High-Throughput Quantification of the Synthesis and Distribution of mtDNA

May 05, 2023

基于图像的高通量线粒体DNA合成和分布定量

用于线粒体DNA合成的siRNA混合物的制备

细胞转染和5-溴-2'-脱氧尿苷（BrdU）在HeLa细胞中的掺入

HeLa细胞中线粒体DNA的5-溴-2'-脱氧尿苷（BrdU）标记

HeLa细胞固定与Hoechst 33342和阻断

向转染的HeLa细胞中添加一抗和二抗以监测mtDNA分布

定量图像分析，用于测量转染HeLa细胞中的mtDNA和基因表达水平

Lukasz S. Borowski², Karolina Kasztelan³, Jolanta Czerwinska-Kostrzewska², Roman J. Szczesny

¹Faculty of Biology, Institute of Genetics and Biotechnology,University of Warsaw, ²Institute of Biochemistry and Biophysics,Polish Academy of Sciences, ³International Institute of Molecular and Cell Biology in Warsaw

Summary

描述了使用多孔板格式和自动免疫荧光成像来检测和量化mtDNA合成和分布的细胞中线粒体DNA（mtDNA）代谢动力学的程序。这可以进一步用于研究各种抑制剂，细胞应激和基因沉默对mtDNA代谢的影响。

Article