Subaraknoid Kanama Akut ve Geç sekeli Çalışmaları Tavşan Kan şant Modeli: Teknik Yönleri
Summary
The experimental intracranial pressure-controlled blood shunt subarachnoid hemorrhage (SAH) model in the rabbit combines the standard procedures — subclavian artery cannulation and transcutaneous cisterna magna puncture, which enables close mimicking of human pathophysiological conditions after SAH. We present step-by-step instructions and discuss key surgical points for successful experimental SAH creation.
Abstract
Erken beyin hasarı ve gecikmiş serebral vazospazm hem subaraknoid kanama (SAK) sonrası istenmeyen sonuçlara katkıda bulunur. Her iki koşullarını simüle tekrarlanabilir ve kontrol hayvan modelleri halen nadirdir. Bu nedenle, yeni model SAH'dan Oluşan insan patofizyolojik koşullarda bunların taklit edilmesi için ihtiyaç vardır.
Bu rapor, intraserebral basıncın (ICP) kontrol edilmesini sağlayan bir tavşan kanlı-SAK şant modeli teknik nüansları açıklar. Bir ekstrakorporeal şant arteriyel sistemi ve kapalı kafa içinde sınav bağımsız SAK sağlayan subaraknoid, arasına yerleştirilir. Adım adım prosedürel talimatlar ve gerekli ekipman açıklanan, yanı sıra teknik değerlendirmeler minimal mortalite ve morbidite ile model üretmek için. Bu, sağlam, basit ve tutarlı ICP-kontrollü SAK tavşan modelinin başarılı cerrahi yaratılması için gerekli Önemli detaylar açıklanmıştır.
Introduction
Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) sık sık kalıcı nörolojik hasar veya ölüm 1 yol açan, nöropatolojik tehdit eden koşulların en hayat biridir. Geçmişte araştırma SAK 2 ile ilişkili nörolojik hasarların başlıca etkeni olarak gecikmiş serebral vazospazm (DCVS) odaklanmıştır. Ancak, vazospazm tedavisi sonrası SAK mustarip hastaların genellikle zayıf klinik sonuçları SAK 3 sonrası erken beyin hasarı (EBI) etkilerini içerecek şekilde araştırma odak genişlemesine yol açmıştır. SAK sonrası kötü klinik sonuçlara katkıda EBI ve DCVS hem öneminin daha iyi anlaşılması daha etkin tedavi stratejilerinin geliştirilmesi için esastır.
Şimdiye kadar, cisterna magna içine tek ve çift otolog kan enjeksiyonu DCVS 2-6 çalışma için SAK indüksiyonu için standart yöntem olmuştur. Daha önceki çalışmalarda yaygın olarak kullanılan rağmen,Bu model, büyük olasılıkla SAK ile ilişkili nöropatolojık önemli değişiklikleri yeniden değil EBI'ya 7 kaynaklı. Bunun aksine, endovasküler perforasyon kısmen EBI 7 semptomlarını şiddetli akut patofizyolojik değişiklikler üretilmesi bilinmektedir.
Bu rapor SAK yeni bir tavşan modeli tarif tekniği ile, standart sisterna magna modeli arter sistemi bağlayarak uyarlanmıştır. Böylece ŞAH-kaynaklı patoloji 8-10 daha doğru karakterizasyonu izin EBI ve DCVS hem soruşturma sağlamak için tasarlanmıştır açıklanır dışı bir köprü aracılığıyla subklavyan arter ve sisterna magna. Kan akışı artar ve tavşan fizyolojisi ile bağlantılıdır ve arteryel kan ve kafatası içi basıncı arasındaki basınç gradyanı ile tahrik edilir. Intraserebral basıncı (ICP) diastolik kan basıncı eşittir ve şant sisteminde kan pıhtılaşır zaman kanama durur. Ana & # kullanılması8217; fizyoloji güvenilir EBI ve DCVS fenotipleri 3,8-10 iki üreten SAK daha tutarlı bir modelini oluşturmak üzere, araştırmacı bağımlı SAK indüksiyon azaltır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Şant modeli akut SAK 3,8,10 sonra insanlarda gözlenene benzer bir patoloji üretir. Bu EBI arttıran korumak ve hatta DCVS 12 tetikleyebilir ve bunlar da bu model, SAH takip EBI ve DCVS etkileşimler de dahil olmak üzere, erken ve geç DCVS fazlar, iki araştırılması için yardımcı olabilir olabileceğini öne sürülmüştür. Özellikle, tekrarlanabilir in vivo DCVS DSA 13 olmak üzere izleme teknikleri, 15 daha readibly küçük laboratuvar hayvanlarında d…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar Boston, MA ilk taslağını düzeltiyorum için redaksiyon ve el yazması düzenleme ve Paskus Yeremya, Boston Çocuk Hastanesi, için, Laurie von Melchner, Bern Üniversitesi Hastanesi, Nöroşirürji Bölümü, Bern, İsviçre teşekkür ederim. Biz Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar ve Olgica Beslac, Deneysel Cerrahi Enstitüsü, Klinik Araştırmalar Bölümü, Bern Üniversitesi, Bern, İsviçre hayvan bakımı, anestezi ve ameliyat yardımı usta yönetimini takdir. Biz fizyolojik parametrelerin gerçek zamanlı veri izleme ve post-processing için, Michael Lensch, Baş Araştırma Hemşire, Yoğun Bakım Tıp Anabilim Dalı, Bern Üniversitesi Hastanesi ve Bern Üniversitesi, Bern, İsviçre teşekkür ederim. Biz onların mükemmel laboratuvar teknik ve operatif yardım için, Edin Nevzati Carl Muroi ve Salome Erhardt teşekkür ederiz.
Bu çalışma Yoğun Bölümü tarafından desteklenene Care Medicine, Bern Üniversitesi Hastanesi ve Bern, Bern, İsviçre, Klinik Araştırma Bölümü, Bern, Bern, İsviçre Üniversitesi Üniversitesi ve Kantonsspital Aarau, Aarau, İsviçre Araştırma Fonu. Biz Şekil 1 ve 2 için basım izni için, Elsevier teşekkür ederim.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Equipment | |||
| operation microscope | Zeiss, Jena, Germany | Zeiss, OPMI-MD surgical microscope | |
| surgical equipment | B. Braun, Germany | forceps medical n°5, vessel sciccors 8cm, microclip 4mm | |
| respirator | Hugo Sachs | ||
| hair clipper | 3M Surgical Clipper | Starter Kit 9667A | |
| body warm plate | FHC | ||
| blood gas analyzer | Radiometer, Copenhagen, Denmark | ABL 725 | |
| cardiac monitoring | Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| software analysis | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 and acqKnowledge software,version 3.8.1 | |
| software analysis | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | image-Pro Plus version | |
| angiography apparatus | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| ICP monitor | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | ICP monitor, Model 110-4B | |
| blood flow monitor | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | CAL KIT microsphere solution | |
| laser-Doppler flowmetry fine needle probes | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | MNP110XP, 0.48 mm diameter | |
| pressure tube | B. Braun, Germay | PE 1.0 mm × 2.0 mm | |
| anesthesia monitor | GE Medical Systems, Switzerland | Datex S5 Monitor | |
| Material | |||
| 20 G vascular catheter | Smiths Medical | Jelco i.v. catheter, REF 4057 | |
| 5.5F three-lumen central venous catheter | Connectors, Tagelswangen, Switzerland | silicone catheter STH-C040 | |
| 22Gx40mm needle | Emergo Group Inc., Netherlands | ||
| high-speed microdrill | Stryker, Solothurn, Switzerland | 5400-15 | |
| bone wax | Ethicon, Johnson & Johnson,NJ, USA | ETHW31G | |
| bipolar forceps | Aesculap, Inc., PA, US | US349SP | |
| Ketamin | Any generic product | ||
| Xylazine | Any generic product | ||
| Buprenorphine | Any generic product | ||
| Fentanyl | Any generic product | ||
| transdermal fentanyl matrix patches | Any generic product | ||
| Lidocaine 1% | Any generic product | ||
| 4% papaverin HCl | Any generic product | ||
| Neomycin sulfate | Research Organics Inc., OH, USA | Any generic product | |
| Povidone-iodine | Any generic product | ||
| 0.9% sodium chloride | Any generic product | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, USA | Any generic product | |
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP824G | |
| 5-0 non absorbable suture | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 4-0 polyfilament sutures | Ethicon Inc., USA | VCP284G | |
Referenzen
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K. Impaired feedback regulation of the receptor activity and the myofilament Ca2+ sensitivity contributes to increased vascular reactiveness after subarachnoid hemorrhage. Journal of cerebral blood flow and metabolism : official journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 30, 1637-1650 (2010).
- Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm. British journal of neurosurgery. 24, 415-434 (2010).
- Marbacher, S., Neuschmelting, V., Graupner, T., Jakob, S. M., Fandino, J. Prevention of delayed cerebral vasospasm by continuous intrathecal infusion of glyceroltrinitrate and nimodipine in the rabbit model in vivo. Intensive care medicine. 34, 932-938 (2008).
- Zhou, M. L., et al. Comparison between one- and two-hemorrhage models of cerebral vasospasm in rabbits. Journal of neuroscience. 159, 318-324 (2007).
- Vatter, H., et al. Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model. Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).
- Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Neurosurgery. 65, 331-343 (2009).
- Marbacher, S., et al. A new rabbit model for the study of early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Journal of neuroscience. 208, 138-145 (2012).
- Marbacher, S., et al. Outer skull landmark-based coordinates for measurement of cerebral blood flow and intracranial pressure in rabbits. Journal of neuroscience methods. 201, 322-326 (2011).
- Marbacher, S., et al. Extra-intracranial blood shunt mimicking aneurysm rupture: intracranial-pressure-controlled rabbit subarachnoid hemorrhage model. Journal of neuroscience. 191, 227-233 (2010).
- Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model. J Neurosci Methods. 167, 327-334 (2008).
- Macdonald, R. L. Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage. Nature reviews. Neurology. 10, 44-58 (2014).
- Zhang, Z. W., et al. Platelet-derived growth factor-induced severe and chronic vasoconstriction of cerebral arteries: proposed growth factor explanation of cerebral vasospasm. Neurosurgery. 66, 728-735 (2010).
- Laslo, A. M., Eastwood, J. D., Chen, F. X., Lee, T. Y. Dynamic CT perfusion imaging in subarachnoid hemorrhage-related vasospasm. AJNR. American journal of neuroradiology. 27, 624-631 (2006).
- Shao, Z., et al. Effects of tetramethylpyrazine on nitric oxide/cGMP signaling after cerebral vasospasm in rabbits. Brain research. 1361, 67-75 (2010).
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1086-1091 (1995).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1279-1283 (1995).
- Zakhartchenko, V., et al. Cell-mediated transgenesis in rabbits: chimeric and nuclear transfer animals. Biology of reproduction. 84, 229-237 (2011).
- Capecchi, M. R. Gene targeting in mice: functional analysis of the mammalian genome for the twenty-first century. Nature reviews. Genetics. 6, 507-512 (2005).
- Flisikowska, T., et al. Efficient immunoglobulin gene disruption and targeted replacement in rabbit using zinc finger nucleases. PloS one. 6, e21045 (2011).
- Nakajima, M., et al. Effects of aging on cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage in rabbits. Stroke. 32, 620-628 (2001).
