الكالسيوم في الجسم الحي 2 + -- التصوير من الخلايا العصبية بالجسم فطر خلال التعلم الشم في عسل النحل
Summary
يمكن أن يكون مشروطا النحل في نموذج التعلم الشمية مشهي (PER تكييف). استخدام الروائح والمحفزات ، أنشأنا طريقة السلوك التي يتم تسجيلها في حين يستخدم التصوير في وقت واحد لقياس النشاط الكالسيوم أثارت رائحة الجسم في الخلايا العصبية الفطر<em> في الجسم الحي</em>.
Abstract
والمجراة ونصف وقد وضعت في التحضير لتصوير الكالسيوم المجراة في المختبر لدينا من قبل Joerges ، كوتنر وGalizia أكثر من عشر سنوات مضت ، لقياس النشاط رائحة أثار في الفص antennal 1. منذ ذلك الحين ، فقد كان المكرر باستمرار وتطبيقه على neuropiles مختلفة في الدماغ النحل. هنا ، نحن تصف إعداد المستخدمة حاليا في المختبرات لقياس نشاط الخلايا العصبية في الجسم باستخدام فطر يقترن ديكستران الكالسيوم الحساسة للصبغة (Fura – 2). وصمة عار علينا retrogradely الخلايا العصبية عن طريق حقن الجسم الفطر صبغة في المحاور أو المنطقة سوما. ونحن نركز على الحد من الغزو ، من أجل تحقيق التحضير الذي لا يزال من الممكن تدريب النحل باستخدام PER تكييف. ونحن قادرون على رصد وقياس ردة الفعل السلوكية من خلال تسجيل الكهربائية myograms من العضلات التي تسيطر على الواحدة (M17) 2.
بعد التجربة الفسيولوجية والتحقيق في هياكل تصوير بمزيد من التفصيل باستخدام مبائر المجهري المسح الضوئي لمعالجة هوية الخلايا العصبية.
Protocol
Discussion
في هذا العرض مررنا جميع الخطوات للتحقيق في إشارات الكالسيوم في الجسم الحي النحل. طبقنا هذه التقنية لهيئة فطر الخلايا العصبية ، ولكن يمكن أن يتم التصوير في جميع الخلايا العصبية التي يمكن أن تنشأ تقنية تلوين. وقد ركزنا على الخلايا العصبية في مسار الشمية من عس?…
Acknowledgements
ويتم تمويل هذا العمل من قبل DFG.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| low melting point hard wax Deiberit 502 | Dr. Böhme & Schöps Dental GmbH | |||
| FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | F-3029 | Protect from light. | |
| tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | D-3312 | Protect from light. | |
| n-eicosane | Sigma-Aldrich | 21, 927-4 | ||
| Kwik Sil Adhesive | WPI | KWIK SIL | ||
| Imaging Set-up | TILL Photonics | |||
| CCD camera | Imago | |||
| CED | Texas Instruments |
References
- Joerges, J., Küttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain. Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).
- Rehder, V. Quantification of the honeybee’s proboscis reflex by electromyiographic recordings. J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).
- Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain. Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).
- Mauelshagen, J. Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain. J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).
- Kuwabara, M. Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ. Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).
- Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera. Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).
