Summary
Her presenterer vi en protokoll for effektiv og rask elektroakupunktur (EA) hos mus eller unge rotter ved bruk av en tredimensjonal (3D) trykt holder. Denne teknikken tillater samtidig drift på flere dyr, noe som sparer tid og øker eksperimentell effektivitet.
Abstract
Elektroakupunktur (EA) er mye brukt til å behandle ulike helsemessige forhold. Den underliggende mekanismen for EA-behandling er imidlertid fortsatt uklar, noe som hindrer promoteringen. Den mekanistiske studien krever muse- eller rottemodeller for å løse dette problemet. Disse dyrene er imidlertid ikke lydige mot den eksperimentelle prosessen, noe som er tidkrevende. For å løse disse problemene designet vi en 3D-printet kroppsmassefiksering for små dyr for å forbedre effektiviteten til EAs dyreforsøk. Denne videoen viser i detalj hvordan du bruker fikseren til å utføre bulk EA på mus eller unge rotter. For valg av akupunkter ble fremre skrå linje av toppunkt temporal (MS6 hode) og Tianshu punkt (ST25 mage) valgt for å verifisere effekten av fikseringsanordningen med bukleie og liggende posisjonering. Ved å bruke den 3D-printede smådyrholderen kan flere gnagere immobiliseres og behandles samtidig, noe som reduserer tiden og ressursene som kreves for forsøket. Denne teknikken kan brukes på andre dyremodeller ved 3D-utskrift av forskjellige størrelser og kan potensielt brukes til forskjellige festeforhold. Enheten er gunstig for å fremme eksperimentell vitenskapelig forskning i EA.
Introduction
Elektroakupunktur (EA) terapi er en unik metode der akupunkturnåler settes inn i hodebunnen og kobles til en elektromaskin for å stimulere bestemte punkter1. I motsetning til manuell stimulering, tillater EA bedre kontroll over stimulering ved å stabilisere spesifikke frekvenser og bølgeformer for å oppnå optimale terapeutiske effekter2. Ifølge en undersøkelse bruker 81,2% av medisinske institusjoner i Kina EA eller manuell akupunktur for å behandle cerebral parese, neuralgi, facialisparese og andre forhold. Til tross for sin popularitet er den spesifikke mekanismen for effekt av EA fortsatt ukjent, noe som har hindret sin markedsføring og anvendelse i rehabiliteringsbehandling av nevrologiske sykdommer 1,2,3. Ytterligere forskning er nødvendig for å forstå mekanismen for EAs effektivitet og for å fremme bruken i rehabiliteringsbehandling av nevrologiske sykdommer.
Etter hvert som innflytelsen fra akupunktur utvides over hele verden, har mange studier allerede undersøkt mekanismene til EA utført på gnagermodeller, for eksempel rotte- eller musemodeller 1,2,3. Flere problemer oppstår ofte i EAs gnagereksperimenter. Den første er hvordan man immobiliserer gnagere uten anestesi, da akupunktur utført på våkne personer reflekterer mer klinisk praksis. I tillegg krever noen forsøk at dyrene er våkne for å observere behandlingseffekter 2,3. En annen utfordring er nøyaktig lokalisering av akupunktene hos mus eller rotter som tilsvarer de hos mennesker. Den nøyaktige lokaliseringen av akupunkter i eksperimentelle gnagere blir for tiden studert av mange lærde 4,5. I denne protokollen ble MS6 og ST25 valgt, som har blitt klart definert hos gnagere ved transformasjon av menneskelig anatomisk lokalisering. MS6 brukes ofte til behandling av noen hjernesykdommer, for eksempel Parkinsons sykdom6. ST25 brukes vanligvis til å behandle gastrointestinale problemer, som diaré7. Disse to akupunktene ble valgt primært for å demonstrere hvordan gnagere effektivt kan immobiliseres i både liggende og utsatte stillinger. Videre har disse akupunktene blitt grundig studert og gir betydelig innsikt for forskningsformål 6,7.
Den forrige metoden for å immobilisere en enkelt rotte for eksperimenter er ikke bare tidkrevende, men også vanskelig å håndtere av en enkelt person8. I tillegg, på grunn av manglende samarbeid mellom dyr, er suksessraten relativt lav i praksis. Derfor er det et kritisk behov for å lage en lett etablert dyremodell med stabile egenskaper for å forbedre eksperimenteffektiviteten. I denne artikkelen ble det introdusert en 3D-printet holder for små dyr som lett kunne immobilisere flere gnagere, noe som førte til motorbegrensning. Målet med denne artikkelen er å administrere EA-behandlinger til en gruppe unge rotter eller mus, med fokus på strategier for bulkbegrensning av mus, identifisering og stimulering av MS6 og ST25 akupunkter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Forsøkene i denne studien er i samsvar med "3Rs" -prinsippet om dyreetikk og er godkjent av Laboratory Animal Welfare and Ethnic Committee ved Army Medical University (AMUWEC20234543).
1. Forberedelse av gnagerkroppsfikseringsanordning
- Design en smådyrholder basert på det kinesiske bruksmodellpatentet9.
- Produser enheten gjennom 3D-utskriftsteknologi.
- Forbered et 2 m langt tau og del det i 6 tau. Tre disse 6 tauene gjennom hullene i festeanordningen. Bruk den fjærbelastede spennen til å feste tauendene, noe som letter justering av sløyfestørrelsen.
MERK: Fiksatoren kan produseres av ethvert selskap utstyrt med 3D-utskriftsteknologi basert på en designtegning. Designtegningen av enheten er vist i figur 1. Fiksatoren som ble brukt i denne studien ble produsert av en 3D-skriver ved en utskriftsmetode kalt fused deposition modeling (FDM), også kjent som fused filament fabrication (FFF) 10. Denne additive produksjonsmetoden skriver ut delene av designlaget lag for lag ved selektivt å deponere materialet i smeltet form i en forhåndsbestemt bane. Prosessen bruker termoplastiske polymerer som kommer i filamenter for å skape den endelige fysiske strukturen. Immobiliseringsapparatet som brukes i denne studien kan sikre tre dyr samtidig, noe som krever seks tau, med hvert dyr som krever et par tau: en for nakken og en for stammen.
2. Forberedelse av gnagere
- Kjøp 3 Sprague-Dawley-rotter (10-40 g, 7-45 dager gamle) og 3 C57 BL/C-mus (5-40 g).
- Oppdrett dyr i et rom med en 12 timers dag/natt syklus, en omgivelsestemperatur på 21-23 ° C, og en fuktighet på 45% -60%. Desinfiser og ventiler fôringsmiljøet regelmessig, og la dyrene spise og drikke fritt.
3. Feste gnagere til fikseren (utsatt stilling)
- Plasser gnagerens hode i det U-formede hullet foran fikseringsenheten, med gnageren i utsatt stilling. Pass gnagerens kropp gjennom to tauløkker.
- Fest tauene rundt halsen og magen til gnageren, slik at den ikke kan unnslippe, men ikke så tett at det forårsaker åndedrettsstress og død.
- Det viktigste trinnet er å fikse nakken på plass. Legg igjen et gap på 2-5 mm mellom gnagerens nakke og tauet. Pass på at tauet ikke er for stramt til at dyrene kan kvele eller for løst til å unnslippe.
- Fest de andre gnagere på samme måte i enheten.
- Gjenta fikseringstrinnene ovenfor (3.1-3.2) i 3 dager for å minimere potensiell stressrespons forårsaket av fikseringsprosedyren. Gjenta fikseringsprosedyren i 3 påfølgende dager, med hver økt som varer 5 min per dag.
MERK: For å sikre at gnagere ikke ble overbelastet under fikseringsprosedyren, gjentok vi prosedyren i 3 påfølgende dager. Hver økt varte i 5 minutter per dag, noe som gir god tid for mus eller rotter til å akklimatisere seg til prosedyren og minimere potensielt ubehag. - Strat EA fra dag 4.
- For å forhindre spredning av sykdom, senk en steril bomullspinne eller ball i 75% alkohol og tørk holderen grundig for å rengjøre og desinfisere den før og etter hver bruk. Bruk hansker og annet verneutstyr for å unngå potensiell helserisiko ved håndtering av gnagere.
4. Utføre EA på mus eller unge rotter (MS6)
- Velg 0,25 mm x 13 mm sterile engangs akupunkturnåler.
- Finn akupunktene etter anatomisk plassering og bekreft innsettingsdybden ved akupunktet.
MERK: MS6 er plassert på siden av hodet. Denne regionen i hodet passerer gjennom forbindelsen mellom Shencong (Ex-hn1) og Xuanli (GB6), også kjent som den fremre parietalen (Du21). MS6 tilsvarer uttrykket av den presentrale gyrus i hjernebarken i hodebunnen. Ex-hn1 ligger 0,5 cm bak midtpunktet på den fremre-bakre midtlinjen av hodet. GB6 er plassert på midtpunktet på forsiden av øret og øyets endevinkel. Den øvre supratrochleære nerven, supraorbital nerve, occipital nerve og auriculotemporal nerve er fordelt i den. MS6 brukes hovedsakelig til å behandle hjerneslag og encefalopati, for eksempel motoriske lidelser. - Vri sakte og sett sterile nåler bilateralt inn i MS6 på en dybde på 3/5 fra fremre Shenchong (Exhn1) til Xuanli (GB6) langs subkutan i henholdsvis 3 gnagere.
- Koble den ene siden av tilkoblingskabelen til EA-instrumentet.
- Koble en annen side av tilkoblingskabelen som inneholder de positive og negative EA-klemmene til akupunkturnåleskaftene på venstre og høyre MS6.
- Slå på EA-instrumentet.
- Drei knappen (Funksjon/ Velg bryter) for å stille inn frekvens- og funksjonsmodus.
- Sett frekvensen til 10 Hz og velg en kontinuerlig bølgemodus .
- Drei den tilsvarende knappen (Juster intensitet) for å stille inn intensiteten. Hver juster intensitetsknapp styrer strømstyrken til gnagere av ledningen som er koblet under den. Juster strømintensiteten til det akseptable spekteret av gnagere, vanligvis 1-2 mA, som varer 5 minutter.
MERK: Det er viktig å overvåke pusten og oppførselen til gnagere under prosedyren for å sikre at de ikke opplever ubehag eller ubehag. Hvis rotta ser ut til å slite eller har smerter, bør prosedyren stoppes umiddelbart.
5. Feste gnagere til fikseren (liggende stilling)
- Plasser hodene til gnageren i det U-formede hullet foran fikseringsenheten, med gnageren i utsatt stilling. Pass gnagerens kropp gjennom to tauløkker.
- Fest tauet rundt halsen og magen til gnageren, slik at den ikke kan unnslippe, men ikke så stramt at det forårsaker åndedrettsstress og død.
MERK: Punktene som skal noteres under fiksering er de samme som i trinn 3.2. - Fest de andre gnagere på samme måte.
- Som i trinn 3.4, gjenta fikseringstrinnene ovenfor i 3 dager for å redusere stressresponsen til gnagere.
- Strat EA fra dag 4.
MERK: Desinfeksjon utføres som nevnt i trinn 3.6.
6. Utføre EA (ST25)
- Velg 0,25 mm x 13 mm sterile engangs akupunkturnåler.
- Finn akupunktene etter anatomisk plassering og bekreft innsettingsdybden ved akupunktet.
MERK: ST25 ligger på navlestrengen. Plassering av dette punktet i gnagere krever først måling av lengden på gnagerens pote. ST25 ligger på 2/3 lengden av poten ved siden av navlen. For eksempel, hvis gnagerens målte pote er 0,6 cm, ligger ST25 0,4 cm til høyre og venstre for navlen. - Vri sakte og penetrer sterile nåler inn i ST25 bilaterale på en dybde på henholdsvis 4-8 mm på 3 gnagere.
- Koble den ene siden av tilkoblingskabelen til EA-instrumentet.
- Koble en annen side av tilkoblingskabelen som inneholder de positive og negative EA-klemmene til akupunkturnåleskaftene på venstre og høyre ST25.
- Slå på EA-instrumentet.
- Drei knappen (Funksjon/ Velg bryter) for å stille inn frekvens- og funksjonsmodus.
- Sett frekvensen til 10 Hz og velg kontinuerlig bølgemodus.
- Drei den tilsvarende knappen (Juster intensitet) for å stille inn intensiteten. Hver justeringsintensitetsknapp kontrollerer strømstyrken til rotta på ledningen som er koblet under den. Juster strømintensiteten til det akseptable spekteret av gnagere, vanligvis 1-2 mA, som varer 5 minutter.
MERK: Observasjonene var de samme som i trinn 4.6.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Plantegningen av dyrekroppsfikseren vi designet er vist i figur 1. I tillegg ble det sendt inn en 3D-grafikkmodell av denne fikseren for å gi en helhetlig oversikt over designet (tilleggsfil 1). Dette er en enhet som gjør at 3 gnagere kan immobiliseres og utføre EA samtidig. Rotter og mus var begrenset til fiksatoren i våken tilstand, og både mageleie og ryggleie kunne festes godt uten å forårsake skade på gnagere (figur 2 og figur 3). Ved hjelp av fikseren ble akupunktene MS6 og ST25 lokalisert og nålet hos gnagere (figur 4 og figur 5).
For å kontrollere variabler og validere effektiviteten av denne fikseringsmetoden, immobiliserte en eksperimentør 3 rotter (Video 1) eller 3 mus i tre påfølgende studier i en komparativ studie (tabell 1). Funnet viste at gjennomsnittlig tid for immobilisering av 3 rotter i mageleie og liggende stillinger ved bruk av dette verktøyet var henholdsvis 77,1 s ± 7,8 s og 74,9 s ± 8,6 s (gjennomsnittlig ± SD). Når det gjelder 3 mus, var gjennomsnittlig immobiliseringstid i utsatt og liggende stilling ved bruk av denne fiksatoren henholdsvis 72,0 s ± 10,5 s og 62,3 ± 4,2 s (gjennomsnittlig ± SD). Begge gruppene av rotter og mus ble vellykket immobilisert på enheten og unnslapp ikke under den 5 minutter lange EA-behandlingen (figur 2 og figur 3). Ved 1-2 mA EA-intensitet følte mus og rotter seg komfortable og kjempet ikke voldsomt. Respirasjonen hos mus og rotter var stabil, og det var ingen plutselige dødsfall hos dyr. Etter behandling forblir musene og rottene sunne og overlevde.
Figur 1. Batch gnager fiksator planløsning. (1) Gnagere holder enhet, delt inn i tre deler. (2,3) Søyler: brukes til å fikse lemmene til mus eller unge rotter. (4) Cave: brukes til å fikse hodet. (5) Hull: brukes til å fikse nakken til de unge rottene. (6) Hull: brukes til å fikse kroppen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Faste unge rotter i mageleie og liggende stillinger. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (VG Nett) EA-behandling på ST25 acupoint. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Faste mus i mageleie og ryggleie. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (VG Nett) EA-behandling på ST25 acupoint. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: MS6 i hjerneregionen. MS6 er plassert på den laterale siden av hodet og er plassert ved tilkoblingspunktet mellom Shencong (Ex-hn1) og Xuanli (GB6), som også er kjent som den fremre parietale (Du21) regionen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5: ST25 bilateralt punkt i rødt. ST25 ligger på nivået av navlen. Plassering av dette punktet i gnager krever først måling av lengden på gnagerens pote. ST25 ligger på 2/3 lengden av poten ved siden av navlen. For eksempel, hvis gnagerens målpote er 0,6 cm, er ST25 0,4 til høyre og venstre for navlen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| Prøvelser | Rotter | Mus | ||
| Mageleie | Liggende stilling | Mageleie | Liggende stilling | |
| (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | |
| Prøve 1 | 75.5 | 65.1 | 60.2 | 62.3 |
| Rettssak 2 | 70.2 | 80.3 | 80.1 | 70.6 |
| Rettssak 3 | 85.5 | 79.5 | 75.7 | 65.9 |
| Gjennomsnittlig tid (gjennomsnittlig ± SD) | 77,1 ± 7,8 | 74,9 ± 8,6 | 72,0 ± 10,5 | 62,3 ± 4,2 |
Tabell 1: Tid brukt på fiksering av rotter og mus med mageleie og ryggleie. Dataene (tid i sekunder) ble oppnådd av en eksperimentør som immobiliserte henholdsvis 3 rotter og 3 mus i 3 påfølgende forsøk. Gjennomsnittlig nødvendig tid ble bestemt ved å beregne gjennomsnittet og standardavviket for tiden det tok for de 3 studiene.
Tilleggsfil 1: 3D-trykt designfil for badegnagere. Denne 3D-modellen kan dras for å oppnå en full 360 ° visning av designet. Klikk her for å laste ned denne filen.
Video 1: Film av utsatt og liggende posisjonsfiksering av unge SD-rotter, som beskrevet i detalj i figur 2-legenden . Denne videoen demonstrerer en eksperimentør som holder 3 rotter i både liggende og utsatte stillinger. Vennligst klikk her for å laste ned denne videoen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Elektroakupunktur (EA) er en form for akupunktur som innebærer bruk av elektrisk stimulering på akupunkturnåler11. Denne teknikken innebærer bruk av mikropulsstrømmer med spesifikk intensitet og frekvens for å stimulere akupunkturpunkter og oppnå forbedrede terapeutiske effekter3. Imidlertid er mekanismen til EA for helbredelse begrenset og krever omfattende grunnleggende forskning for å bevise 1,2,3. Gnagermodeller brukes ofte i grunnleggende EA-studier 8,12,13, og vi tar sikte på å gi en rask og effektiv metode for å utføre disse forsøkene på rotter og mus.
For tiden står EA-eksperimentet overfor mange utfordringer. Den primære utfordringen er å effektivt immobilisere gnagere uten anestesi. Stabil immobilisering av dyr er avgjørende og har stor betydning for utfallet av dyreforsøket. Ellers er de fysiologiske funksjonene til bedøvede dyr forskjellige fra de våkne dyrene, og klinisk akupunkturbehandling utføres alltid på våkne pasienter. Derfor er eksperimentelle studier med våkne dyr mer praktiske for kliniske formål. Tidligere var immobilisering med en fikseringsplate den foretrukne metoden, men det var tidkrevende og tillot bare drift av en enkelt gnager14. Tradisjonelle startsperrer krevde også å binde opp gnagerens lemmer, noe som var en tidkrevende prosess og ofte resulterte i smerte på grunn av den tette festingen. Flere studier har implementert tape for mus, men deres evne til lett å unnslippe utgjør betydelige utfordringer, spesielt under akupunkturprosedyrer8. Når det er flere eksperimentelle, er det ofte nødvendig med batchoperasjon for å spare tid og krefter2. Derfor har vi utviklet en 3D-printet smådyrkroppsfikseringsfiksator som gir flere fordeler i forhold til tradisjonelle fikseringsmetoder15: 1) det forkorter fikseringstiden, og forbedrer den eksperimentelle effektiviteten16; 2) det er enkelt og lett å bruke og påvirkes ikke av subjektive faktorer15,16; 3) Det førte mindre skadelig for gnagere; 4) Når EA-operasjonen er fastsatt, kan den utføres på flere unge rotter samtidig, noe som sparer tid og tillater samtidig observasjon av behandlingsresultater.
Bruken av 3D-utskriftsteknologi for eksperimentelle studier av EA er en verdifull utvidelse innen akupunkturforskning. Enheten kan justeres til hvilken som helst størrelse når den 3D-skrives ut, noe som bidrar til at eksperimentell akupunktur utføres mer effektivt. Fused deposition modeling (FDM), også kjent som fused filament fabrication (FFF), en additiv produksjonsmetode10, brukes til 3D-utskrift av fiksatoren. Denne enheten er ikke bare egnet for dette eksperimentet, men også for å utføre eksperimenter som CT eller MR på gnagere 17,18. I tillegg kan den også brukes i enhver situasjon der bulkfiksering er nødvendig, bortsett fra EA-studier. På grunn av utbredelsen av 3D-utskriftsteknologi er denne enheten lett tilgjengelig. Det kan gjøres gjennom en lokal 3D-utskriftsprodusent. Videre kan denne festeanordningen modifiseres og tilpasses basert på designtegningen. I denne studien består festeanordningen av tre seksjoner, hver i stand til å fikse en enkelt gnager. Hvis flere gnagere eller andre dyr må inkluderes, kan enheten skaleres proporsjonalt for å imøtekomme det større antallet. For eksempel kan den utformes som en enhet som kan fikse 5 mus eller til og med som en festeanordning for andre dyr som kaniner.
En annen utfordring er å finne akupunkter hos gnagere som tilsvarer mennesker. MS6 og ST25 akupunkter ble valgt for å undersøke effekten av utsatt og liggende fiksasjon. Videre har disse to akupunktene blitt studert av mange lærde 6,7,19. MS6 brukes oftest i hjernesykdomsforskning, som Parkinsons sykdom, dysfunksjon etter hjerneslag, etc 6,13,19. MS6 kan forbedre den nevrologiske funksjonen til rotter som lider av iskemisk slag via modulering av JAK / STAT-signalveien som er mediert av IL-12 i en tidligere studie13. ST25 brukes vanligvis til behandling av mage-tarmkanalen, som diaré og irritabel tarmsyndrom (IBS)7,12. En tidligere studie har rapportert at EA anvendt utelukkende på ST25-punktet viste potensialet til å lindre visceral overfølsomhet samtidig som normal langsombølgefrekvens og kolonrytme gjenopprettes hos IBS-rotter12. Disse to akupunktene er også i stand til å demonstrere effekten av liggende og utsatt posisjonering hos gnagere. Også disse to akupunktene har betydningen av visning 6,7,19. Siden disse to akupunktene har blitt studert av mange lærde, gir vi en protokoll om hvordan du finner disse to akupunktene hos gnagere. Det er nyttig for dyreforsøk der MS6- og ST25-studier blir utført. Den nåværende studien har imidlertid noen begrensninger. For eksempel kan ikke nålens posisjon og innstikksdybde måles objektivt og kan variere avhengig av operatørens erfaringsnivå.
Våre eksperimenter overholder "3Rs" -prinsippet om dyreetikk og er godkjent av Laboratory Animal Welfare and Ethnic Committee ved Army Medical University. Det mest utfordrende og avgjørende trinnet i dette eksperimentet er å finne en pålitelig og effektiv metode for å immobilisere gnagere på en sikker måte. Dette skyldes at ethvert forsøk på å rømme eller dø av gnagere under 5-minutters EA-stimulering vil resultere i at eksperimentet mislykkes. Utformingen av den fremre hulen utnytter gnagernes preferanse for å grave hull. Å plassere gnagernes hode inne i hulen er ment å gi psykologisk komfort. Videre bør tauene som brukes til å feste hodet og kroppen til gnagere være moderat sikre, og forblir verken overdrevent slakk eller overtight for å unngå rømning av gnageren og forhindre åndedrettsstress. Etter elektrisk stimulering ble gnagernes oppførsel og respons nøye overvåket. Ideelt sett, når du bruker en strøm på 1-2 mA, ville gnagere ikke vise aggressiv kamp eller vokaliseringer som svar på elektrisk støt20. Fikseren kan også brukes til å fikse gnagere i ligge, utsatte stillinger og andre typer fikseringer etter behov. Den er egnet for en rekke eksperimentelle behov, og fikseringsoperasjonen er enkel å utføre21. Dette har imidlertid ført til en begrensning om at dyr av varierende størrelse krever skreddersydd immobiliseringsutstyr av varierende størrelse. Bare dyr med små størrelsesavvik kan holdes tilbake ved hjelp av samme enhet. Batchimmobiliseringsfikseren som brukes i denne protokollen, immobiliserer effektivt og pålitelig gnagere innenfor vektområdet 10-40 g. For dyr utenfor dette vektområdet, er det nødvendig med tilpassede batchimmobiliseringsfiksatorer som passer til deres spesifikke krav.
I tillegg gir den 3D-printede batch-gnagerfikseringen som brukes til EA-bulkoperasjoner på gnagere, forbedret sikkerhet, da den er motstandsdyktig mot gnagerriper og bitt. Studier av EA på gnagere har gitt verdifull innsikt i de potensielle fordelene med denne terapeutiske modaliteten hos mennesker 1,2,3,6,7,11,14. Enheten er gunstig for å fremme eksperimentell vitenskapelig forskning i EA. Denne teknikken tillater forskere å gjennomføre dyreforsøk som krever immobilisering av dyr. Videre presenterer den den nøyaktige plasseringen av ST25 og MS6, som kan tjene som referanse for de som studerer disse to akupunktene i fremtiden. Til syvende og sist forventes denne metodikken å føre til verdifulle dyremodeller for EA-forskning.
Den 3D-printede batchmusfikseren beskrevet i denne artikkelen tilbyr en enkel og effektiv metode for å utføre EA-eksperimenter på rotter eller mus. Dens design vurderer komforten og sikkerheten til dyrene, samt behovet for rask og effektiv fiksering. Denne enheten har potensial til å spare tid og krefter på å gjennomføre dyreforsøk, fremme fremme av elektroakupunkturforskning og til slutt føre til bedre behandlinger for ulike sykdommer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne erklærte at ingen konkurrerende interessekonflikter eksisterer.
Acknowledgments
Takk til Institutt for nevrokirurgi ved Second Affiliated Hospital of Army Medical University for støtte på stedet. Finansiering: Dette arbeidet ble støttet av Natural Science Foundation of China (82104696).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3D printing batch mice fixator | MESH INVENT | Custom made | The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF). |
| Electroacupuncture instrument | Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory | SDZ-III | www.Hwato-med.com |
| Disposable sterile acupuncture needle | Suzhou Medical Appliance Factory | N/A | 0.25 mm x 13 mm |
References
- Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
- Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
- Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
- Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
- Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
- Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson's disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
- Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
- Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
- A fixing device for mice body. China Patent. Zhifeng, W. , 202220586749 (2023).
- Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
- Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
- Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
- Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
- Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
- Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer's disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
- Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
- Gozzi, A., Zerbi, V.
- Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I.
- Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
- Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
- Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).
