E15マウス胚の子宮内での脳室内注入とエレクトロポレーションで
Abstract
– 子宮内でのin vivoマウス胎児の大脳皮質の注射とエレクトロポレーションは、側脳室の壁の内側を覆う個々の前駆細胞を操作するための強力なツールが用意されています。この手法は、今や広く過剰発現や遺伝子をノックダウンし、細胞増殖、遊走、分化への影響を観察することによってcorticogenesisに関与するプロセスを研究するために使用されます。伝統的なノックアウト戦略と比較して、子宮内エレクトロポレーションは、特定の時間ウィンドウの間に細胞の集団を操作する迅速な手段を提供します。このビデオプロトコルでは、手術のためにマウスを準備laporatomyを通して子宮角を露出、胚の側脳室内にDNAを注入し、横方向の壁を裏打ちする前駆細胞にDNAをelectroporating、および動物の手術後のケアのための実験手法を概説。このビデオに示されているように私たちの研究室では、E13 – E16マウスでの手術のためにこのプロトコルを使用して、しかし、それは最も一般的に、E15で実行されます。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
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In-uteroIntraventricular InjectionElectroporationE15 Mouse EmbryosNeocortex ManipulationProgenitorsLateral VentricleCorticogenesisGene Over-expressionGene KnockdownCellular ProliferationMigrationDifferentiationKnockout StrategiesTemporal WindowVideo ProtocolSurgery PreparationUterine Horns ExposureDNA InjectionProgenitor ElectroporationAnimal Care Post-surgery
Cite This Article
Walantus, W., Castaneda, D., Elias, L., Kriegstein, A. In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos. J. Vis. Exp. (6), e239, doi:10.3791/239 (2007).