Summary

지주막 하 출혈의 급성과 늦은 후유증의 연구에 대한 토끼 피 션트 모델 : 기술적 측면

Published: October 02, 2014
doi:

Summary

The experimental intracranial pressure-controlled blood shunt subarachnoid hemorrhage (SAH) model in the rabbit combines the standard procedures — subclavian artery cannulation and transcutaneous cisterna magna puncture, which enables close mimicking of human pathophysiological conditions after SAH. We present step-by-step instructions and discuss key surgical points for successful experimental SAH creation.

Abstract

초기 뇌 손상 및 지연 뇌 혈관 경련은 모두 지주막 하 출혈 (SAH) 후 불리한 결과에 기여한다. 두 조건을 시뮬레이션 재현 및 제어 동물 모델은 현재 드물다. 따라서, 새로운 모델은 SAH로 인한 인간의 병태 생리 학적 조건을 모방하기 위해 필요하다.

이 보고서는 뇌내 압력 (ICP)의 제어를 가능하게 토끼 피 션트 SAH 모델의 기술적 인 뉘앙스를 설명합니다. 체외 션트는 동맥 폐쇄 시스템 및 두개골에 시험관 독립적 SAH있게 막밑 공간 사이에 배치된다. 단계별 절차 명령들 및 필요한 장비를 기술뿐만 아니라, 기술적 고려 최소 사망률과 질병률과 모델을 생성한다. 이 강력한 간단하고 일관성있는 ICP-제어 SAH 토끼 모델의 성공적인 수술 작성에 필요한 중요한 세부 사항은 설명한다.

Introduction

동맥류 성 지주막 하 출혈 (SAH)은 자주 영구적 인 신경 손상 또는 사망 선도, 신경 병리학 적 조건을 위협하는 가장 삶의 하나입니다. 과거의 연구는 SAH 2와 관련된 신경 학적 결손의 주요 원인으로 지연 뇌 혈관 연축 (DCVS)에 초점을 맞추고있다. 그러나, 혈관 경련의 치료 후 SAH 고통받는 환자의 일반적 나쁨 임상 결과는 SAH 3 초 후 뇌 손상 (EBI)의 효과를 포함하는 연구 초점이 팽창되었다. SAH 후 나쁨 임상 결과에 기여하고 EBI DCVS 모두의 중요성은 더 큰 이해 효과적인 치료 전략의 개발이 필수적이다.

지금까지, cisterna 마그나에 단일 및 이중자가 혈액 주입 DCVS 2-6의 연구를위한 SAH 유도를위한 표준 방법이었다. 일반적으로 이전의 연구에서 사용했지만,이 모델은 대부분 SAH와 관련된 신경 병리학 주요 변경 사항을 재생하지 못하는 EBI 7을 유도. 대조적으로, 혈관 천공 부분적 EBI (7)의 증상을 모방 중증 급성 병리 생리 학적 변화를 생성하는 것으로 알려져있다.

이 보고서는 SAH의 신규 한 토끼 모델이 기재된 방법으로, 표준 cisterna 마그나 모델 동맥 시스템을 연결하여 구성된다. 이에 SAH 유도 병리학 8-10의 더 정확한 특성화를 허용 EBI 및 DCVS 양쪽의 조사를 가능하게하기위한 설명 체외 션트를 통해 쇄골 하 동맥과 cisterna 마그나의. 혈류시켜 토끼의 생리학에 링크와 동맥혈 및 두개 내압 사이의 압력 구배에 의해 구동된다. 뇌내 압력 (ICP)는 이완기 혈압이 같고 션트 시스템에서 혈액이 응고 할 때 출혈이 멈 춥니 다. 호스트 & #을 활용8217;의 생리 안정적으로 EBI와 DCVS 표현형 3,8-10 모두를 생산 SAH의 일관성 모델에지도 심사관에 의존 SAH 유도를 줄일 수 있습니다.

Protocol

2.5 무​​게 3 개월 된 여성 뉴질랜드 토끼 – 3.5 kg이 절차를 사용 하였다. 이 연구는 실험 동물의 관리 및 사용을위한 건강 지침의 국립 연구소에 따라 스위스, 베른 (승인 번호 13분의 105)의 광저우의 동물 관리위원회의 승인을 수행 하였다. 모든 수술은 베른, 스위스 베른 대학 병원에서 임상 연구학과의 실험 외과 연구소에서 무균 조건 하에서 수행 하였다. 동물 용 마취는 수술 중 및 복구에 걸쳐…

Representative Results

SAH의 토끼 피 션트 모델은이 보고서에서 설명하는 것은, 기저 피질 (그림 2A, B) 및 대뇌 혈관 (그림 2C)와 같은 초 24로 시간 부상 후 (B 그림 2A) 해마에서 EBI를 생산하고 특성을 나타낸다 혈액 분포 (그림 2D) 8. 또한,이 모델은 SAH 유도 (그림 3) 10 일 이후 세에 DCVS의 심한 정도가 적당한 트리거합니다. 급성 SAH시 호흡 ?…

Discussion

션트 모델 급성 SAH 3,8,10 후에 인간에서 관찰되는 것과 유사한 병리 현상을 생성한다. 그것은 EBI는 악화 유지하고 심지어 DCVS 12 트리거 등이 모델 SAH를 다음 EBI와 DCVS 상호 작용을 포함하여 초기와 후기 DCVS 단계를 모두 조사에 도움이 될 수로 수 있음을 제안하고있다. 특히, 반복 생체 DCVS DSA (13)을 포함하여 모니터링 기술, 15 개 readibly 작은 실험 동물에 비해 …

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 보스턴, MA 초안을 교정하기위한 교정 및 원고를 편집하고 Paskus 예레미야, 보스턴 아동 병원, 대한, 로리 폰 Melchner, 베른 대학교 의과 대학 신경 외과학 교실, 베른, 스위스 감사합니다. 우리는 다니엘 메틀, DVM, 최대 뮐러, DVM, 다니엘 Zalokar 및 Olgica Beslac, 실험 외과 학회, 임상 연구학과, 베른 대학, 베른, 스위스 동물 보호, 마취 및 수술 지원의 숙련 된 관리를 주셔서 감사합니다. 우리는 생리 학적 매개 변수의 실시간 데이터 모니터링 및 사후 처리를 위해, 마이클 Lensch, 헤드 연구 간호사, 중환자 의학 교실, 베른 대학 병원 베른 대학, 베른, 스위스 감사합니다. 우리는 우수한 실험실 기술 및 수술 지원, 에딘 Nevzati, 칼 Muroi, 그리고 살로메 Erhardt 감사합니다.

이 작품은 인텐시브의 부서에 의해 지원되었다전자 케어 의학, 베른 대학 병원 베른, 베른, 스위스, 임상 연구학과, 베른, 베른, 스위스의 대학의 대학 및 Kantonsspital 아라우, 아라우, 스위스에서 연구 기금. 우리는 그림 1과 2에 대한 무단 전재 허가를, 엘스 비어 감사합니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments/Description
Equipment
operation microscope Zeiss, Jena, Germany Zeiss, OPMI-MD surgical microscope
surgical equipment B. Braun, Germany forceps medical n°5, vessel sciccors 8cm, microclip 4mm
respirator Hugo Sachs
hair clipper 3M Surgical Clipper   Starter Kit 9667A
body warm plate FHC
blood gas analyzer Radiometer, Copenhagen, Denmark ABL 725
cardiac monitoring Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US AP-05
software analysis BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA Biopac MP100 and acqKnowledge software,version 3.8.1
software analysis ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA image-Pro Plus version 
angiography apparatus DFP 2000 A-Toshiba MIIXR0001EAA
ICP monitor Camino Laboratories, San Diego, CA, USA ICP monitor, Model 110-4B
blood flow monitor Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK CAL KIT microsphere solution
laser-Doppler flowmetry fine needle probes  Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK MNP110XP, 0.48 mm diameter
pressure tube B. Braun, Germay PE 1.0 mm × 2.0 mm
anesthesia monitor GE Medical Systems, Switzerland  Datex S5 Monitor
Material
20 G vascular catheter Smiths Medical Jelco i.v. catheter, REF 4057
5.5F three-lumen central venous catheter  Connectors, Tagelswangen, Switzerland silicone catheter STH-C040
22Gx40mm needle  Emergo Group Inc., Netherlands
high-speed microdrill Stryker, Solothurn, Switzerland 5400-15 
bone wax Ethicon, Johnson & Johnson,NJ, USA ETHW31G
bipolar forceps Aesculap, Inc., PA, US US349SP 
Ketamin Any generic product
Xylazine Any generic product
Buprenorphine Any generic product
Fentanyl Any generic product
transdermal fentanyl matrix patches  Any generic product
Lidocaine 1%  Any generic product
4% papaverin HCl  Any generic product
Neomycin sulfate  Research Organics Inc., OH, USA Any generic product
Povidone-iodine  Any generic product
0.9% sodium chloride Any generic product
Iopamidol  Abott Laboratories, IL, USA Any generic product
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
4-0 polyfilament sutures Ethicon Inc., USA VCP284G

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check_url/de/52132?article_type=t

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Diesen Artikel zitieren
Andereggen, L., Neuschmelting, V., von Gunten, M., Widmer, H. R., Takala, J., Jakob, S. M., Fandino, J., Marbacher, S. The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects. J. Vis. Exp. (92), e52132, doi:10.3791/52132 (2014).

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