寒天取り付け:長期イメージングのための生きたゼブラフィッシュ胚を取り付ける基本的な方法

Abstract

出典:ハゲドーン・E・J、他.ブラストレーの開発の外科的融合によるパラバイオティクスゼブラフィッシュ胚の生成.J. ヴィス・エクス(2016).

このビデオでは、低溶融アガロースを使用して6ウェルプレートに生きているゼブラフィッシュ胚を取り付ける手順を説明しています。また、生きた胚の画像を取得し、ソフトウェアを使用して分析するプロセスも提供します。

Protocol

1. 顕微鏡のセットアップ、画像の取得、処理および分析 0.8%低融点(LMP)アガロースを調製する:0.8 g LMPアガロースを100 ml E3に加え、完全に溶解するまで加熱します。熱い間、アリコート1 mlのLMPアガロースを37°Cの加熱ブロックで1.5 mlマイクロフュージチューブに入れ.LMPアガロースは37°Cで溶融したままになります。 4 mg/ml(25x)の40 μl、37°CでLMPアガロースの各1mlアリコートにpH…

Materials

LMP agarose (Ultrapure LMP agarose)	Invitrogen	16520100
Tricaine (powder) (Tricaine Methanesulfonato, Tricaine-S)	Western Chemical Inc	MS 222
Glass-bottom 6-well plates used for imaging	MatTek	P06G1.5-20-F
10 ml pipette pump (green) (Pipette Pump Pipettor)	Novatech International	F37898-0000