O coelho Modelo Blood-shunt para o Estudo da aguda e tardia Sequelas de hemorragia subaracnóidea: Aspectos Técnicos
Summary
The experimental intracranial pressure-controlled blood shunt subarachnoid hemorrhage (SAH) model in the rabbit combines the standard procedures — subclavian artery cannulation and transcutaneous cisterna magna puncture, which enables close mimicking of human pathophysiological conditions after SAH. We present step-by-step instructions and discuss key surgical points for successful experimental SAH creation.
Abstract
Lesão cerebral precoce e vasoespasmo cerebral atrasou tanto contribuir para desfechos desfavoráveis após hemorragia subaracnóidea (HSA). Modelos animais reprodutíveis e controláveis que simulam as duas condições são actualmente incomum. Portanto, os novos modelos são necessários para imitar condições fisiopatológicas humanos decorrentes da HAS.
Este relatório descreve as nuances técnicas de um modelo HAS-sangue shunt coelho que permite o controle da pressão intracraniana (PIC). Uma derivação extracorpórea é colocada entre o sistema arterial e o espaço subaracnóide, que permite HAS-examinador independente num crânio fechado. Passo-a-passo as instruções processuais e equipamentos necessários são descritos, bem como considerações técnicas para produzir o modelo com a mortalidade e morbidade mínima. Detalhes importantes necessários para a criação cirúrgica com sucesso deste modelo de coelho HAS controlada pelo ICP robusto, simples e consistente são descritos.
Introduction
Hemorragia subaracnóide aneurismática (HAS) é um dos mais fatais condições neuropatológicas, muitas vezes levando a danos neurológicos permanentes ou morte 1. Pesquisas anteriores se concentrou em vasoespasmo cerebral tardio (DCV são) como etiologia primária de déficits neurológicos associados com HAS 2. No entanto, os resultados clínicos geralmente pobres de pacientes que sofrem de HAS após o tratamento de vasoespasmo levou a uma expansão do foco de pesquisa para incluir os efeitos da lesão cerebral precoce (EBI) após SAH 3. Maior compreensão da importância de ambos EBI e as DCV são em contribuir para desfechos clínicos após SAH é essencial para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficazes.
Até agora, a injecção de sangue autólogo simples e dupla na cisterna magna tem sido o método padrão para a indução de HAS para o estudo de DCV são 2-6. Embora comumente utilizada em estudos anteriores,este modelo provavelmente não reproduz as principais alterações neuropatológicas associadas à HAS induzida EBI 7. Em contraste, a perfuração endovascular é conhecido por produzir alterações fisiopatológicas graves agudos que simulam parcialmente os sintomas da EBI 7.
Este relatório descreve um modelo de coelho romance de HAS projetado para permitir a investigação de ambos EBI e as DCV são, permitindo assim a caracterização mais precisa da patologia induzida pelo SAH 8-10. Com a técnica descrita, o modelo padrão cisterna magna é adaptado ligando o sistema arterial da artéria subclávia e da cisterna magna através de um shunt extracorpórea. O fluxo de sangue está, assim, ligada à fisiologia do coelho e dirigido pela diferença de pressão entre o sangue arterial e da pressão intracraniana. O sangramento pára quando a pressão intracraniana (ICP) iguala a pressão sanguínea diastólica e o sangue no sistema de derivação do coagula. Utilizando o anfitrião & #8217 s fisiologia reduz indução SAH examinador-dependente, levando a um modelo mais consistente de HAS que produz de forma confiável tanto EBI e as DCV são fenótipos 3,8-10.
Protocol
Representative Results
Discussion
O modelo de derivação produz patologia semelhante ao observado em seres humanos após SAH 3,8,10 aguda. Tem sido sugerido que pode exacerbar EBI, manter e mesmo desencadear DCV são 12, e, como tal, este modelo pode ajudar na investigação de ambas as fases precoce e tardia DCV são, incluindo interacções EBI e DCV são seguintes HAS. Em particular, repetível in vivo as DCV são técnicas de controlo, incluindo DSA 13, angiotomografia 14, e Doppler transcraniano…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores agradecem Laurie von Melchner, Hospital Universitário de Berna, Departamento de Neurocirurgia, Berna, Suíça, para revisão e edição do manuscrito e Paskus Jeremias, Hospital Infantil de Boston, Boston, MA pela revisão do projecto inicial. Agradecemos a gestão hábil de cuidados com os animais, anestesia e assistência operacional a partir de Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar e Olgica Beslac, Experimental Instituto Cirúrgico, Departamento de Pesquisa Clínica da Universidade de Berna, Berna, Suíça. Agradecemos Michael Lensch, Chefe de Pesquisa Enfermeira do Departamento de Medicina de Terapia Intensiva do Hospital Universitário de Berna e da Universidade de Berna, Berna, Suíça, para o monitoramento de dados em tempo real e pós-processamento dos parâmetros fisiológicos. Agradecemos Edin Nevzati, Carl Muroi, e Salomé Erhardt, por sua excelente laboratório de assistência técnica e operativa.
Este trabalho foi financiado pelo Departamento de Intensive Care Medicine, Hospital Universitário de Berna e da Universidade de Berna, Berna, Suíça, o Departamento de Pesquisa Clínica da Universidade de Berna, Berna, Suíça, e ao Fundo de Investigação do Kantonsspital Aarau, Aarau, Suíça. Agradecemos a Elsevier, a permissão para reimpressão Figuras 1 e 2.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Equipment | |||
| operation microscope | Zeiss, Jena, Germany | Zeiss, OPMI-MD surgical microscope | |
| surgical equipment | B. Braun, Germany | forceps medical n°5, vessel sciccors 8cm, microclip 4mm | |
| respirator | Hugo Sachs | ||
| hair clipper | 3M Surgical Clipper | Starter Kit 9667A | |
| body warm plate | FHC | ||
| blood gas analyzer | Radiometer, Copenhagen, Denmark | ABL 725 | |
| cardiac monitoring | Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| software analysis | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 and acqKnowledge software,version 3.8.1 | |
| software analysis | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | image-Pro Plus version | |
| angiography apparatus | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| ICP monitor | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | ICP monitor, Model 110-4B | |
| blood flow monitor | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | CAL KIT microsphere solution | |
| laser-Doppler flowmetry fine needle probes | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | MNP110XP, 0.48 mm diameter | |
| pressure tube | B. Braun, Germay | PE 1.0 mm × 2.0 mm | |
| anesthesia monitor | GE Medical Systems, Switzerland | Datex S5 Monitor | |
| Material | |||
| 20 G vascular catheter | Smiths Medical | Jelco i.v. catheter, REF 4057 | |
| 5.5F three-lumen central venous catheter | Connectors, Tagelswangen, Switzerland | silicone catheter STH-C040 | |
| 22Gx40mm needle | Emergo Group Inc., Netherlands | ||
| high-speed microdrill | Stryker, Solothurn, Switzerland | 5400-15 | |
| bone wax | Ethicon, Johnson & Johnson,NJ, USA | ETHW31G | |
| bipolar forceps | Aesculap, Inc., PA, US | US349SP | |
| Ketamin | Any generic product | ||
| Xylazine | Any generic product | ||
| Buprenorphine | Any generic product | ||
| Fentanyl | Any generic product | ||
| transdermal fentanyl matrix patches | Any generic product | ||
| Lidocaine 1% | Any generic product | ||
| 4% papaverin HCl | Any generic product | ||
| Neomycin sulfate | Research Organics Inc., OH, USA | Any generic product | |
| Povidone-iodine | Any generic product | ||
| 0.9% sodium chloride | Any generic product | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, USA | Any generic product | |
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP824G | |
| 5-0 non absorbable suture | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 4-0 polyfilament sutures | Ethicon Inc., USA | VCP284G | |
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