Preparação das Culturas cérebro de um rato Aggregate para Neuron Glia e Estudos de Desenvolvimento
Summary
A protocolos para um sistema cerebral de ratos embrionários cultura agregada é descrita. Progenitores multipotentes nos agregados podem se desenvolver e se diferenciar em neurônios, astrócitos e oligodendrócitos.
Abstract
Um sistema in vitro que recapitula o desenvolvimento e diferenciação de progenitores em neurônios maduros e células gliais no sistema nervoso central (SNC) proporcionaria uma plataforma poderosa para os neurocientistas para investigar axo-glial interações, propriedades e diferenciação de células progenitoras multipotentes, ea progressão da oligodendroglial células da linhagem no nível celular e molecular. Descrevemos aqui um sistema de cultura CNS agregado de prosencéfalo embrionárias de ratos, que podem ser mantidos em um meio isento de soro até 3-4 semanas e é usado em nosso laboratório como modelo para estudar a interação neurônio glia e mielinização do SNC. Este vídeo vai demonstrar como isolar e cultivar essas culturas CNS agregado de E16 cérebro de rato. Além disso, a partir da dissecção mesmo cérebro, altamente enriquecido regulares dissociada culturas neuronais podem ser facilmente obtidos e utilizados para vários estudos sobre os neurônios do SNC ou utilizados para co-culturas com outras células.
Protocol
Discussion
Os primeiros estudos relataram a formação de sinapses e de mielina maduras em rotação mediada livre de culturas agregada flutuante 1. O SNC sistema de cultura agregada descrita aqui combina sem soro crescimento de células progenitoras multipotentes em três agregados dimensional com a conveniência de culturas tradicionais em 2D para facilitar a análise de migração celular, desenvolvimento e diferenciação in vitro. O sistema pode ser modificado e usado para precursoras neurais pesquisas com…
Acknowledgements
Este estudo foi financiado em parte por fundos start-up da Universidade Texas A & M
Referencias
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