Summary

Desenho de sangue de ratos através da veia safena e por punção cardíaca

Published: August 23, 2007
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Summary

Coletas de sangue são necessários em um grande número de estudos, por exemplo, para estudar o perfil farmacocinético de um composto. Aqui, nós demonstrar como tirar sangue de ratos, utilizando duas técnicas: tirar sangue da veia safena ou por punção cardíaca.

Abstract

A retirada de sangue de roedores é necessário para um grande número de ambos in vitro e in vivo. Sites de sangue desenha são numerosos em roedores: coração retro-orbital do seio, veia jugular, veia maxilar, veia safena,. Cada técnica tem suas vantagens e desvantagens, e alguns não estão aprovados mais em alguns países (por exemplo, retro-orbital desenha na Holanda). Uma discussão sobre diferentes técnicas de desenho são de sangue 03/01 disponível. Aqui, apresentamos duas técnicas para a retirada de sangue de ratos, cada um com suas aplicações específicas.

Tirar sangue da veia safena, desde que seja feito corretamente, induz sofrimento mínima em animais e não requer anestesia. Esta técnica permite que chama repetidas de pequenas quantidades de sangue, tais como necessários para estudos farmacocinéticos 4,5, determinando plasma química, ou contagem de sangue 6.

Punção cardíaca permite a coleta de grandes quantidades de sangue de um único animal (até 10 ml de sangue pode ser extraída de um rato g 150). Esta técnica é, portanto, muito útil como um procedimento terminal, quando a retirada de sangue da safena não iria fornecer uma amostra suficientemente grande. Usamos punção cardíaca, quando precisamos de uma quantidade suficiente de soro de uma cepa específica de ratos para crescer linhas de linfócitos T in vitro 4-9.

Protocol

Desenho de sangue de ratos através da veia safena e por punção cardíaca Nota: Todos os procedimentos devem ser aprovados pelo seu cuidado instituto animal e comissão de uso. 1. Tirar sangue da veia safena Este procedimento é realizado sem anestesia e requer duas pessoas, uma que lida com o rato, e aquele que realiza o sorteio. Faça um cone de uma toalha ou mantenha o rato com luvas de manipulação de roedores, deixando um membro…

Discussion

Tirar sangue da veia safena é uma maneira conveniente de obter pequenas quantidades de sangue sem anestesia. Se a amostragem repetida é necessária, as regulamentações para garantir que você não tirar muito sangue de um rato.

A retirada de sangue por punção cardíaca é uma maneira conveniente de obter grandes quantidades de sangue, mas este é um procedimento terminal. O animal deve ser sacrificado no final da coleta de sangue.

Estas técnicas (como todas as técnicas em animais vivos) deve ser o primeiro feito na p…

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Needle 20G 1/2 Tool Becton Dickinson 305176 For puncturing the saphenous vein
Microvette 300 Tool Sarstedt 20.1308.100 To collect blood from the saphenous vein
Electric trimmer Tool Braintree CLP-32130  
Needle 23 G 1 Tool Becton Dickinson 305145 For cardiac puncture
5 ml plastic syringe, slip tip Tool Fisher 14-826-12 For cardiac puncture

References

  1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
  2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
  3. Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).
  4. Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).
  5. Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).
  6. Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).
  7. Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. , 936-944 (2001).
  8. Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport. , 317-320 (2003).
  9. Beeton, C., Chandy, K. G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats. Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).
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Cite This Article
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).

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