Tekening Bloed van Ratten via de v. saphena en door Cardiac punctie
Summary
Het bloed trekt nodig zijn in een groot aantal studies, bijvoorbeeld om de farmacokinetiek profiel van een verbinding studie. Hier laten we zien hoe om bloed te trekken uit ratten met behulp van twee technieken: het bloed te trekken uit de vena ader of door het hart doorboren.
Abstract
Tekening bloed van knaagdieren is noodzakelijk voor een groot aantal zowel in vitro als in vivo studies. Sites van het bloed trekt talrijk zijn in knaagdieren: retro-orbitale sinus, halsader, kaak ader, vene, hart. Elke techniek heeft zijn voor-en nadelen, en sommige zijn niet goedgekeurd niet meer in sommige landen (bijvoorbeeld retro-orbitale trekt in Nederland). Een bespreking van verschillende technieken voor het tekenen van het bloed zijn verkrijgbaar 1-3. Hier presenteren we twee technieken voor het tekenen van bloed van ratten, elk met hun specifieke toepassingen.
Bloed trekken uit de vena ader, mits het goed wordt gedaan, induceert minimale leed bij dieren en vereist geen verdoving. Deze techniek maakt herhaalde trekt van kleine hoeveelheden bloed, zoals nodig is voor farmacokinetisch onderzoek 4,5, het bepalen van plasma chemie, of het bloedbeeld 6.
Cardiale punctie staat de inzameling van grote hoeveelheden bloed van een enkel dier (tot 10 ml bloed kunnen worden getrokken uit een 150 g rat). Deze techniek is daarom erg nuttig als een terminal procedure bij het opstellen bloed uit de vena zou niet een voldoende grote steekproef. We maken gebruik van cardiale lekke band toen we nodig hebben voldoende hoeveelheden van serum van een specifieke stam van ratten aan T-lymfocyten lijnen groeien in vitro 4-9.
Protocol
Discussion
Tekening bloed uit de vene is een handige manier om kleine hoeveelheden bloed te krijgen zonder verdoving. Als herhaald bemonstering noodzakelijk is, controleer regelgeving om ervoor te zorgen u niet al te veel bloed trekken uit een rat.
Tekening bloed door hart-prik is een handige manier om grote hoeveelheden bloed te krijgen, maar dit is een terminal procedure. Het dier moet worden gedood aan het einde van het bloed te trekken.
Deze technieken (zoals alle technieken op levende dieren) moet eerst worden gedaan in de aanwezi…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Needle 20G 1/2 | Tool | Becton Dickinson | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | Becton Dickinson | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher | 14-826-12 | For cardiac puncture |
References
- Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
- Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
- Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).
- Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).
- Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).
- Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).
- Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. , 936-944 (2001).
- Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport. , 317-320 (2003).
- Beeton, C., Chandy, K. G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats. Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).
