3D الثقافة الطابق السفلي غشاء المقايسة: زراعة الخلايا السرطانية على مصفوفة بروتين غشاء الطابق السفلي 3D لدراسة غزو الخلايا
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: سفيتكوفيتش، د.، وآخرون. القياس الكمي لتوغل خلايا سرطان الثدي باستخدام نموذج ثلاثي الأبعاد (ثلاثي الأبعاد). ج. فيس إكسب (2014).
يقدم هذا الفيديو منهجية مفصلة لزراعة خلايا سرطان الثدي في مصفوفة بروتين غشاء الطابق السفلي ثلاثي الأبعاد ، مما يجسد إمكانات الثقافة ثلاثية الأبعاد في تقييم غزو الخلايا في البيئة المحيطة.
Protocol
1. ثقافة ثلاثية الأبعاد من خلايا سرطان الثدي في مصفوفة غشاء الطابق السفلي (تقنية التضمين) التعامل مع مصفوفة غشاء الطابق السفلي Matrigel: ذوبان الجليد بين عشية وضحاها في 4 °C. مصفوفة غشاء الطابق السفلي سائلة في درجة حرارة منخفضة ولكنها تتماسك في درجة حرارة الغرفة. الحفاظ على مصفوفة…
Representative Results
الشكل 1 – الأرقام 1- الأرقام التي يمكن أن ثقافة ثلاثية الأبعاد من خلايا سرطان الثدي MDA-MB-231 في مصفوفة غشاء الطابق السفلي (تقنية التضمين). A-B) تخطيطي للإعداد التجريبي (يتم تنفيذه في غطاء الدخان). ج) بئر الطبق ذو القاع الزجاجي المغلف ب 50 ميكرول…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 35-mm glass-bottomed Confocal No.1 culture dishes | MatTek Corporation | P35G-1.0-14-C | Precooled before use |
| Bovine serum albumin (BSA) | BioShop | ALB003.100 | Used at 3% for IF |
| 1.5 ml tubes | VWR | CA10011-700 | CA10011-700 |
| 100-mm culture dish BD353003 | VWR | CABD353003 | Sterile, disposable |
| 15 ml Falcon tube | VWR | CA21008-918 | Sterile, disposable |
| 1 ml filtered tips | VWR | 10011-350 | Sterile, disposable |
| 200 μl filtered tips | VWR | 22234-016 | Sterile, disposable |
| 20 μl filtered tips | VWR | 22234-008 | Sterile, disposable |
| Fetal bovine serum (FBS) | Sigma | F1051 | Used at 10% (v/v) |
| RPMI 1640 Medium with Glutamine | Life Technologies | 11875-119 | Used for culturing of MDA-MB-231 cells |
| MEGM (bullet kit): MEBM (CC3151)+Single quots (CC4136) | Lonza | CC-3150 | Used for culturing of MCF10A cells |
| Olympus IX-81 microscope | Olympus | Used for 3D culture imaging (DIC images at 10X and 40X) |
Citar este artículo
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).