В естественных условиях Са 2 + - Съемка Гриб Нейроны тела во время обучения в обонятельной Honey Bee
Summary
Пчелы могут быть обусловлены в аппетит обонятельных парадигмы обучения (PER кондиционирования). Использование запахов в качестве стимула, мы создали метод, в котором поведение записывается одновременно Кальций изображений используется для измерения запаха вызванную активность нейронов в грибном теле<em> В естественных условиях</em>.
Abstract
В естественных и полу-в естественных условиях подготовки к Кальций изображений был разработан в нашей лаборатории по Joerges, Каттнер и Galizia более десяти лет назад, для измерения запаха вызванной активности в усиков доли 1. С тех пор она постоянно изысканный и применительно к различным neuropiles у пчелы мозга. Здесь мы описываем подготовки в настоящее время используется в лаборатории для измерения активности нейронов в грибном тела с помощью декстран связан кальций-чувствительных красителя (Фура-2). Мы ретроградно пятно гриб нейронов тело путем введения красителя в их аксонов и сомы регионе. Мы делаем ставку на снижение инвазивности, для достижения подготовки, в которых он по-прежнему можно обучить пчел использованием PER кондиционирования. Мы в состоянии контролировать и количественно поведенческой реакции при записи электро-myograms из мышц, которая контролирует PER (М17) 2.
После физиологического эксперимента отображаемого структур исследованы более подробно с помощью конфокальной сканирующей микроскопии для решения личность нейронов.
Protocol
Discussion
В этой презентации мы прошли через все шаги для расследования в естественных сигналов кальция в медоносной пчелы. Мы применили этот метод для грибов нейронов тела, но изображение может быть сделано на всех нейронов, для которых техника окрашивания может быть установлено. Мы сосре?…
Acknowledgements
Эта работа финансируется DFG.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| low melting point hard wax Deiberit 502 | Dr. Böhme & Schöps Dental GmbH | |||
| FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | F-3029 | Protect from light. | |
| tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | D-3312 | Protect from light. | |
| n-eicosane | Sigma-Aldrich | 21, 927-4 | ||
| Kwik Sil Adhesive | WPI | KWIK SIL | ||
| Imaging Set-up | TILL Photonics | |||
| CCD camera | Imago | |||
| CED | Texas Instruments |
References
- Joerges, J., Küttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain. Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).
- Rehder, V. Quantification of the honeybee’s proboscis reflex by electromyiographic recordings. J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).
- Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain. Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).
- Mauelshagen, J. Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain. J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).
- Kuwabara, M. Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ. Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).
- Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera. Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).
