Summary
Este protocolo introduz um ensaio do luz-ponto para investigar o comportamento phototática da Drosophila larval. Neste ensaio, um ponto luminoso é gerado como a estimulação clara, e o processo da vacância clara larval é gravado por um sistema Light-based infravermelho da imagem latente.
Abstract
As larvas de Drosophila melanogaster mostram um comportamento óbvio de evitar a luz durante o estágio de forrageamento. Os Phototaxis de Drosophila larval podem ser usados como um modelo para estudar o comportamento da vacância animal. Este protocolo introduz um ensaio do luz-ponto para investigar o comportamento phototática larval. A set-up experimental inclui duas partes principais: um sistema de estimulação visual que gera o ponto de luz, e um sistema de imagem à base de luz infravermelha que registra o processo de evasão de luz larval. Este ensaio permite o rastreamento do comportamento da larva antes de entrar, durante o encontro, e depois de deixar o ponto de luz. Detalhes de movimento larval incluindo desaceleração, pausa, fundição de cabeça e torneamento podem ser capturados e analisados usando este método.
Introduction
As larvas de Drosophila melanogaster mostram um comportamento óbvio de evitar a luz durante o estágio de forrageamento. Drosophila larval Phototaxis tem sido investigação, especialmente nos últimos 50 anos1,2,3,4,5,6,7 ,8. Nos últimos anos, apesar do fato de que 1) muitos neurônios que mediando a vacância clara larval foram identificados4,5,9,10,11,12 e 2) o conectoma completo do sistema visual larval na definição das sinapses foi estabelecido13, os mecanismos neural que subjacente Phototaxis larval permanecem pela maior parte obscuros.
Vários ensaios comportamentais têm sido utilizados no estudo de fototaxia larval. Podem ser divididos em grande parte em duas classes: um que envolve gradientes claros espaciais e o outro que envolve inclinações claras temporais. Para ensaios espaciais de gradiente de luz, a arena é dividida em número igual de seções em claro e escuro. A arena pode ser dividida em metades claras e escuras2,4ou quadrantes claros e escuros14,15, ou pode mesmo ser separado em quadrados claros e escuros alternativos como em um tabuleiro de damas7. Geralmente, as placas de agar são usadas para o ensaio de gradiente de luz espacial, mas os tubos que são divididos em seções leves e escuras alternadas também podem ser usados10,14.
Na versão mais antiga dos ensaios, a iluminação luminosa geralmente origina-se abaixo das larvas. Entretanto, a iluminação em umas versões mais novas origina pela maior parte de acima, desde que os olhos larval (por exemplo, os órgãos de bolwig que são sensíveis às intensidades claras baixas ou médias16) são contidos no esqueleto esqueleto opaco com aberturas para na frente superior. Isso faz com que as larvas mais sensíveis à luz de direções frontais superiores do que de baixo para trás direções7. Para ensaios de gradiente de luz temporal, a intensidade da luz é espacialmente uniforme na arena, mas a intensidade muda ao longo do tempo. Além do que a luz de onda quadrada temporal (isto é, piscando de ligar/desligar ou luz forte/fraca3,7), aluz temporally de variação que se conforma a uma rampa linear na intensidade é usada igualmente8 para medir a sensibilidade das larvas a um estímulo de luz temporalmente em mudança.
Um terceiro tipo de ensaio Phototaxis é a navegação luz direcional Scape, que envolve a iluminação de cima em um ângulo de 45 °7. Antes do trabalho de Kane et al.7, apenas parâmetros grosseiros como o número de larvas em regiões claras e escuras, frequência de torneamento e comprimento da trilha foram calculados em ensaios de fototaxia larval. Desde o trabalho deste mesmo grupo, com a análise de registro de vídeo de alta resolução temporal para Phototaxis larval, dinâmica detalhada do movimento larval durante Phototaxis (ou seja, velocidades instantâneas de diferentes partes do corpo larval, direção de posição, ângulo de giro e velocidade angular correspondente) foram analisados7. Assim, mais detalhes do comportamento larval Phototaxis têm sido capazes de ser descoberto. Nestes ensaios, as larvas são testadas em grupos para que os efeitos de grupo não sejam excluídos.
Este protocolo introduz um ensaio do luz-ponto para a investigação de respostas comportáveis larval à estimulação clara individual. O principal conjunto experimental consiste em um sistema de estimulação visual e sistema de imagem à base de luz infravermelha. No sistema de estimulação visual, uma fonte de luz LED gera um ponto de luz redondo de 2 cm de diâmetro em uma placa de ágar, onde a larva é testada. A intensidade da luz pode ser ajustada usando um driver LED. O sistema de imagem inclui uma câmera infravermelha que captura o comportamento da larva, além de 3 850 nm LEDs infravermelhos que fornecem iluminação para a câmera. A lente da câmera é coberta por um filtro de banda-Pass 850 nm para bloquear a luz do sistema de estimulação visual de entrar na câmera, enquanto a luz infravermelha é permitida para entrar na câmera. Assim, a interferência da estimulação visual na imagem latente é impedida. Neste ensaio, os detalhes comportamentais das respostas rápidas de larvas individuais dentro de um período que inclui antes, durante, e após a entrada da luz são gravados e analisados.
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Protocol
1. preparação de larvas de Drosophila
- Prepare o meio padrão constituído por farinha de milho cozida (73 g), Agar (5,6 g), farelo de soja (10 g), levedura (17,3 g), xarope (76 mL) e água (1000 mL).
- Levante todas as moscas a 25 ° c no meio padrão em um quarto com um ciclo claro/escuro de 12 h/12 h.
2. preparação de placas de agar
- Prepare 1,0% de solução de agar. Pesar 3 g de agar em um copo de 500 mL com um equilíbrio, em seguida, adicione 300 mL de água destilada. Coloc um papel da folha sobre o disjuntor para impedir que a água evoque. Aqueça o copo em um microondas para ferver.
- Tire o copo e mexa bem com uma haste de vidro, em seguida, aqueça em um forno de microondas para ferver. Repita até que o líquido seja completamente transparente e fluido.
Nota: a solução de agar quente final deve estar livre de bolhas de ar; caso contrário, despejar o agar na placa resultará em superfície irregular e amolgada da placa de agar, que afetará os testes de comportamento larval subsequentes. A concentração da solução de agar não deve ser demasiado alta ou baixa. Se a concentração é demasiado elevada, a reflexão difusa clara na placa do ágar será forte e manchar o limite claro/escuro. Se a concentração for muito baixa, as larvas deixarão vestígios na placa. Ambos os erros irão dificultar o processamento de vídeo mais tarde no protcol. - Despeje lentamente a solução de agar quente em uma placa de Petri (diâmetro 15 cm) até que o fundo é uniformemente coberto com uma camada de agar (~ 4 mm de espessura), e esfriar à temperatura ambiente (RT) até que a solução de agar é solidificada.
- A placa do agar deve ser usada quando é preparada recentemente. Se não for, despeje uma camada de água na superfície e guarde-a no refrigerador a 4 ° c para uso posterior.
3. set-up do sistema de estimulação visual
- Selecione a fonte de luz LED: luz azul collimada LED a 470 nm ou luz branca quente.
Nota: a fonte de luz pode ser substituída com luz LED de qualquer outro comprimento de onda. Neste experimento, o LED de luz azul é usado como exemplo. - Role uma parte grossa de folha de alumínio ou de cartão preto (assegure a opacidade) para dar forma a um cilindro aberto de 12 cm do comprimento com um diâmetro similar àquele do diodo emissor de luz azul com um diâmetro de 3 cm. Deixe a extremidade superior do cilindro cobrir a extremidade dianteira do LED de luz azul. Cubra a extremidade inferior com um cartão preto com um pequeno furo redondo (0,5 cm de diâmetro) no centro. Isto constitui a fonte de luz do sistema de set-up.
- Fixar a fonte de luz preparada para o quadro de ferro com um clipe, certificando-se a luz LED projeta para baixo em direção ao desktop. Incline ligeiramente o cilindro. O ângulo entre o plano do cilindro e o plano vertical é de cerca de 10 ° (ver Figura 1). Ligue a luz LED azul 470 nm à ficha "LED1" do controlador LED de alta potência. Ligue o driver, gire o botão no canto superior direito do driver para selecionar o canal 470 nm, em seguida, clique em LED. Em seguida, quando a tela exibe "√", um ponto de luz azul aparecerá na área de trabalho.
Nota: se o cilindro de vazamentos de luz, além do pequeno buraco redondo, recomenda-se usar fita preta sobre as peças vazando para se certificar de que apenas o furo pode passar a luz através. - Clique em OK e gire o botão para ajustar a intensidade da luz. Gire o botão para uma intensidade de luz maior de 50 mA. Meça e registre o espectro da luz com um espectrómetro.
- Mova a posição da fonte de luz para cima e para baixo para ajustar o diâmetro do ponto de luz para 2 cm. O ambiente de trabalho deve ser preto para um melhor efeito de contraste.
- Gire o botão para escolher a intensidade da luz de acordo com as necessidades experimentais. Use um console compacto do medidor de poder com um sensor padrão do poder do fotodiodo para medir o poder claro máximo e mínimo no ponto, grava-o, mede três vezes, e toma o valor médio.
Nota: recomenda-se usar um sensor do poder do fotodiodo para medir a intensidade de luz para a luz de um comprimento de onda específico e para usar um sensor térmico da potência para medir a intensidade de luz para a luz branca. - Calcule a intensidade da luz no ponto de luz dividindo a potência de luz medida pela área do sensor.
Nota: por exemplo, se a potência de luz medida na etapa 2,6 é de 20 pW e área do sensor é 0,81 mm2, a intensidade de luz é 24,69 PW/mm2 (dividindo 20 PW por 0,81 mm2).
4. set-up do sistema de imagem
- Fixe uma câmara Web de alta resolução com um clip de ferro, a cerca de 10 cm acima do ponto de luz no ambiente de trabalho (Figura 1).
- Ajuste a orientação da lente da câmera para a área de trabalho. Ligue a câmara a um computador através de uma interface USB.
- Coloque uma placa de agar na área de trabalho logo abaixo da câmera.
- Abra o software "AMCAP 9.22" no computador com o Windows 7, e o ponto de luz será mostrado automaticamente na janela do AMcap. Mova a câmera ligeiramente para a esquerda ou para a direita para garantir que o ponto luminoso esteja próximo ao centro da janela. Certifique-se de que a câmera não bloqueia o caminho de luz. O ponto luminoso deve ser completo e redondo.
Nota: o software pode ser encontrado em http://amcap.en.softonic.com/. - Fixe um filtro passa-banda de 850 nm ± 3 Nm com um clipe a 5-7 mm logo abaixo da câmara.
Nota: o diâmetro do filtro é de cerca de 2,5 cm, e a lente da câmera é inferior a 1 cm de diâmetro, de modo que o filtro pode cobrir o campo visual da câmera. Com o filtro abaixo da câmera, o ponto de luz não deve ser visto na janela do AMcap. - Coloque três LEDs geradores de luz infravermelha (comprimento de onda central = 850 nm) uniformemente em torno da placa de agar. Cada LED deve ser cerca de 5 cm de distância da borda da placa de agar, e a face da lente do LED deve estar em um ângulo de 70 ° para baixo em direção à placa de agar. Ligue os LEDs à alimentação através do conversor AC-to-DC.
Nota: é melhor fixar as posições e ângulos dos LEDs de luz infravermelha para garantir a consistência do brilho do campo em vários ensaios experimentais e facilitar o processamento de vídeo posterior. - Coloque uma placa preta entre o computador e o dispositivo. Defina o brilho da tela do computador para evitar que a luz da tela do computador afete o experimento.
Nota: Mantenha o ambiente escuro quando medir o comprimento de onda ou a intensidade da luz.
5. definindo parâmetros de imagem
- No menu do software AMcap, escolha Options | Dispositivo de vídeo | Formato de captura, e definir o tamanho do pixel do vídeo capturado para 800 x 600 e taxa de quadros para 60 fps.
- Remova o filtro a câmera, coloque uma régua a câmera e ajuste o foco da câmera para tornar a linha de escala clara e paralela à largura do campo de exibição de vídeo.
- Clique em capturar | Configurar | Captura de vídeo para selecionar o caminho de salvamento, clique em Iniciar gravação, registre a distância real correspondente a 600 pixels e calcule a proporção de cada pixel para a distância real.
6. gravação video do comportamento da vacância clara
- Manter uma temperatura de 25,5 ° c através de todos os experimentos. Controle a temperatura ambiente com um condicionador de ar, se necessário. Mantenha a umidade constantemente em 60% com um humidificador.
- Faça um pequeno vídeo da posição do ponto de luz denominado "lightarea1". Em seguida, mova o filtro 850 nm ± 3 Nm de volta para cobrir a lente da câmera.
Nota: ao gravar o comportamento larval, a lente da câmera é coberta pelo filtro 850 nm ± 3 Nm para que o ponto de luz não seja mostrado no vídeo. O ponto de luz pode ser reconstruído em vídeos com larvas mais tarde com o MATLAB. Não altere a posição da câmera e evite alterar a proporção de cada pixel para a distância real medida na etapa 4,3. - Gire sobre uma luz (isto é, uma luz do quarto) faraway do dispositivo experimental. Abaixe a luz o mais baixo possível, contanto que as larvas possam claramente ser vistas com os olhos. Retire as larvas do meio de cultura com uma colher, gentilmente escolha uma larva de terceiro instar, e lave-a limpa com água destilada. Tenha cuidado para lavar a larva um de cada vez para evitar a interferência da fome. Um único experimento requer pelo menos 20 larvas.
- Transfira a larva para o centro da placa de agar colocada a câmera durante a etapa 3,3. Remova delicadamente o excesso de água da larva com uma escova ou use o papel blotting para remover a água da larva para impedir a reflexão da luz a lente. Desligue a luz do quarto e permita que a larva aclimatar por 2 minutos no ambiente escuro.
- Ligue a luz LED para gerar luz infravermelha, e escovar suavemente a larva para o centro da placa. Quando a larva começa a rastejar em linha reta, gire a placa para fazer a cabeça da larva em direção ao ponto de luz. Certifique-se de que ele rastreia direto desde o início, ou então ele pode não obter acesso ao ponto de luz.
- Clique em capturar | Configurar | Captura de vídeo para selecionar o caminho de salvamento e clique em Iniciar gravação para gravar. Permita que a larva rasteje para o ponto claro, incorpore o ponto claro, a seguir deixe o ponto claro até que esteja quase fora do campo de visão. Clique em parar gravação. Se a larva se afastar do ponto de luz antes de chegar perto, clique diretamente em parar a gravação.
- Afaste o filtro da câmara. Faça um pequeno vídeo da posição do ponto de luz denominado "lightarea2" e compare-o com "lightarea1" para garantir que a posição do ponto de luz não seja alterada. Se uma alteração de posição óbvia for observada, descarte os dados.
7. análise de dados
- Use SOS17 para extrair contorno do corpo animal e parâmetros de movimento de vídeos usando métodos de processamento de imagem como descrito anteriormente17.
Nota: parâmetros incluindo headSpeed (velocidade da cabeça larval), tailSpeed (velocidade da cauda larval), midSpeed (velocidade do ponto médio larval da linha de esqueleto), e cmSpeed (velocidade do centroide larval) foram usados para medir a velocidade de movimento larval. Os parâmetros que incluem o headTheta (o ângulo entre as linhas de cabeça-ponto médio e Midpoint-Tail) e headOmega (a velocidade de mudança de headTheta) foram usados para medir a dobra larval do corpo e a velocidade angular da dobra.
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Representative Results
De acordo com o protocolo, o ensaio de ponto de luz foi utilizado para investigar o comportamento de evitação de luz de larvas de terceiro instar que foram levantadas a 25 ° c em meio padrão em uma sala com um ciclo claro/escuro de 12 h/12 h. Uma única larva de w1118 foi testada usando o ensaio do ponto claro em 25,5 ° c. A intensidade luminosa média do ponto luminoso gerado por um diodo emissor de luz de 460 nanômetro era 0,59 μW/cm2. Todo o processo de larval entrando e saindo do ponto de luz foi gravado e analisado usando o software SOS e scripts escritos personalizados12,17. Curvas de tempo da velocidade da cauda, ângulo de dobra do corpo e velocidade angular da dobra do corpo de uma larva representativa são mostradas na Figura 2 e no filme 1.
Para investigar os efeitos de neurônios octopaminergic na vacância clara larval, as larvas do terceiro instar com os neurônios octopaminergic inibidos expressando a toxina do tétano (UAS-TNTG) com um excitador Tdc2-Gal4 foram testadas com o ensaio do luz-ponto. Como mostrado na Figura 3, o tamanho do molde de cabeça larval (ângulo de dobra do corpo máximo) foi significativamente reduzido em comparação com os controles parentais, indicando que os neurônios Tdc2-Gal4 são necessários para uma resposta de luz larval normal.
Figura 1: set-up experimental. (A) representação esquemática da set-up para o ensaio de fototaxia rápida larval à luz do ponto. As linhas azuis representam os trajetos da luz visível usada como a estimulação visual, e as linhas vermelhas representam os trajetos da luz infravermelha. As setas indicam a direção da luz. O filtro da faixa-passagem de 850 nanômetro permite que a luz infravermelha passe, mas obstrui a luz visível. B) uma imagem da set-up para o ensaio de ponto luminoso. Deve-se notar que a imagem foi tomada condições de luz para melhor visualização. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: descrição quantitativa da reação de uma larva ao entrar em um ponto de luz. A) umdiagrama que mostra os parâmetros utilizados na medição do movimento do corpo larval. O contorno de uma larva é mostrado na linha fina. A linha grossa mostra o esqueleto do contorno de corpo larval diluído. As duas extremidades e ponto médio da linha de esqueleto são atribuídos como posições de cabeça larval, ponto médio e cauda. O ângulo entre a linha da cabeça ao ponto médio e a linha do ponto médio à cauda é o ângulo de dobra do corpo. A velocidade da mudança do ângulo de dobra do corpo ao longo do tempo é definida como a velocidade angular do elenco da cabeça larval. Representado aqui são a velocidade da cauda (B, tailspeed), cabeça elenco velocidade angular (C, headomega), e corpo de ângulo de dobra (D, headtheta) de um w1118 larva que entra e deixa um ponto de luz. As linhas verdes marcam o ponto temporal que a cabeça larval entrou e deixou o ponto luminoso. A janela de tempo de um período forte de desaceleração está em amarelo. As cabeças de seta apontam para períodos de desaceleração e picos relacionados na velocidade angular do elenco principal e no ângulo de dobra do corpo. O processo comportamental é mostrado no filme 1. Este número foi modificado de Gong et al.12. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3: inibindo Tdc2-Gal4 rotulados neurônios usando a toxina tetânica TNTG reduz o tamanho do elenco cabeça larval em resposta à entrada do ponto de luz. * *, P < 0, 1, n = 81, 52, 92; O teste de Kruskal-Wallis seguido do teste de comparação múltipla post hoc de Dunn foi utilizado. Este número foi modificado de Gong et al.12. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Filme 1: A w1118 larva entra e deixa um ponto de luz no ensaio de ponto de luz. Ponto de luz com borda suavizada está em branco. A faixa de cabeça larval é mostrada. As curvas correspondentes de velocidade traseira larval, headtheta e headomega são tocadas simultaneamente. Este filme foi modificado de Gong et al.12. Por favor clique aqui para ver este vídeo. (Clique com o botão direito do mouse para baixar.)
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Discussion
Este protocolo apresenta o ensaio de ponto de luz para testar a capacidade de larvas de Drosophila para escapar da luz. Este ensaio permite rastrear o comportamento das larvas antes de entrar, durante o encontro, e depois de deixar um ponto de luz. Detalhes do movimento larval podem ser capturados e analisados. O ensaio do ponto claro é muito simples e possui a pratiqubilidade forte. O custo de todo o dispositivo não é alto. No experimento, a luz LED é usada como fonte de luz. Ele pode ser substituído por fontes de luz de diferentes comprimentos de onda, se necessário. A intensidade da luz também pode ser ajustada pela unidade LED. A menor intensidade de luz no local pode chegar a 1,80 pW/mm2 (luz branca fria). Mesmo com uma intensidade de luz tão baixa, as larvas ainda podem sentir a luz e mostrar comportamentos que evitam a luz11.
Deve-se notar que a concentração da placa de agar é controlada entre 0,8% e 1,0%. Se a concentração é muito alta, espalhamento de luz sobre a placa de agar pode ser grave, e o tamanho do ponto de luz reconhecido no vídeo é exagerado. Portanto, o brilho do ponto não deve ser muito alto. Desde que as larvas em um ponto claro são mal visíveis, se a luz visível é usada para a iluminação, é necessário usar a luz infravermelha para iluminar a larva e para adicionar um filtro da faixa-passagem de 850 nanômetro na câmera para impedir que os sinais do ponto claro entrem na câmera. O vídeo da resposta larval aos pontos claros pode ser sintetizado mais tarde com base nos vídeos somente de larva e de luz Spot.
O ensaio do ponto luminoso possui três virtudes principais: 1) o processo da vacância clara larval pode ser monitorado e analisado em detalhe; 2) a resposta larval da luz é testada somente uma vez, de modo que a participação possível da adaptação clara possa ser excluída; e 3) possíveis efeitos na resposta à luz de outras larvas podem ser excluídos. Uma desvantagem óbvia deste ensaio é que é baixa taxa de transferência, desde que somente uma larva é testada em um momento. Embora este ensaio seja usado aqui principalmente em baixas intensidades da luz11,12, podeigualmente aplicar-se à vacância larval na luz forte que pode excitar a classe IV da neurônios que telha a superfície de paredes do corpo16.
Nosso dispositivo experimental pode igualmente ser usado para o optogenetics. O filtro da faixa-passagem de 850 nanômetro pode obstruir a luz da excitação, como faz para o sinal do ponto claro, de modo que a câmera possa gravar comportamentos larval antes, durante, e após a estimulação da luz vermelha claramente. Especificamente, quando a luz vermelha 620 nm é usada em combinação com Chrimson para a estimulação optogenética, as baixas metades de LEDs de luz infravermelha precisam ser mascaradas, e a direção da luz vermelha deve ser bem controlada para a imagem das larvas claramente. Entrementes, os níveis moderados de sinais ruidosos que originam da luz vermelha na imagem podem ser usados para julgar o sincronismo da estimulação de ligar/desligar. Em suma, o ensaio de ponto de luz fornece um método de adição para monitorar e analisar Propriedades espaciais e temporais detalhadas do comportamento rápido de evasão de luz larval.
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Disclosures
Os autores não têm nada a revelar.
Acknowledgments
Este trabalho é apoiado pela Fundação de ciência natural da China (31671074) e fundos de pesquisa fundamentais para as universidades provinciais de Zhejiang (2019XZZX003-12).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 850 nm ± 3 nm infrared-light-generating LED | Thorlabs, USA | PM100A | Compatible Sensors: Photodiode and Thermal Optical Power Rangea: 100 pW to 200 W Available Sensor Wavelength Rangea: 185 nm-25 μm Display Refresh Rate: 20 Hz Bandwidtha: DC-100 kHz Photodiode Sensor Rangeb: 50 nA-5 mA Thermopile Sensor Rangeb: 1 mV-1 V |
| AC to DC converter | Thorlabs, USA | S120VC | Aperture Size: Ø9.5 mm Wavelength Range: 200-1100 nm Power Range: 50 nW-50 mW Detector Type: Si Photodiode (UV Extended) Linearity: ±0.5% Measurement Uncertaintyc: ±3% (440-980 nm), ±5% (280-439 nm), ±7% (200-279 nm, 981-1100 nm) |
| band-pass filter | Thorlabs, USA | DC2100 | LED Current Range: 0-2 A LED Current Resolution: 1 mA LED Current Accuracy: ±20 mA LED Forward Voltage: 24 V Modulation Frequency Range: 0-100 kHz Sine Wave Modulation: Arbitrary |
| Collimated LED blue light | ELP, China | USBFHD01M | Max. Resolution: 1920X1080 F6.0 mm Sensor: 1/2.7" CMOS OV2710 |
| Compact power meter console | Ocean Optics, USA | USB2000+(RAD) | Dimensions: 89.1 mm x 63.3 mm x 34.4 mm Weight: 190 g Detector: Sony ILX511B (2048-element linear silicon CCD array) Wavelength range: 200-850 nm Integration time: 1 ms – 65 seconds (20 seconds typical) Dynamic range: 8.5 x 10^7 (system); 1300:1 for a single acquisition Signal-to-noise ratio: 250:1 (full signal) Dark noise: 50 RMS counts Grating: 2 (250 – 800 nm) Slit: SLIT-50 Detector collection lens: L2 Order-sorting: OFLV-200-850 Optical resolution: ~2.0 nm FWHM Stray light: <0.05% at 600 nm; <0.10% at 435 nm Fiber optic connector: SMA 905 to 0.22 numerical aperture single-strand fiber |
| High-Power LED Driver | Minhongshi, China | MHS-48XY | Working voltage: DC12V Central wavelength: 850nm |
| high-resolution web camera | Thorlabs, USA | MWWHL4 | Color: Warm White Correlated Color Temperature: 3000 K Test Current for Typical LED Power: 1000 mA Maximum Current (CW): 1000 mA Bandwidth (FWHM): N/A Electrical Power: 3000 mW Viewing Angle (Full Angle): 120? Emitter Size: 1 mm x 1 mm Typical Lifetime: >50 000 h Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C Storage Temperature: -40 to 70 °C Risk Groupa: RG1 – Low Risk Group |
| LED Warm White | Mega-9, China | BP850/22K | Ø25.4(+0~-0.1) mm Bandwidth: 22±3nm Peak transmittance:80% Central wavelength: 850nm±3nm |
| Spectrometer | Noel Danjou | Amcap9.22 | AMCap is a still and video capture application with advanced preview and recording features. It is a Desktop application designed for computers running Windows 7 SP1 or later. Most Video-for-Windowsand DirectShow-compatible devices are supported whether they are cheap webcams or advanced video capture cards. |
| Standard photodiode power sensor | Super Dragon, China | YGY-122000 | Input: AC 100-240V~50/60Hz 0.8A Output: DC 12V 2A |
| Thermal power sensor | Thorlabs, USA | M470L3-C1 | Color: Blue Nominal Wavelengtha: 470 nm Bandwidth (FWHM): 25 nm Maximum Current (CW): 1000 mA Forward Voltage: 3.2 V Electrical Power (Max): 3200 mW Emitter Size: 1 mm x 1 mm Typical Lifetime: 100 000 h Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C Storage Temperature: -40 to 70 °C Risk Groupb: RG2 – Moderate Risk Group |
| Thermal power sensor | Thorlabs, USA | S401C | Wavelength range: 190 nm-20 μm Optical power range:10 μW-1 W(3 Wb) Input aperture size: Ø10 mm Active detector area: 10 mm x 10 mm Max optical power density: 500 W/cm2 (Avg.) Linearity: ±0.5% |
References
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