In vivo Ca 2 + - Bal Arısı Koku Öğrenme sırasında Mantar Vücut Nöronlar Görüntüleme
Summary
Arılar iştahlı bir koku alma öğrenme paradigması (PER-condition) klimalı olabilir. Uyaranlara gibi kokular kullanarak, aynı anda Kalsiyum Görüntüleme koku uyarılmış mantar vücut nöron aktivitesini ölçmek için kullanılır kaydedilir hangi davranış bir yöntem kurdu<em> In vivo</em>.
Abstract
Antennal lob 1 in vivo ve yarı-Kalsiyum görüntüleme için in vivo hazırlık Joerges, Kuttner ve Galizia laboratuarımızda geliştirilmiştir üzerinden on yıl önce, koku uyarılmış aktivitesini ölçmek için. O andan itibaren, sürekli olarak rafine edilmiş ve arı beyni farklı neuropiles uygulanır. Burada henüz bir dekstran birleştiğinde kalsiyum duyarlı boya (Fura-2) kullanarak mantar vücut nöron aktivitesini ölçmek için laboratuarda kullanılan hazırlık açıklar. Biz retrograd mantar vücut nöronların aksonları ya da soma bölge içine boya enjekte edilerek leke. Biz klima BAŞINA kullanarak arı yetiştirmek için hala mümkün olduğu bir hazırlık elde etmek için, invazivlik azaltarak odaklanmak. PER (M17) 2 kontrol eden kas elektro-myograms kayıt davranışsal tepki ölçmek ve izlemek mümkün.
Fizyolojik deney sonra görüntülü yapılar nöronların kimlik adresine konfokal tarama mikroskobu kullanılarak daha ayrıntılı olarak incelenmiştir.
Protocol
Discussion
Bu sunumda, balarısı in vivo kalsiyum sinyallerini araştırmak için tüm adımları aracılığıyla gitti . Biz mantar vücut nöronlar için bu tekniği uygulanabilir, ancak bir boyama tekniği kurulacak olan bütün nöronlar üzerinde görüntüleme yapılabilir. Biz bal arısı koku yol nöronların odaklanmıştır. Deneyleri bir karanlık oda yapılır. Kurmak arı optik algılama aralığı yalan ve boyalar heyecanlandırmak değil uzun dalga boyundaki ışık ile aydınlatılır. Örneğin silikon …
Acknowledgements
Bu çalışma DFG tarafından finanse edilmektedir.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| low melting point hard wax Deiberit 502 | Dr. Böhme & Schöps Dental GmbH | |||
| FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | F-3029 | Protect from light. | |
| tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | D-3312 | Protect from light. | |
| n-eicosane | Sigma-Aldrich | 21, 927-4 | ||
| Kwik Sil Adhesive | WPI | KWIK SIL | ||
| Imaging Set-up | TILL Photonics | |||
| CCD camera | Imago | |||
| CED | Texas Instruments |
References
- Joerges, J., Küttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain. Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).
- Rehder, V. Quantification of the honeybee’s proboscis reflex by electromyiographic recordings. J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).
- Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain. Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).
- Mauelshagen, J. Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain. J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).
- Kuwabara, M. Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ. Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).
- Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera. Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).
