Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque
Summary
Prélèvements sanguins sont nécessaires dans un grand nombre d'études, par exemple pour étudier le profil pharmacocinétique d'un composé. Ici, nous montrons comment prélever du sang de rats en utilisant deux techniques: prélever du sang de la veine saphène ou par ponction cardiaque.
Abstract
Dessin de sang de rongeurs est nécessaire pour un grand nombre de fois in vitro et in vivo. Sites de prélèvements sanguins sont nombreux chez les rongeurs: le cœur du sinus rétro-orbitaires, la veine jugulaire, veine maxillaire, la veine saphène,. Chaque technique a ses avantages et ses inconvénients, et certains ne sont pas approuvés plus dans certains pays (par exemple, rétro-orbitaires dessine en Hollande). Une discussion sur les différentes techniques de dessin sont disponibles sanguins 1-3. Ici, nous présentons deux techniques pour prélever du sang à partir de rats, chacun avec ses applications spécifiques.
Prélever du sang de la veine saphène, à condition qu'il soit fait correctement, induit une détresse minimale chez les animaux et ne nécessite pas d'anesthésie. Cette technique permet des tirages répétés de petites quantités de sang, comme nécessaires pour les études pharmacocinétiques 4,5, la détermination de la chimie du plasma, ou numération globulaire 6.
Ponction cardiaque permet la collecte de grandes quantités de sang à partir d'un seul animal (jusqu'à 10 ml de sang peuvent être tirées d'un rat de 150 g). Cette technique est donc très utile en tant que procédure de terminal lors de l'élaboration de sang de la saphène ne serait pas de fournir un échantillon suffisamment grand. Nous utilisons ponction cardiaque quand nous avons besoin des quantités suffisantes de sérum provenant d'une souche spécifique de rats à croître T lymphocytes in vitro lignes 4-9.
Protocol
Discussion
Dessin de sang de la veine saphène est une façon pratique d'obtenir de petites quantités de sang, sans anesthésie. Si l'échantillonnage répété est nécessaire, consulter les règlements pour vous assurer de ne pas tirer trop de sang d'un rat.
Dessin de sang par ponction cardiaque est une façon pratique d'obtenir de grandes quantités de sang, mais c'est une procédure terminale. L'animal doit être euthanasié à l'issue du tirage au sort du sang.
Ces techniques (comme toutes les techniqu…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Needle 20G 1/2 | Tool | Becton Dickinson | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | Becton Dickinson | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher | 14-826-12 | For cardiac puncture |
References
- Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
- Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
- Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).
- Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).
- Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).
- Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).
- Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. , 936-944 (2001).
- Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport. , 317-320 (2003).
- Beeton, C., Chandy, K. G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats. Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).
