En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de ratón E15

Abstract

En el útero in-vivo de la inyección y la electroporación de la corteza cerebral de embriones de ratón proporciona una poderosa herramienta para la manipulación de los progenitores individuales que cubren las paredes del ventrículo lateral. Esta técnica es ampliamente utilizada para estudiar los procesos involucrados en corticogenesis por la sobre-expresión o derribar los genes y observar los efectos sobre la proliferación celular, la migración y la diferenciación. En comparación con las estrategias tradicionales de octavos de final, en el útero de la electroporación proporciona un medio rápido para manipular a una población de células durante una ventana temporal específica. En este protocolo de vídeo que resumen la metodología experimental para la preparación de los ratones para la cirugía, la exposición de los cuernos uterinos a través de laporatomy, la inyección de ADN en los ventrículos laterales del embrión en desarrollo, electroporating ADN en los progenitores que recubre la pared lateral, y el cuidado de los animales después de la cirugía . Nuestro laboratorio utiliza este protocolo para las cirugías de E13-E16 ratones, sin embargo, se realiza con mayor frecuencia en E15, como se muestra en este video.