 990-1000 (2011).
  16. Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia. Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).
  17. Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).
  18. Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury (CCI) produced with different suture materials. Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).
  19. Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat. Pain. 64, 503-509 (1996).
  20. Sommer, C., Schafers, M. Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity. Brain. Res. 784, 154-162 (1998).
  21. Walczak, J. S., Beaulieu, P. Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique. Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).
  22. Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 54, 57-69 (1993).
  23. Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain. Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).
  24. Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model. Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).
  25. Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats. Pain. 51, 313-316 (1992).
  26. Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats. Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).
  27. Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors. Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).
  28. Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. The necessity of animal models in pain research. Pain. 151, 12-17 (2010).
  29. Mogil, J. S. Animal models of pain: progress and challenges. Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).
  30. Langford, D. J. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).
  31. Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines. J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).
check_url/de/3393?article_type=t

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats. J. Vis. Exp. (61), e3393, doi:10.3791/3393 (2012).

View Video