La constricción crónica del nervio ciático y pruebas de hipersensibilidad dolor en ratas

Summary

Debido a la simplicidad de la cirugía y el resultado del comportamiento robusto, constricción crónica del nervio ciático es uno de los modelos animales de pre-eminentes de dolor neuropático. Dentro de las 24 horas siguientes a la cirugía, la hipersensibilidad del dolor se establece y se puede medir cuantitativamente utilizando una de von Frey aesthesiometer (ensayos mecánicos) y el medidor de la analgesia plantar (ensayo térmico).

Abstract

El dolor neuropático crónico, como resultado del daño al sistema nervioso central o periférico, es una enfermedad prevalente y debilitante, que afecta a 18.7% de la población de ^1,2. Los síntomas incluyen espontánea (hormigueo, ardor, una descarga eléctrica al igual que) el dolor, disestesias, parestesias, alodinia (dolor debido a que normalmente no dolorosos estímulos) y la hiperalgesia (una mayor respuesta a estímulos dolorosos). Los síntomas sensoriales son co-mórbida con discapacidades de comportamiento, tales como el insomnio y la depresión. Para estudiar el dolor neuropático crónico varios modelos animales que simulan lesiones de nervios periféricos han sido desarrollados, uno de los más utilizados es Bennett y (1988) lesión unilateral del nervio ciático Xie constricción crónica (ICC) ³ (Figura 1). Aquí presentamos un método para realizar pruebas de hipersensibilidad CCI y el dolor.

ICC se realiza bajo anestesia, con el nervio ciático, por un lado expuesto por decisiones comoincisión de los familiares, y el corte a través del tejido conectivo entre los glúteos y los músculos superficial de bíceps femoral. Cuatro ligaduras catgut crómico se atan libremente alrededor del nervio ciático a intervalos de 1 mm, para ocluir solo, pero no detener el flujo de sangre epineural. La herida se cierra con suturas en el músculo y grapas en la piel. El animal se deja entonces recuperarse de la cirugía durante 24 horas antes de la prueba dolor hipersensibilidad comienza.

Para las pruebas de comportamiento, las ratas se colocan en el aparato de ensayo y se les permite habituar al procedimiento de prueba. El área de pruebas es la mitad de la superficie plantar de la pata trasera (Figura 2), que cae dentro de la distribución del nervio ciático. Umbral de retirada mecánica se evaluó mediante la estimulación mecánica ambas patas traseras lesionados y no lesionados con una dinámica electrónica plantar von Frey aesthesiometer o manual de von Frey pelos ^4. El umbral de retirada mecánica es la presión máxima ejercida(En gramos) que desencadena la retirada de la pata. Para la medición de latencia térmica retirada, primero descrito por Hargreaves et al (1988), la pata trasera está expuesto a un haz de calor radiante a través de una superficie de vidrio transparente con un plantar metros analgesia ^5,6. La latencia de retirada de los estímulos de calor se registra como el tiempo de retirada de la pata en las dos patas traseras lesionados y no lesionados. Tras ICC, umbral de retirada mecánica, así como la retirada de latencia térmica en la pata lesionada son significativamente reducido, en comparación con las mediciones de referencia y la pata no lesionado (Figura 3). El ICC modelo de lesión del nervio periférico junto con las pruebas de hipersensibilidad dolor proporciona un sistema modelo para investigar la eficacia de los agentes terapéuticos potenciales para modificar el dolor neuropático crónico. En nuestro laboratorio, utilizamos ICC junto con la sensibilidad térmica y mecánica de las patas traseras para investigar el papel de las interacciones neuro-inmune en la patogénesisy el tratamiento del dolor neuropático.

Protocol

1. La constricción del nervio ciático crónica Técnicas asépticas debe ser utilizado para el procedimiento quirúrgico. Desinfectar la superficie de trabajo quirúrgico con 70% de etanol y preparar los instrumentos estériles por adelantado (por ejemplo, tijeras, pinzas finas y retractores), gasas, grapas y los hisopos en autoclave. Para múltiples cirugías, limpieza y re-esterilizar instrumentos con etanol al 70% o un esterilizador seco cordón entre las ratas. Una máscara quirúrgica, …

Discussion

CCI es un modelo ampliamente utilizado lesión del nervio periférico del dolor neuropático crónico. Es relativamente fácil de realizar, y produce hipersensibilidad dolor robusta y estable durante al menos un mes después de la lesión. Después de CCI, las ratas muestran una postura anormal de la pata trasera heridos (dedos de los pies unidos y flexión plantar y eversión de la pata), así como repetidos temblores, vigilancia y lamido de la pata trasera lesionado sugiere la presencia de dolor espontáneo ^9.</s…

Materials

Name of the reagent/equipment	Company	Catalogue number	Comments
Chromic gut	Ethicon	G-211	4-0 thickness
Isoflurane	Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW	n/a
Mersilk	Ethicon	W-580	5-0 thickness
Autoclip	Becton Dickinson	427631	9 mm stainless steel
Riodine	Orion	R1000802F	1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument	Ugo Basile	37370
Dynamic plantar aesthesiometer	Ugo Basile	37400