Summary
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Abstract
परिधीय धमनी रोग के पशु मॉडल में preclinical अनुसंधान microcirculation में प्रोत्साहित करने के लिए डिज़ाइन किया गया चिकित्सीय एजेंट की प्रभावकारिता परीक्षण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. प्रशासन का मार्ग गहराई से इन एजेंटों 1,2 की bioactivity और प्रभावकारिता को प्रभावित करता है क्योंकि इन एजेंटों के लिए वितरण पद्धति के चुनाव महत्वपूर्ण है. इस अनुच्छेद में, हम स्थानीय स्तर पर एक catheterized आसमाटिक पंप का उपयोग करके इस्कीमिक hindlimbs में एक पदार्थ प्रशासन को कैसे प्रदर्शित करता है. इस पंप समय की एक आवंटित अवधि के लिए लगातार जलीय घोल की एक निश्चित मात्रा वितरित कर सकते हैं. हम भी छोड़ दिया hindlimb में profunda ग्रीवा और epigastrica धमनियों की उत्पत्ति के लिए समीपस्थ आम ऊरु धमनी की ligation द्वारा प्रेरित एकतरफा hindlimb ischemia के अपने माउस मॉडल प्रस्तुत करते हैं. अन्त में, हम MICROFIL, एक सिलिकॉन radiopaque कास्टिंग एजेंट के साथ अधोमूत्र पिंडीय उदर महाधमनी और hindlimb वाहिका संरचना के छिड़काव के vivo केन्युलेशन और बंधाव में वर्णन. MICROFIL छिड़कना और भरने पूरे संवहनी बिस्तर (धमनियों और शिराओं), और हम बाहर निकलने के लिए प्रमुख संवहनी नाली ligated है, क्योंकि एजेंट छोटा सा नमूना सूक्ष्म सीटी 3 के उपयोग के साथ भविष्य के पूर्व vivo इमेजिंग के लिए vasculature में बनाए रखा जा सकता है सकते हैं .
Introduction
परिधीय धमनी रोग (पैड) पैर 4 में अपर्याप्त रक्त की आपूर्ति का कारण बनता है कि एक atherosclerotic रोग है. यह 8-12000000 अमेरिकियों को प्रभावित करता है, और वर्तमान चिकित्सा उपचार केवल सीमित राहत 5,6 प्रदान करते हैं. पैरों में रक्त परिसंचरण में सुधार है कि उपन्यास चिकित्सीय एजेंट केवल रोग प्रगति को नियंत्रित बल्कि जीवन की गुणवत्ता में वृद्धि नहीं होगी. अक्सर पुराने रोगियों में देखा कम गुर्दे और जिगर समारोह दवा चयापचय कमी और प्रणालीगत प्रशासन के साथ दुष्प्रभावों को बढ़ा सकते हैं क्योंकि पैड की घटना को 50 वर्ष की आयु से अधिक लोगों में अधिक है, इसलिए स्थानीय pharmacologic उपचार के लिए एक अधिक वांछनीय उपचार के साधन है.
इस प्रकार, हम स्थानीय स्तर पर प्रशासित एजेंटों angiogenesis और microvascular remodeling के बढ़ावा देने के द्वारा hindlimb इशेमिया कम है कि क्या जांच करने के लिए पैड के एक माउस मॉडल बनाया. विशेष रूप से, हम लगातार करने के लिए चिकित्सीय एजेंट देने के लिए एक catheterized आसमाटिक पंप का इस्तेमाल कियाचूहों के इस्कीमिक जांघ की मांसपेशी. हमारी वितरण प्रणाली का प्रयोग, हम स्थानीय पर्यावरण में दवा का इष्टतम सांद्रता बनाए रखने में सक्षम थे, इस दृष्टिकोण, उचित दवा bioactivity के लिए अनुमति देता है संभव प्रणालीगत दुष्प्रभाव से बचा जाता है, और प्रणालीगत प्रशासन से जुड़े सीमित स्थानीय दवा उपयोग के नुकसान पर काबू. साथ ही, स्थानीय स्तर पर प्रशासित एजेंटों revascularization को बढ़ावा देने का आकलन है कि, हम उन्नत कास्टिंग और microvasculature में परिवर्तन की मात्रा का ठहराव है कि सक्षम उच्च परिभाषा इमेजिंग तकनीकों का इस्तेमाल किया. सामूहिक रूप से, इस वीडियो लेख में इस्तेमाल के तरीके के संयोजन पैड रोगियों 7-9 में औषधीय प्रेरित revascularization को समझने में सहायता करने के लिए preclinical अध्ययन में उपयोगी है.
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Protocol
1. भड़काना परासरणी पम्प
- पंपों की तैयारी जब बाँझ तकनीक (जैसे दस्ताने, लामिना का प्रवाह हुड) का प्रयोग करें. पैकेजिंग से पंप और प्रवाह मध्यस्थ निकालें. खाली पंप वजन और वजन (एमजी) रिकॉर्ड है.
- एक छोटे 1cc सिरिंज और कुंद इत्तला दे दी 27G भरने ट्यूब का उपयोग करके, हवाई बुलबुले बनाने से बचने के लिए, धीरे धीरे पंप भरें. समाधान पंप के शीर्ष तक पहुँच जाता है, भरने को रोकने के.
- अतिरिक्त समाधान से साफ कर लें और भरे पंप तौलना. सबसे जलीय समाधान के लिए, मिलीग्राम में वजन μl में मात्रा के रूप में ही है. खाली बनाम भरे वजन में अंतर निर्दिष्ट मतलब भरने मात्रा का 90% से अधिक होना चाहिए. यदि नहीं, तो सिरिंज और फिर से भरना साथ पंप खाली. आप तकनीकी कठिनाई का अनुभव करते हैं कृपया http://www.alzet.com/products/guide_to_use/filling.html पर पंप निर्देशों का निवारण अनुभाग को देखें
- प्रवाह moderat से सफेद निकला हुआ तोड़ने के लिए संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करेंया, ट्यूब मोड़ या कुचलने के लिए नहीं सावधान रहना होगा. 3-4 मिमी के बारे में कवर, मध्यस्थ के दोनों छोर को एक P50 के कैथेटर देते हैं. कैथेटर और संलग्न मध्यस्थ भरने और कैथेटर के दूरस्थ भागों में संलग्न सिरिंज छोड़ने के लिए एक सिरिंज का प्रयोग करें.
- कैथेटर पंप सतह से भरा है जब तक पंप में प्रवाह मध्यस्थ डालें. फिर, कैथेटर के बाहर का अंत से सिरिंज को हटा दें. प्रधानमंत्री से 6 घंटे की एक न्यूनतम (अधिमानतः हे / एन) माउस में दाखिल होने से पहले पंप के लिए एक 37 डिग्री सेल्सियस इनक्यूबेटर में एक बाँझ 0.9% खारा या पीबीएस समाधान में पंप रखें. पंप वितरण दर मॉडल संख्या (यानी मॉडल 1002 = 14 दिनों के लिए 0.25 μl / घंटा). साथ बदलता रहता है
2. माउस में एकतरफा hindlimb Ischemia बनाना
- 0.4 एल / मिनट की एक प्रवाह दर पर 100% 2 हे में 2-4% के बीच isoflurane के सेट के साथ चूहों anesthetize और एक depilato साथ hindlimb और वापस क्षेत्र पर (अधिमानतः सर्जरी से पहले दिन) बाल हटानेry क्रीम.
- सर्जरी से पहले सभी सर्जिकल उपकरणों जीवाणुरहित. प्रेरण संज्ञाहरण कक्ष में माउस रखें. धारा 2.1 में वर्णित एक ही संज्ञाहरण सेटिंग्स का उपयोग करें.
- माउस के बाहर उत्तेजनाओं को गैर जिम्मेदार है और फिर isoflurane की एक सतत प्रवाह (1.5-2.0%) बचाता है कि एक फिट नाक शंकु के साथ ऑपरेटिंग मेज पर प्रवण स्थिति में डाल दिया है जब तक प्रतीक्षा करें.
- चीरा स्थल पर; संवेदनाहारी की सिफारिश की खुराक (0.25% (<1 मिलीग्राम / किग्रा) Bupivacaine); इंजेक्षन 70% इथेनॉल के बाद povidone आयोडीन समाधान के साथ त्वचा का इलाज. वापस (स्पाइनल कॉलम के पक्ष में, scapulae क्षेत्र में) पर एक 4-6 मिमी चीरा. ठीक संदंश के साथ चमड़े के नीचे झिल्ली अलग करें, तो लापरवाह स्थिति के लिए माउस बारी 70% इथेनॉल के द्वारा पीछा किया और औसत दर्जे का जांघ की दिशा में घुटने के ऊपर सूक्ष्म शल्य कैंची से 0.8-1 सेमी चीरा बनाने के लिए एक povidone आयोडीन समाधान के साथ त्वचा का इलाज, ऊरु धमनी के मार्ग का अनुसरण.
- ऊपर सुरंगपीठ पर चीरा को औसत दर्जे का जांघ से छोटे म्यान ट्यूबिंग (6 फ्रेंच) के साथ धड़ की ओर.
- प्रवण स्थिति में माउस रखें. पीबीएस समाधान से primed आसमाटिक पंप / कैथेटर निकालें और जांघ के लिए, म्यान ट्यूबिंग के माध्यम से, कैथेटर गाइड.
- वापस अंदर पंप स्थित करें और 6-0 Prolene सिवनी (70% इथेनॉल के बाद povidone आयोडीन समाधान के साथ त्वचा का इलाज) के साथ वापस चीरा बंद करें. लापरवाह स्थिति में माउस वापस प्लेस, जांघ पर चीरा के माध्यम से अवगत कराया कैथेटर छोड़ने, म्यान ट्यूबिंग हटा दें. सर्जिकल टेप के साथ पैर सुरक्षित.
- वाहिका प्रकट करने के लिए वसा ऊतकों को अलग करें. बेहतर वाहिका कल्पना, चीरा खोलने के लिए एक प्रतिकर्षक का उपयोग करें.
- संवहनी बंडल का उपयोग करने के लिए ठीक बताया संदंश का उपयोग करके धीरे पियर्स झिल्लीदार ऊरु म्यान. काटना और कमर के पास ऊरु नस और तंत्रिका से ऊरु धमनी अलग कारण के लिए नहीं ख्याल रख रही पूर्वcessive खून बह रहा है.
- जगह दो 8-0 prolene आसन्न टांके ऊरु धमनी ऊरु विभाजन (profunda ग्रीवा और epigastrica धमनियों की उत्पत्ति) को समीपस्थ 2-3 मिमी बाधित करने के लिए.
- उचित लंबाई के लिए कैथेटर कट और मादक द्रव्यों के लक्षित वितरण सुनिश्चित करने के लिए सतही प्रावरणी के लिए एक 6-0 Prolene सीवन के साथ इसे हासिल करने, जांघ की अग्रपाश्विक क्षेत्र के लिए टिप जगह है. एक 6-0 चल सीवन के साथ पैर चीरा बंद करें. एनाल्जेसिक के अंतिम चमड़े के नीचे इंजेक्शन (Buprenorphine, 0.1 मिलीग्राम / किग्रा) प्रशासन, 70% इथेनॉल के बाद povidone आयोडीन समाधान के साथ त्वचा का इलाज और पिंजरे के लिए माउस वापसी. वसूली के दौरान एक हीटिंग दीपक का प्रयोग करें.
- एक 30 मिनट की अवधि के सुधार के बाद, hindlimb ischemia के निर्माण की पुष्टि करने के लिए लेजर डॉपलर इमेजिंग के लिए माउस को तैयार.
- दिन में दो बार सर्जरी के बाद 5 दिनों के लिए पशु मॉनिटर. पशु की गतिशीलता दर्द का विश्लेषण करने के लिए मनाया जाएगा, पिंजरे में बर्बादी एक भारतीय के रूप में काम करेगाखाने की ator. पशु दर्द या असुविधा का सामना कर रहा है, तो भी, निगरानी अवधि के दौरान निर्धारित और दो बार दैनिक Buprenorphine (0.1mg/kg) के एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन दे.
3. इमेजिंग नमूना तैयार करना
- 2.1 धारा में कहा गया है माउस anesthetize. लापरवाह स्थिति में ऑपरेटिंग मेज पर माउस स्थानांतरण. Subcutaneously vasculature में थक्के रोकने के लिए हेपरिन के 1,000 आइयू इंजेक्षन. माउस nosecone से जुड़ा हुआ है, वहीं वक्ष गुहा और पेट के निचले हिस्से को बेनकाब करने के लिए काफी बड़े के लिए एक चीरा बनाते हैं. अधोमूत्र पिंडीय उदर महाधमनी (आई ए ए) का पर्दाफाश करने के लिए पशु के बाईं तरफ पेट अंगों ले जाएँ. अवर कावा नस से महाधमनी ध्यान से अलग.
- कैथेटर प्रविष्टि के दौरान रक्तस्राव को कम करने के लिए समीपस्थ आई ए ए ligate. फिर, आई ए ए पर एक छोटा सा चीरा बनाते हैं. आई ए ए में साढ़े जी कुंद सुई (एक P10 के कैथेटर से जुड़ी) एक 27 को डालें और 6-0 सीवन के साथ सुरक्षित.
- भरें दोHeparinized खारा और 10% तटस्थ साथ 20cc सीरिंज (NBF) formalin buffered. एक विपरीत radiopaque सिलिकॉन रबर परिसर के साथ एक 5cc सिरिंज भरें. एमवी मंदक: 1:1.25:0.5 का काम कर अनुपात में एमवी इलाज एजेंट एमवी परिसर के तीन अवयवों मिश्रण. एजेंट polymerizes से पहले मिश्रण (MICROFIL) केवल 20 मिनट का समय काम है, यह वाहिका में इंजेक्शन से पहले सही जब तक एमवी इलाज एजेंट जोड़ने के लिए नहीं की सिफारिश की है.
- सही प्रांगण में कटौती करें और इच्छामृत्यु प्रेरित करने के लिए और अधिक तरल पदार्थ की जल निकासी के लिए अनुमति देने के लिए isoflurane के एक ज्यादा प्रशासन. सुई टिप को नमक से भरे सिरिंज देते हैं और 5 मिनट के लिए वाहिका फ्लश करने के लिए शुरू करते हैं. सभी रक्त वाहिकाओं के बाहर प्लावित है सुनिश्चित करें, isoflurane बंद कर देते हैं और निस्तब्धता शुरू होता है एक बार nosecone काटना. अगला, ऊपर विस्तृत कैथेटर (3.2) और एक अतिरिक्त 5 मिनट के लिए दबाव छिड़कना को formalin से भरे सिरिंज देते हैं. अंत में, इसके विपरीत के साथ, पिछले सिरिंज छिड़कनाधीरे से 5 मिनट के लिए माउस में एजेंट,.
- वैकल्पिक: तस्वीर एक कैमरा के साथ vasculature में MICROFIL केवल धमनी संरचना perfused है कि यह सुनिश्चित करने के लिए.
- 4 में 10% NBF और दुकान डिग्री सीओ / विपरीत एजेंट polymerization के लिए एन से भरा एक कंटेनर में माउस रखें. 24 घंटे के बाद, विच्छेदन उपकरणों का उपयोग करके धड़ के निचले आधे (निचले उदर महाधमनी बंधाव को बाहर का) पर त्वचा को हटाने के 10% NBF ताज़ा, और आरटी पर 4 से अधिक दिनों के लिए कंटेनर में वापस माउस जगह.
- Contralateral और इस्कीमिक hindlimbs काटना, और हड्डी के विकैल्सीकरण की सुविधा के लिए 48 घंटे के लिए एक चींटी एसिड समाधान (काल पूर्व द्वितीय) में नमूनों जगह है. फिर, 1 घंटा और 10% NBF में लौटने के लिए चल रहे पानी के नीचे नमूनों कुल्ला और Faxitron (एक्स - रे प्रणाली हड्डी decalcified है सुनिश्चित करने के लिए प्रयोग किया जाता है) और सूक्ष्म सीटी इमेजिंग के साथ आगे बढ़ना.
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Representative Results
एनीमेशन प्रोटोकॉल में विस्तृत आसमाटिक पंप प्रविष्टि और hindlimb इशेमिया सर्जरी को दर्शाता है. चित्रा 1 इशेमिया पुष्टि hindlimb के छिड़काव के लेजर डॉपलर छवियों से पता चलता है. MICROFIL साथ संवहनी कास्टिंग के बाद, संवहनी नेटवर्क का एक 3 डी सूक्ष्म सीटी छवि MICROFIL (2A चित्रा) को प्रभावी ढंग से जहाजों भर सकते हैं कि पता चलता है, लेकिन है कि discontinuities (जैसे, हवा बुलबुले की कमी के कारण विभिन्न प्रक्रियात्मक कारकों की वजह से (चित्रा 2 बी) हो सकता है MICROFIL का दबाव, चिपचिपाहट).
एनिमेशन लीजेंड
- प्रवण स्थिति में माउस रखें और अपनी पीठ स्पाइनल कॉलम के पक्ष में पर एक चीरा बनाने.
- छोटे वापस चीरा बेनकाब.
- लापरवाह स्थिति में माउस प्लेस और औसत दर्जे का जांघ पर घुटने के ऊपर एक छोटा सा चीरा बनाते हैं.
- त्वचा अलग, वाहिका का पर्दाफाश, और समझौता ज्ञापनों की ओर धड़ म्यान ट्यूबिंग डालनेवापस चीरा के लिए ई.
- आसमाटिक पंप लो और म्यान ट्यूबिंग में कैथेटर डालने.
- लापरवाह स्थिति में माउस प्लेस और जांघ में चीरा के लिए ट्यूबिंग के माध्यम से कैथेटर नीचे गाइड.
- प्रवण स्थिति में माउस रखें और अपनी पीठ पर पंप की स्थिति और चीरा बंद करें.
- लापरवाह स्थिति में माउस प्लेस और म्यान ट्यूबिंग हटा दें.
- एक प्रत्याकर्षक साथ त्वचा वापस खींचो और धमनी से नस को अलग करने के microsurgical उपकरणों का उपयोग करें. सीवन के साथ ऊरु विभाजन ऊपर ऊरु धमनी ligate डबल.
- जांघ की सतही ऊतकों को कैथेटर सुरक्षित.
- सीवन के साथ पैर चीरा बंद करें.
चित्रा 1. लेजर डॉपलर छिड़काव इमेजर माध्यम hindlimb ischemia की पुष्टि. प्रतिनिधि डॉपलर छवियों थानेदारडब्ल्यू माउस hindlimb में ऊरु धमनी की शल्य बंधाव से पहले और बाद रक्त छिड़काव. Ischemia (तीर देखें) बाएं hindlimb में बनाया गया था.
चित्रा 2. MICROFIL साथ hindlimb vasculature की 3 डी माइक्रो सीटी छवि. संवहनी कास्टिंग hindlimb (ए) के दौरान नसों और धमनियों के एक नेटवर्क का पता चलता है. MICROFIL की दरार भी (बी), एक विस्तृत संवहनी नेटवर्क के दृश्य को अक्षम (तीर देखें) हो सकता है.
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Discussion
यहाँ हम hindlimb ischemia के एक माउस मॉडल में आसमाटिक दवा / पदार्थ वितरण के लिए एक तरीका मौजूद है. इसके अलावा, हम संवहनी नेटवर्क के विश्लेषण के लिए एक 3 डी पुनर्निर्माण का उत्पादन करने MICROFIL का इस्तेमाल किया है, जिसमें एक कास्टिंग तकनीक का वर्णन है.
ischemia के स्तर या गंभीरता धमनी बंधाव / छांटना किया जाता है जहां के अनुसार बदलता रहता है. हम profunda ग्रीवा और epigastrica धमनियों की उत्पत्ति के लिए समीपस्थ आम ऊरु धमनी में एक डबल बंधाव बनाया है, इस दृष्टिकोण बाहर का hindlimb में एक और अधिक गंभीर ischemia के उत्पादन कर सकते हैं. सर्जरी के बाद जानवरों की निगरानी और दर्दनाशक दवाओं की स्थानीय प्रशासन से दर्द से राहत प्रदान करने के लिए सुनिश्चित करें. इसके अतिरिक्त, MICROFIL हमेशा पूरी तरह अंग वाहिका छिड़कना नहीं हो सकता है. इस प्रकार, यह सभी रक्त heparinized खारा के छिड़काव के बाद वाहिका संरचना के बाहर rinsed है कि यह सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है. MICROFIL का अधूरा छिड़काव के कारण एक की कमी शामिल हैpplied दबाव या MICROFIL के अनुचित चिपचिपापन, जो दोनों के MICROFIL hindlimb के सबसे दूरस्थ क्षेत्रों तक पहुँच जाता है सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त हो सकता है और इस प्रकार पूरे वाहिका भरता चाहिए. विशेष जानवर आवेदन के लिए मंदक अनुपात: इन मुद्दों का समाधान करने के लिए परिसर के साथ 100 mmHg और प्रयोग पर लगातार दबाव लागू होते हैं.
Arteriogenesis (पूर्व मौजूदा जमानत धमनी विकास) का अध्ययन करने के लिए, आदर्श दृष्टिकोण जमानत वाहिकाओं में रक्त के प्रवाह को दिशानिर्देश देने में गहरी ऊरु शाखा की उत्पत्ति को तुरंत बाहर का ऊरु धमनी ligate है. हालांकि, इस प्रक्रिया के जवाब माउस उपभेदों के बीच व्यापक रूप से भिन्न होता है, और ischemia की हद (जैसे, C57BL / 6) कुछ माउस उपभेदों में अपर्याप्त हो सकती है. एक कम गंभीर इस्कीमिक मॉडल ऐसे C57BL 6 / के रूप में भारी vascularized माउस उपभेदों में उपचारात्मक प्रभाव की जांच के लिए समय की एक लम्बी खिड़की प्रदान नहीं कर सकते. इन समस्याओं से बचने के लिए, हम hindlimb इशेमिया ख बनायावाई बेहतर स्थानीय दवा की रिहाई के प्रभाव को प्रदर्शित करने के लिए एक और अधिक गंभीर इशेमिया बनाया जो समीपस्थ ऊरु धमनी, ligating, लेकिन, इस दृष्टिकोण समीपस्थ गहरी शाखा जमानत वाहिकाओं में arteriogenesis का विश्लेषण precludes. इस प्रकार, चिकित्सीय प्रभाव दवा / पदार्थ जारी की है जहां शारीरिक स्थान (अग्रपाश्विक जांघ) के साथ संगत है, जो बाहर का इस्कीमिक क्षेत्र, मुख्य रूप से तैयार कर रहे हैं. स्थानीय रक्तस्राव सूजन और arteriogenesis और angiogenesis दोनों को प्रभावित करती है जो शोफ, हो सकता है क्योंकि सर्जरी के दौरान, वे इसे कमजोर ऊरु नस घायल नहीं महत्वपूर्ण है. हम खिंचाव, तनाव, या धमनी का टूटना से बचने के लिए एक उपयुक्त गाँठ टाई के साथ ऊरु धमनी ligate को 8-0 prolene टांके का उपयोग करना चाहिये. इसके अलावा, MICROFIL इसे जल्दी इंजेक्शन के लिए तकनीकी कठिनाइयों बनाता है, जो polymerizes क्योंकि 3 सामग्री (यौगिक, मंदक, और इलाज एजेंट) मिश्रण के बाद (20 मिनट के भीतर) तुरंत इस्तेमाल किया जाना चाहिए. पहले स्टेशन के रूप मेंटेड, MICROFIL हमेशा सफलतापूर्वक छोटे वाहिका छिड़कना नहीं है, लेकिन उचित तकनीक का अभ्यास और प्रयोग के इस सीमा को पार कर सकते हैं.
पंप भरने मात्रा मतलब भरने मात्रा का 90% से अधिक होना चाहिए, नहीं तो, अतिरिक्त वायु पंप के अंदर फंस सकता है. अतिरिक्त तकनीकी जानकारी पर स्थित है www.alzet.com . इसके अलावा, MICROFIL एजेंट एक विशेष आवेदन के लिए पसंदीदा चिपचिपापन पर होना चाहिए, मिश्रित करने मंदक के अनुपात संशोधित करने की आवश्यकता हो सकती है.
hindlimb ischemia के मॉडल अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है और पैड 10,11 के लिए लागू है. इस मॉडल में चिकित्सीय एजेंट के स्थिर वितरण जानकारीपूर्ण परिणाम 2 को प्राप्त करने के लिए आवश्यक है. अंत में, हम शब्द के भागों संरचनाओं कल्पना करने के लिए इस्तेमाल किया 3 डी इमेजिंग तकनीक माउस वाहिका संरचना की जांच के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण है और studyi के लिए एक शक्तिशाली प्रणाली प्रदान करता हैएनजी संवहनी विकृतियों.
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Disclosures
लेखक ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा. सभी पशु प्रक्रियाओं प्रयोगशाला पशु की देखभाल और उपयोग के लिए दिशा निर्देशों के अनुसार आयोजित किए गए थे और ह्यूस्टन में टेक्सास स्वास्थ्य विज्ञान केंद्र के विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया.
Acknowledgments
लेखकों संपादकीय सहायता के लिए, सूक्ष्म सीटी शल्य चिकित्सा सहायता के लिए इमेजिंग, एडवर्ड वें ये, एमडी, और रेबेका Bartow, पीएचडी के साथ अपने तकनीकी सहायता के लिए एमडी एंडरसन छोटे पशु इमेजिंग सुविधा के कीथ मिशेल को धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन द्वारा भाग में समर्थित किया गया था.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagent/Material | |||
| Surgical tools | Fine Science Tools | Type: Tool | |
| Puritan sterile cotton swabs | Fisher Scientific | 22-029-499 | Type: Tool |
| Betadine (povidone-iodine) | Fisher Scientific | 19-065534 | Type: Reagent |
| 70% Alcohol pads | Fisher Scientific | NC9926371 | Type: Reagent |
| Phosphate buffered saline | Lonza | 17-516F | Type: Reagent |
| 6-0 prolene suture | Cardinal Health | 8709 | Type: Tool |
| 8-0 prolene suture | Cardinal Health | 2775 | Type: Tool |
| Depilatory cream | Nair | Type: Tool | |
| Osmotic pump |  ALZET |
1002 | Type: Tool, 14 day release |
| Vinyl catheter | ALZET |
7760 | Type: Tool |
| Heparinized saline (0.9%) | Baxter | 2B0944 | Type: Reagent |
| Neutral buffered formalin | Richard-Allan Scientific | 5705 | Type: Reagent |
| Microfil (silicone rubber contrast agent) | Flowtech | MV-112 | Type Reagent, Microfil White |
| Cal-Ex II (formic acid solution) | Fisher Scientific | CS511-1D | Type: Reagent |
| Buprenex | CIII | 7571 | Type: Analgesic |
| Bupivicaine | Hospira, Inc. | 381 | Type: Analgesic |
| Equipment | |||
| Dissecting microscope | Carl Zeiss Microimaging | Zeiss Stemi 2000-C | Type:Equipment |
| Laser Doppler perfusion imager | Perimed Inc. | Periscan PIM3 | Type:Equipment |
| Micro-CT imaging system | GE Healthcare | Explore Locus SP | Type:Equipment |
References
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