In Utero инъекций Внутрижелудочковая и электропорации E15 эмбрионов мыши

Abstract

В внутриутробно в естественных условиях инъекции и электропорации эмбриональных неокортекса мышь обеспечивает мощный инструмент для манипулирования отдельными прародителей подкладка стены бокового желудочка. Эта техника в настоящее время широко используется для изучения процессов, связанных с corticogenesis более экспрессией или сбить гены и наблюдая воздействие на клеточную пролиферацию, миграцию и дифференцировку. По сравнению с традиционной стратегии нокаутом, внутриутробно электропорации обеспечивает быстрое средство для манипулирования популяцию клеток в течение определенного временное окно. В этом видео мы приводим протокол экспериментальной методологии подготовки мышей для хирургии, выставляя рога матки через laporatomy, потребители инъекционных ДНК в боковых желудочков развивающегося эмбриона, electroporating ДНК в прародителями подкладка боковой стенке, и уход за животными после операции . Наша лаборатория использует этот протокол для операций на E13-E16 мышах, однако, это наиболее часто выполняемая на E15, как показано в этом видео.