En injection intraventriculaire Utero et l'électroporation d'embryons de souris E15

Abstract

In utero in vivo par injection et l'électroporation du néocortex embryonnaires de souris fournit un outil puissant pour la manipulation des progéniteurs individuels qui tapissent les parois du ventricule latéral. Cette technique est maintenant largement utilisée pour étudier les processus impliqués dans corticogenesis par une sur-exprimant ou faire tomber les gènes et l'observation des effets sur la prolifération cellulaire, la migration et la différenciation. En comparaison avec les stratégies KO traditionnelle, in utero électroporation fournit un moyen rapide de manipuler une population de cellules pendant une fenêtre temporelle spécifique. Dans ce protocole vidéo, nous présentons la méthodologie expérimentale pour la préparation de souris pour la chirurgie, ce qui expose les cornes utérines travers laporatomy, l'injection d'ADN dans les ventricules latéraux de l'embryon en développement, électroporation d'ADN dans le progéniteurs tapissant la paroi latérale, et le soin des animaux post-opératoire . Notre laboratoire utilise ce protocole pour les chirurgies sur le E13-E16 souris, cependant, il est plus couramment effectuées au E15, comme le montre cette vidéo.