Summary
Aquí, presentamos un protocolo para la electroacupuntura (EA) eficiente y rápida en ratones o ratas jóvenes utilizando un soporte impreso tridimensional (3D). Esta técnica permite la operación simultánea en múltiples animales, ahorrando tiempo y aumentando la eficiencia experimental.
Abstract
La electroacupuntura (EA) se usa ampliamente para tratar diversas afecciones de salud. Sin embargo, el mecanismo subyacente del tratamiento con EA sigue sin estar claro, lo que dificulta su promoción. El estudio mecanicista requiere modelos de ratón o rata para abordar este problema. Sin embargo, estos animales no son obedientes al proceso experimental, que lleva mucho tiempo. Para resolver estos problemas, diseñamos un fijador de masa corporal de animales pequeños impreso en 3D para mejorar la eficiencia de los experimentos con animales de EA. Este video muestra en detalle cómo usar el fijador para realizar EA a granel en ratones o ratas jóvenes. Para la selección de los puntos de acupuntura, se eligieron la línea oblicua anterior del vértice temporal (cabeza MS6) y el punto Tianshu (vientre ST25) para verificar el efecto del dispositivo de fijación con el posicionamiento en decúbito prono y en decúbito supino. El uso del soporte para animales pequeños impreso en 3D permite inmovilizar y tratar simultáneamente a varios roedores, lo que reduce el tiempo y los recursos necesarios para el experimento. Esta técnica podría aplicarse a otros modelos animales mediante la impresión 3D de diferentes tamaños y podría utilizarse para diversas condiciones de fijación. El dispositivo es beneficioso para la promoción de la investigación científica experimental en EA.
Introduction
La terapia de electroacupuntura (EA) es un método único en el que se insertan agujas de acupuntura en el cuero cabelludo y se conectan a una máquina eléctrica paraestimular puntos específicos. A diferencia de la estimulación manual, la EA permite un mejor control de la estimulación mediante la estabilización de frecuencias y formas de onda específicas para lograr efectos terapéuticos óptimos2. Según una encuesta, el 81,2% de las instituciones médicas en China utilizan la EA o acupuntura manual para tratar la parálisis cerebral, la neuralgia, la parálisis facial y otras afecciones. A pesar de su popularidad, aún se desconoce el mecanismo específico de eficacia de la EA, lo que ha dificultado su promoción y aplicación en el tratamiento rehabilitador de enfermedades neurológicas 1,2,3. Se necesita más investigación para comprender completamente el mecanismo de la efectividad de la EA y promover su uso en el tratamiento de rehabilitación de enfermedades neurológicas.
A medida que la influencia de la acupuntura se expande en todo el mundo, muchos estudios ya han investigado los mecanismos de la EA realizados en modelos de roedores, como modelos de ratas o ratones 1,2,3. A menudo se encuentran varios problemas en los experimentos con roedores de EA. La primera es cómo inmovilizar roedores sin anestesia, ya que la acupuntura realizada en sujetos despiertos refleja más la práctica clínica. Además, algunos experimentos requieren que los animales estén despiertos para observar los efectos del tratamiento 2,3. Otro desafío es localizar con precisión los puntos de acupuntura en ratones o ratas que corresponden a los de los humanos. La localización precisa de los puntos de acupuntura en roedores experimentales está siendo estudiada actualmente por muchos estudiosos 4,5. En este protocolo se seleccionaron MS6 y ST25, las cuales han sido claramente definidas en roedores por la transformación de la localización anatómica humana. La MS6 se usa comúnmente para el tratamiento de algunas enfermedades cerebrales, como la enfermedad de Parkinson6. ST25 se utiliza generalmente para tratar problemas gastrointestinales, como la diarrea7. Estos dos puntos de acupuntura se eligieron principalmente para demostrar cómo los roedores pueden inmovilizarse de manera efectiva tanto en decúbito supino como en decúbito prono. Además, estos puntos de acupuntura han sido ampliamente estudiados y ofrecen información significativa para fines de investigación 6,7.
El método anterior de inmovilizar a una sola rata para experimentos no solo requiere mucho tiempo, sino que también es difícil de manejar por una sola persona8. Además, debido a la falta de cooperación de los animales, la tasa de éxito es relativamente baja en la práctica. Por lo tanto, existe una necesidad crítica de crear un modelo animal fácilmente establecido con características estables para mejorar la eficiencia del experimento. En este artículo, se introdujo un soporte impreso en 3D para animales pequeños que podría inmovilizar fácilmente a varios roedores, lo que provocaría una restricción motora. El objetivo de este trabajo es administrar tratamientos de EA a un lote de ratas o ratones jóvenes, centrándose en las estrategias para la restricción masiva de ratones, la identificación y la estimulación de los puntos de acupuntura MS6 y ST25.
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Protocol
Los experimentos de este estudio cumplen con el principio de las "3R" de ética animal y han sido aprobados por el Comité Étnico y de Bienestar de Animales de Laboratorio de la Universidad Médica del Ejército (AMUWEC20234543).
1. Preparación del dispositivo de fijación del cuerpo del roedor
- Diseñe un soporte para animales pequeños basado en la patente de modelo de utilidad chino9.
- Producir el dispositivo a través de la tecnología de impresión 3D.
- Prepara una cuerda de 2 m de largo y divídela en 6 cuerdas. Pasa estas 6 cuerdas a través de los agujeros del fijador. Utilice la hebilla accionada por resorte para sujetar los extremos de la cuerda, lo que facilita el ajuste del tamaño del lazo.
NOTA: El fijador puede ser fabricado por cualquier empresa equipada con tecnología de impresión 3D basada en un dibujo de diseño. El dibujo de diseño del dispositivo se muestra en la Figura 1. El fijador utilizado en este estudio fue producido por una impresora 3D mediante un método de impresión llamado modelado por deposición fundida (FDM), también conocido como fabricación de filamentos fundidos (FFF)10. Este método de fabricación aditiva imprime las partes del diseño capa por capa depositando selectivamente el material en la forma fundida en una ruta predeterminada. El proceso utiliza polímeros termoplásticos que vienen en filamentos para crear la estructura física final. El aparato de inmovilización utilizado en este estudio puede asegurar tres animales simultáneamente, lo que requiere seis cuerdas, y cada animal requiere un par de cuerdas: una para el cuello y otra para el tronco.
2. Preparación de roedores
- Compra 3 ratas Sprague-Dawley (10-40 g, 7-45 días de edad) y 3 ratones C57 BL/C (5-40 g).
- Cría animales en una habitación con un ciclo día/noche de 12 h, una temperatura ambiente de 21-23 °C y una humedad del 45%-60%. Desinfecte y ventile el entorno de alimentación con regularidad y permita que los animales coman y beban libremente.
3. Fijación de roedores al fijador (posición prona)
- Coloque la cabeza del roedor en el orificio en forma de U frente al fijador, con el roedor en posición prona. Pasa el cuerpo del roedor a través de dos bucles de cuerda.
- Sujete las cuerdas alrededor del cuello y el abdomen del roedor, asegurándose de que no pueda escapar, pero no tan apretadas como para causar dificultad respiratoria y la muerte.
- El paso clave es fijar el cuello en su lugar. Deja un espacio de 2-5 mm entre el cuello del roedor y la cuerda. Asegúrese de que la cuerda no esté demasiado apretada para que los animales se estrangulen o demasiado floja para escapar.
- Fije los otros roedores de la misma manera en el dispositivo.
- Repita los pasos de fijación anteriores (3.1-3.2) durante 3 días para minimizar la posible respuesta de estrés causada por el procedimiento de fijación. Repita el procedimiento de fijación durante 3 días consecutivos, con una duración de 5 minutos por día cada sesión.
NOTA: Para asegurarnos de que los roedores no estuvieran sobrecargados durante el procedimiento de fijación, repetimos el procedimiento durante 3 días consecutivos. Cada sesión duró 5 minutos por día, lo que proporcionó tiempo suficiente para que los ratones o ratas se aclimataran al procedimiento y minimizaron cualquier posible molestia. - Strat EA desde el día 4.
- Para evitar la propagación de enfermedades, sumerja un hisopo o una bola de algodón estéril en alcohol al 75% y limpie bien el soporte para limpiarlo y desinfectarlo antes y después de cada uso. Use guantes y otros equipos de protección para evitar posibles riesgos para la salud al manipular roedores.
4. Realización de EA en ratones o ratas jóvenes (MS6)
- Elija agujas de acupuntura estériles desechables de 0,25 mm x 13 mm.
- Encuentre los puntos de acupuntura por ubicación anatómica y confirme la profundidad de inserción en el punto de acupuntura.
NOTA: MS6 se encuentra en el lado lateral de la cabeza. Esta región de la cabeza pasa a través de la conexión entre Shencong (Ex-hn1) y Xuanli (GB6), también conocida como parietal anterior (Du21). MS6 corresponde a la expresión de la circunvolución precentral de la corteza cerebral en el cuero cabelludo. Ex-hn1 se encuentra 0,5 cm detrás del punto medio de la línea media anteroposterior de la cabeza. GB6 se encuentra en el punto medio de la parte frontal de la oreja y en el ángulo final del ojo. En él se distribuyen el nervio supratroclear superior, el nervio supraorbitario, el nervio occipital y el nervio auriculotemporal. La MS6 se utiliza principalmente para tratar accidentes cerebrovasculares y encefalopatías, como trastornos motores. - Gire lentamente e inserte agujas estériles bilaterales en MS6 a una profundidad de 3/5 desde el Shenchong anterior (Exhn1) hasta el Xuanli (GB6) a lo largo del subcutáneo en 3 roedores, respectivamente.
- Conecte un lado del cable de conexión al instrumento EA.
- Conecte otro lado del cable de conexión que contiene los clips EA positivo y negativo a los vástagos de la aguja de acupuntura en el MS6 izquierdo y derecho.
- Encienda el instrumento EA.
- Gire el botón (Función/Elegir interruptor) para ajustar la frecuencia y el modo de función.
- Establezca la frecuencia en 10 Hz y elija un modo de onda continua .
- Gire el botón correspondiente (Ajustar intensidad) para establecer la intensidad. Cada botón de ajuste de intensidad controla la intensidad de la corriente de los roedores del cable conectado debajo de él. Ajuste la intensidad de la corriente al rango aceptable de roedores, generalmente 1-2 mA, con una duración de 5 min.
NOTA: Es importante monitorear la respiración y el comportamiento de los roedores durante el procedimiento para asegurarse de que no experimenten ninguna angustia o molestia. Si la rata parece estar luchando o sintiendo dolor, el procedimiento debe detenerse de inmediato.
5. Fijación de roedores al fijador (posición supina)
- Coloque las cabezas del roedor en el orificio en forma de U frente al fijador, con el roedor en posición prona. Pasa el cuerpo del roedor a través de dos bucles de cuerda.
- Sujete la cuerda alrededor del cuello y el abdomen del roedor, asegurándose de que no pueda escapar, pero no tan apretada como para causar dificultad respiratoria y la muerte.
NOTA: Los puntos que deben anotarse durante la fijación son los mismos que en el paso 3.2. - Arregla a los otros roedores de la misma manera.
- Al igual que en el paso 3.4, repita los pasos de fijación anteriores durante 3 días para reducir la respuesta al estrés de los roedores.
- Strat EA desde el día 4.
NOTA: La desinfección se realiza como se menciona en el paso 3.6.
6. Realización de EA (ST25)
- Elija agujas de acupuntura estériles desechables de 0,25 mm x 13 mm.
- Encuentre los puntos de acupuntura por ubicación anatómica y confirme la profundidad de inserción en el punto de acupuntura.
NOTA: ST25 se encuentra a nivel del ombligo. Posicionar este punto en roedores requiere medir primero la longitud de la pata del roedor. ST25 se encuentra a 2/3 de la longitud de la pata junto al ombligo. Por ejemplo, si la pata medida del roedor es de 0,6 cm, entonces ST25 se encuentra a 0,4 cm a la derecha y a la izquierda del ombligo. - Gire y penetre lentamente las agujas estériles en ST25 bilateral a una profundidad de 4-8 mm en 3 roedores, respectivamente.
- Conecte un lado del cable de conexión al instrumento EA.
- Conecte otro lado del cable de conexión que contiene los clips EA positivo y negativo a los vástagos de la aguja de acupuntura en el ST25 izquierdo y derecho.
- Encienda el instrumento EA.
- Gire el botón (Función/Elegir interruptor) para ajustar la frecuencia y el modo de función.
- Establezca la frecuencia en 10 Hz y elija el modo de onda continua.
- Gire el botón correspondiente (Ajustar intensidad) para establecer la intensidad. Cada botón de ajuste de intensidad controla la intensidad actual de la rata del cable conectado debajo de él. Ajuste la intensidad de la corriente al rango aceptable de roedores, generalmente 1-2 mA, con una duración de 5 min.
NOTA: Las observaciones fueron las mismas que en el paso 4.6.
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Representative Results
El plano de planta del fijador corporal animal que diseñamos se muestra en la Figura 1. Además, se presentó un modelo gráfico en 3D de este fijador para proporcionar una visión completa del diseño (Archivo Suplementario 1). Se trata de un dispositivo que permite inmovilizar a 3 roedores y realizar EA simultáneamente. Las ratas y los ratones se restringieron al fijador en estado de vigilia, y tanto la posición prona como la supina pudieron fijarse firmemente sin causar lesiones a los roedores (Figura 2 y Figura 3). Con la ayuda del fijador, los puntos de acupuntura MS6 y ST25 se localizaron con éxito y se agujerearon en roedores (Figura 4 y Figura 5).
Para controlar las variables y validar la efectividad de este enfoque de fijación, un experimentador inmovilizó a 3 ratas (Video 1) o 3 ratones durante tres ensayos consecutivos en un estudio comparativo (Tabla 1). El hallazgo demostró que el tiempo medio de inmovilización de 3 ratas en decúbito prono y supino utilizando esta herramienta fue de 77,1 s ± 7,8 s y de 74,9 s ± 8,6 s, respectivamente (media ± DE). En cuanto a 3 ratones, el tiempo medio de inmovilización en decúbito prono y supino utilizando este fijador fue de 72,0 s ± 10,5 s y de 62,3 ± 4,2 s, respectivamente (media ± DE). Ambos grupos de ratas y ratones fueron inmovilizados con éxito en el dispositivo y no escaparon durante el tratamiento de EA de 5 minutos (Figura 2 y Figura 3). A una intensidad de EA de 1-2 mA, los ratones y las ratas se sintieron cómodos y no lucharon violentamente. La respiración en ratones y ratas fue estable, y no se produjeron muertes súbitas en los animales. Después del tratamiento, los ratones y las ratas permanecieron sanos y sobrevivieron.
Figura 1. Plano de planta del fijador de roedores por lotes. (1) Dispositivo de soporte para roedores, dividido en tres partes. (2,3) Pilares: se utilizan para fijar las extremidades de ratones o ratas jóvenes. (4) Cueva: se utiliza para fijar la cabeza. (5) Agujero: se utiliza para fijar el cuello de las ratas jóvenes. (6) Orificio: se utiliza para fijar el cuerpo. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: Ratas jóvenes fijas en decúbito prono y supino. (A-C) Tratamiento de EA en el punto de acupuntura MS6. (D-F) Tratamiento de EA en el punto de acupuntura ST25. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: Ratones fijos en decúbito prono y supino. (A-C) Tratamiento de EA en el punto de acupuntura MS6. (D-F) Tratamiento de EA en el punto de acupuntura ST25. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4: MS6 en la región cerebral. MS6 se encuentra en el lado lateral de la cabeza y se coloca en el punto de conexión entre Shencong (Ex-hn1) y Xuanli (GB6), que también se conoce como la región parietal anterior (Du21). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 5: Punto bilateral ST25 en rojo. ST25 se encuentra a nivel del ombligo. Posicionar este punto en roedor requiere medir primero la longitud de la pata del roedor. ST25 se encuentra a 2/3 de la longitud de la pata junto al ombligo. Por ejemplo, si la medida de la pata del roedor es de 0,6 cm, entonces el ST25 está a 0,4 a la derecha y a la izquierda del ombligo. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
| Ensayos | Ratas | Ratón | ||
| Posición prona | Posición supina | Posición prona | Posición supina | |
| (tiempo en segundos) | (tiempo en segundos) | (tiempo en segundos) | (tiempo en segundos) | |
| Ensayo 1 | 75.5 | 65.1 | 60.2 | 62.3 |
| Ensayo 2 | 70.2 | 80.3 | 80.1 | 70.6 |
| Ensayo 3 | 85.5 | 79.5 | 75.7 | 65.9 |
| Tiempo medio (media ± DE) | 77,1 ± 7,8 | 74,9 ± 8,6 | 72,0 ± 10,5 | 62,3 ± 4,2 |
Tabla 1: Tiempo dedicado a la fijación de ratas y ratones en decúbito prono y supino. Los datos (tiempo en segundos) fueron obtenidos por un experimentador que inmovilizó a 3 ratas y 3 ratones durante 3 ensayos consecutivos, respectivamente. El tiempo medio requerido se determinó calculando el promedio y la desviación estándar del tiempo empleado en los 3 ensayos.
Archivo complementario 1: Archivo de diseño de fijador de roedores de baño impreso en 3D. Este modelo 3D se puede arrastrar para lograr una vista completa de 360° del diseño. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Video 1: Vídeo de la fijación en decúbito prono y supino de ratas SD jóvenes, como se describe en detalle en la leyenda de la Figura 2 . Este video muestra a un experimentador sujetando a 3 ratas en posición supina y prona. Haga clic aquí para descargar este video.
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Discussion
La electroacupuntura (EA) es una forma de acupuntura que implica el uso de estimulación eléctrica en agujas de acupuntura11. Esta técnica implica el uso de corrientes de micropulso de intensidad y frecuencia específicas para estimular los puntos de acupuntura y lograr efectos terapéuticos mejorados3. Sin embargo, el mecanismo de la EA para la curación es limitado y requiere una amplia investigación básica para probar 1,2,3. Los modelos de roedores se utilizan comúnmente en estudios básicos de EA 8,12,13, y nuestro objetivo es proporcionar un método rápido y eficiente para realizar estos experimentos en ratas y ratones.
Actualmente, el experimento de EA se enfrenta a muchos desafíos. El principal desafío es inmovilizar eficazmente a los roedores sin anestesia. La inmovilización estable de los animales es crucial y tiene un impacto significativo en el resultado del experimento con animales. Por lo demás, las funciones fisiológicas de los animales anestesiados son diferentes a las de los animales despiertos, y el tratamiento clínico de acupuntura siempre se realiza en pacientes despiertos. Por lo tanto, los estudios experimentales con animales despiertos son más prácticos para fines clínicos. Anteriormente, la inmovilización con una placa de fijación era el método preferido, pero consumía mucho tiempo y solo permitía la operación de un solo roedor14. Los inmovilizadores tradicionales también requerían atar las extremidades del roedor, lo que era un proceso que requería mucho tiempo y, a menudo, provocaba dolor debido a la apretada sujeción. Varios estudios han implementado cinta adhesiva para ratones, pero su capacidad para escapar fácilmente plantea desafíos significativos, particularmente durante los procedimientos de acupuntura8. Cuando hay más sujetos experimentales, a menudo se requiere la operación por lotes para ahorrar tiempo y esfuerzo2. Por lo tanto, hemos desarrollado un fijador de lotes de cuerpos de animales pequeños impreso en 3D que ofrece varias ventajas sobre los métodos de fijación tradicionales15: 1) acorta el tiempo de fijación, mejorando en gran medida la eficiencia experimental16; 2) es simple y fácil de usar y no se ve afectado por factores subjetivos15,16; 3) Condujo menos dañino para los roedores; 4) Una vez fijada, la operación de EA se puede realizar en varias ratas jóvenes al mismo tiempo, ahorrando tiempo y permitiendo la observación simultánea de los resultados del tratamiento.
El uso de la tecnología de impresión 3D para estudios experimentales de EA es una valiosa expansión en el campo de la investigación de la acupuntura. El dispositivo se puede ajustar a cualquier tamaño cuando se imprime en 3D, lo que ayuda a que la acupuntura experimental se lleve a cabo de manera más efectiva. El modelado por deposición fundida (FDM), también conocido como fabricación de filamentos fundidos (FFF), un método de fabricación aditiva10, se utiliza para imprimir en 3D el fijador. Este dispositivo es adecuado no solo para este experimento, sino también para realizar experimentos como TC o RM en roedores17,18. Además, también se puede aplicar a cualquier situación en la que se necesite una fijación masiva, excepto para estudios de EA. Debido a la prevalencia de la tecnología de impresión 3D, este dispositivo está fácilmente disponible. Se puede hacer a través de un fabricante local de impresión 3D. Además, este dispositivo de fijación se puede modificar y personalizar en función del dibujo de diseño. En este estudio, el dispositivo de fijación se compone de tres secciones, cada una capaz de fijar un solo roedor. Si es necesario incluir roedores adicionales u otros animales, el dispositivo se puede escalar proporcionalmente para acomodar el mayor número. Por ejemplo, se puede diseñar como un dispositivo que puede arreglar 5 ratones o incluso como un dispositivo de fijación para otros animales como conejos.
Otro reto es encontrar puntos de acupuntura en los roedores que correspondan a los humanos. Se eligieron los puntos de acupuntura MS6 y ST25 para examinar los efectos de la fijación en decúbito prono y supino. Además, estos dos puntos de acupuntura han sido estudiados por muchos estudiosos 6,7,19. La EM6 se utiliza con mayor frecuencia en la investigación de enfermedades cerebrales, como la enfermedad de Parkinson, la disfunción después de un accidente cerebrovascular, etc. 6,13,19. MS6 podría mejorar la función neurológica de ratas que sufren un accidente cerebrovascular isquémico a través de la modulación de la vía de señalización JAK/STAT que está mediada por IL-12 en un estudio previo13. El ST25 se utiliza generalmente para el tratamiento del tracto gastrointestinal, como la diarrea y el síndrome del intestino irritable (SII)7,12. Un estudio previo ha informado que la EA aplicada únicamente en el punto ST25 mostró el potencial para aliviar la hipersensibilidad visceral al mismo tiempo que restaura la frecuencia normal de ondas lentas y el ritmo del colon en ratas con SII12. Estos dos puntos de acupuntura también son capaces de demostrar adecuadamente los efectos de la posición en decúbito supino y prono en roedores. Además, estos dos puntos de acupuntura tienen el significado de mostrar 6,7,19. Dado que estos dos puntos de acupuntura han sido estudiados por muchos estudiosos, proporcionamos un protocolo sobre cómo localizar estos dos puntos de acupuntura en roedores. Es útil para experimentos con animales en los que se están llevando a cabo estudios MS6 y ST25. Sin embargo, el estudio actual tiene algunas limitaciones. Por ejemplo, la posición y la profundidad del inserto de la aguja no se pueden medir objetivamente y pueden variar según el nivel de experiencia del operador.
Nuestros experimentos cumplen con el principio de las "3R" de ética animal y han sido aprobados por el Comité Étnico y de Bienestar de los Animales de Laboratorio de la Universidad Médica del Ejército. El paso más desafiante y crucial en este experimento es encontrar un método confiable y eficiente para inmovilizar roedores de forma segura. Esto se debe a que cualquier intento de escape o muerte de los roedores durante la estimulación de EA de 5 minutos resultará en el fracaso del experimento. El diseño de la cueva frontal aprovecha la preferencia de los roedores por cavar agujeros. Colocar la cabeza de los roedores dentro de la cueva tiene la intención de proporcionar consuelo psicológico. Además, las cuerdas utilizadas para sujetar la cabeza y el cuerpo de los roedores deben estar moderadamente sujetas, no permaneciendo excesivamente flojas ni demasiado apretadas para evitar el escape del roedor y evitar la dificultad respiratoria. Después de la estimulación eléctrica, los comportamientos y respuestas de los roedores fueron monitoreados cuidadosamente. Idealmente, al aplicar una corriente de 1-2 mA, los roedores no exhibirían luchas agresivas o vocalizaciones en respuesta a una descarga eléctrica20. El fijador también se puede utilizar para fijar roedores en decúbito supino, decúbito prono y otros tipos de fijaciones según sea necesario. Es adecuado para una variedad de necesidades experimentales y la operación de fijación es fácil de realizar21. Sin embargo, esto ha llevado a la limitación de que los animales de diferentes tamaños necesitan equipos de inmovilización a medida de diferentes tamaños. Solo los animales con ligeras discrepancias de tamaño pueden ser inmovilizados utilizando el mismo dispositivo. El fijador de inmovilización por lotes utilizado en este protocolo inmoviliza de manera eficiente y confiable a los roedores dentro del rango de peso de 10-40 g. Para los animales fuera de este rango de peso, se necesitan fijadores de inmovilización por lotes personalizados para satisfacer sus requisitos específicos.
Además, la fijación de roedores por lotes impresa en 3D que se utiliza para las operaciones de EA a granel en roedores ofrece una mayor seguridad, ya que es resistente a los arañazos y mordeduras de roedores. Los estudios de EA en roedores han proporcionado información valiosa sobre los beneficios potenciales de esta modalidad terapéutica en humanos 1,2,3,6,7,11,14. El dispositivo es beneficioso para la promoción de la investigación científica experimental en EA. Esta técnica permite a los investigadores realizar experimentos con animales que requieren la inmovilización de animales. Además, presenta la ubicación exacta de ST25 y MS6, que puede servir de referencia para quienes estudien estos dos puntos de acupuntura en el futuro. En última instancia, se espera que esta metodología conduzca a modelos animales valiosos para la investigación de EA.
El fijador de ratones por lotes impreso en 3D descrito en este artículo ofrece un método simple y eficiente para realizar experimentos de EA en ratas o ratones. Su diseño tiene en cuenta la comodidad y seguridad de los animales, así como la necesidad de una fijación rápida y eficaz. Este dispositivo tiene el potencial de ahorrar tiempo y esfuerzo en la realización de experimentos con animales, promoviendo el avance de la investigación de la electroacupuntura y, en última instancia, conduciendo a mejores tratamientos para diversas enfermedades.
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Disclosures
Los autores declararon que no existían conflictos de intereses contrapuestos.
Acknowledgments
Gracias al Departamento de Neurocirugía del Segundo Hospital Afiliado de la Universidad Médica del Ejército por el apoyo del sitio. Financiamiento: Este trabajo fue apoyado por la Fundación de Ciencias Naturales de China (82104696).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3D printing batch mice fixator | MESH INVENT | Custom made | The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF). |
| Electroacupuncture instrument | Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory | SDZ-III | www.Hwato-med.com |
| Disposable sterile acupuncture needle | Suzhou Medical Appliance Factory | N/A | 0.25 mm x 13 mm |
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