هو خطر على دقة وحساسية من بروتين تقرير الفحص برادفورد سريعة ومريحة من خلال استقامة الذاتية. نظهر الخطية إجراء بسيط هو أن يزيد كثيرا من الدقة ، ويحسن من حساسية مقايسة حول أضعاف – 10 ، ويخفف كثيرا تدخل المنظفات.
Abstract
ويتم إنجاز تقرير كميات من البروتين ميكروغرام في مقايسة Coomassie برادفورد الزرقاء الرائعة التي كتبها قياس الامتصاصية في 590 نانومتر. هذا الاختبار الأكثر شيوعا وبسيطة تمكن السريع الكمي البروتين في الخلية lysates ، الكسور الخلوية ، أو عينات البروتين المؤتلف ، لغرض التطبيع القياسات البيوكيميائية. ومع ذلك ، واستقامة تنازلات جوهرية لحساسية ودقة هذه الطريقة. وتبين أنه في ظل ظروف الفحص القياسية ، فإن نسبة من قياسات الامتصاصية في 590 نانومتر و 450 نانومتر خطي صارم مع تركيز البروتين. هذا الإجراء البسيط يزيد من دقة ويحسن من حساسية مقايسة حول الكمي ، 10 أضعاف السماح باستمرار إلى 50 نانوغرام من ألبومين المصل البقري. علاوة على ذلك ، تقلص إلى حد كبير التدخل قدم عادة بواسطة المنظفات المستخدمة لإنشاء خلية lysates البروتوكول الجديد. معادلة خطية وضعت على أساس العمل الجماعي وقانون بير يناسب تماما على البيانات التجريبية.
Protocol
الخطية للمعايرة برادفورد رسم بياني البروتين : ويستخدم على نطاق واسع الرائعة Coomassie مقايسة البروتين الأزرق ، والمعروفة عموما باسم مقايسة برادفورد 1 ، بسبب البروتوكول الملحق بها سريعة ومريحة وكذلك حساسيته النسبية. للأسف ، هناك…
Discussion
وفحص البروتين برادفورد تحظى بشعبية نظرا لسهولة الأداء والحساسية النسبية. عرضت الخطية على تركيزات بروتين كامل مجموعة التي حصلت عليها بروتوكول هنا يبسط كذلك مقايسة ، والعينات غير معروفة لا تحتاج إلى تدخل ضمن نطاق الرسم البياني المعايرة.