Havayolu Direnci Ölçümleri ve Fare Bronkoalveolar Lavaj Sıvısı Örnekleme için, geri dönüşümlü, Non-invaziv Yöntemi

Summary

Kemirgen solunum fizyolojisi ve solunum yolu inflamatuar hücrelerin örnekleme tekrarlanan ölçümler arzu edilir, ancak genellikle mümkün değildir. Burada sözlü havayolu inflamatuar hücrelerin havayolu hiperreaktivite ve örnekleme tekrarlanan ölçümler izin verir fareler Entübasyon için tekrarlanabilir bir yöntem açıklanmaktadır.

Abstract

Havayolu hiperreaktivite (AHR) ölçümleri ve bronkoalveoler lavaj (BAL) sıvısı örneklemesi, deneysel astım modelleri için gerekli olan, ama aynı hayvan gibi ölçümler elde etmek için tekrarlanır prosedürleri genellikle mümkün değildir. Burada, farelerde AHR ve bronkoalveoler lavaj sıvısı örnekleri tekrarlanan ölçümler elde etmek için protokoller göstermektedir. Fareler tedavi güçlü bir allerjen veya plasebo ile 14 gün boyunca intranazal yedi kez meydan vardı. Ilk meydan okuma öncesinde ve her intranazal meydan takip eden 24 saat içinde, aynı hayvanlar sözlü entübe ve mekanik ventilasyon, anesteziye edildi. Sahte ve alerjene meydan hayvanlar arasında asetilkolin (Ach) klorür intravenöz doz artırarak yol açtığı solunum sistemi direnci (RRS) doz cevap eğrileri karşılaştırılarak değerlendirilir AHR, tespit edilmiştir. Daha sonra, böylece hava yolu hücreleri bu diferansiyel numaralandırma yapılabilir ve aynı entübasyon ile, sol akciğere lavaj oldu. Bu çalışmalar AHR ve BAL sıvı toplanması tekrarlanan ölçümler aynı hayvanların mümkün olduğunu ortaya koyuyor ve bu maksimum hava yolu aşırı duyarlılığı ve havayolu eozinofili allerjen başlatılması 7-10 gün içinde elde edilir. Bu roman tekniği uzunlamasına deney için gerekli olan farelerin sayısını önemli ölçüde azaltır ve çeşitli kemirgen türleri, hastalık modelleri ve havayolu fizyolojisi aletleri için geçerli.

Protocol

Allerjen: C57BL / 6 fareler, yaş 4-8 hafta, derin genel anestezi elde etmek için 10 dakika boyunca oksijen buhar karışımı% 3.2 izofluran ile tasfiye hava geçirmez bir pleksiglas odasında anestezi. Intranazal allerjen sorunları (45μL OVA (22.5 mikrogram) ve 7μL A. oryzae (7 mg), PBS içinde) olmak üzere toplam yedi ardışık uygulamaları, Perşembe ve Pazar günleri, her Salı, yönetilmektedir. Anestezi: Önce her bir allerjen, ve…

Discussion

Çalışmada, astım ve diğer çeşitli hava yolu obstrüktif hastalıkları, biyomedikal araştırmanın aktif ve genişleyen bir alan oluşturmaktadır. Astım ile ilgili deneysel araştırmaların önemli bir bileşeni, değişen koşullar altında havayolu boyutu değişiklikleri ölçmek için kapasite. Provokatif meydan okuma, kurallı bir özelliği, astım ve ilgili akciğer hastalıkları ve solunum yolu olarak adlandırılan hava yolu aşırı duyarlılığının bir özellik yanıt aşırı hava yolu daralma…

Materials

Airway physiology measurement software (Rescomp) was custom prepared (Millenium Premier Group; 415-519-4371).
Data was analyzed using a PC workstation running Windows XP equipped with a Pentium III CPU (Intel, Inc. Santa Clara, CA) and a 17-pin analog to digital signal converter (National Instruments, #PC-LPM16).
A small animal airway physiology workstation was custom assembled (Millenium Premier Group) using commercially available pressure transducers (part #TRD5700 and TRD4510), preamp modules (part #MAX2270), chassis (part # MAX1320; all from Buxco, Inc. Wilmington, NC) and a customized small animal plethysmograph.
0.5mm external diameter fiber-optic thread, connected to light source (Cole Palmer Illuminator, 41722 series)
Ventilator (Harvard Apparatus Mouse Ventilator, #687)
10 mm, 27ga needle (BD Biosciences, cat. no. 309602)
Heat lamp
1 ml syringe (BD Biosciences, cat. no. 305109)
4 clamps (Pony 3200 spring clamp)
0.5 mm external wire for intubation guide
Hemacytometer
Superfrost/plus microscope slides (Fisher cat. no. 12-550-15)
Shandon Filter Cards (Thermo cat. no. 5991022)
Differential cell slide stain (Fisher cat. no. 122911)
Light microscope (Leica)
Cytospin 3 (Shandon)
20 ga, 1.25 inch ProtectIV intravenous catheters (Smith Medical)
0.5 mm polymer optical fiber (Edmund Optics # NT02-532).

<!– OLD Materials List 4/12/10 Changed

Airway physiology measurement software (Rescomp) was custom prepared (Millenium Premier Group; 415-519-4371) and data were analyzed using a PC workstation running Windows XP equipped with a Pentium III CPU (Intel, Inc. Santa Clara, CA) and a 17-pin analog to digital signal converter (National Instruments, #PC-LPM16). Small animal airway physiology workstation was custom assembled (Millenium Premier Group) using commercially available pressure transducers (part #TRD5700 and TRD4510), preamp modules (part #MAX2270) and chassis (part # MAX1320; all from Buxco, Inc. Wilmington, NC) and a customized small animal plethysmograph. 0.5mm external diameter fiber-optic thread, connected to light source (Cole Palmer Illuminator, 41722 series); Ventilator (Harvard Apparatus Mouse Ventilator, #687); 10 mm, 27ga needle (BD Biosciences, cat. no. 309602); Heat lamp; 1 ml syringe (BD Biosciences, cat. no. 305109); 4 clamps (Pony 3200 spring clamp); 0.5 mm external wire for intubation guide); Hemacytometer; Superfrost/plus microscope slides (Fisher cat. no. 12-550-15); Shandon Filter Cards (Thermo cat. no. 5991022); Differential cell slide stain (Fisher cat. no. 122911); Light microscope (Leica); Cytospin 3 (Shandon); 20 ga, 1.25 inch ProtectIV intravenous catheters (Smith Medical); 0.5 mm polymer optical fiber (Edmund Optics # NT02-532).

–>