High-Throughput Quantification of the Synthesis and Distribution of mtDNA

May 05, 2023

כימות מבוסס תמונה בתפוקה גבוהה של סינתזה והפצה של DNA מיטוכונדריאלי

01:31 min

•

הכנת תערובת siRNA לסינתזה של DNA מיטוכונדריאלי

00:45 min

•

טרנספקציה של תאים ושילוב 5-Bromo-2'-Deoxyuridine (BrdU) בתאי HeLa

01:19 min

•

5-Bromo-2'-Deoxyuridine (BrdU) תיוג של DNA מיטוכונדריאלי בתאי HeLa

01:44 min

•

קיבוע תאי HeLa עם Hoechst 33342 וחסימה

01:05 min

•

הוספת נוגדנים ראשוניים ומשניים לתאי HeLa הנגועים כדי לפקח על התפלגות mtDNA

02:04 min

•

ניתוח תמונה כמותי למדידת mtDNA ורמות ביטוי גנים בתאי HeLa הנגועים

03:02 min

•

Lukasz S. Borowski², Karolina Kasztelan³, Jolanta Czerwinska-Kostrzewska², Roman J. Szczesny

¹Faculty of Biology, Institute of Genetics and Biotechnology,University of Warsaw, ²Institute of Biochemistry and Biophysics,Polish Academy of Sciences, ³International Institute of Molecular and Cell Biology in Warsaw

Summary

מתואר הליך לחקר הדינמיקה של מטבוליזם של דנ”א מיטוכונדריאלי (mtDNA) בתאים באמצעות פורמט צלחת מרובת בארות והדמיה אימונופלואורסצנטית אוטומטית כדי לזהות ולכמת סינתזה והפצה של mtDNA. זה יכול לשמש גם כדי לחקור את ההשפעות של מעכבים שונים, לחצים תאיים והשתקת גנים על חילוף החומרים mtDNA.