وDecellularization Recellularization الأكباد من الجامعة
Summary
decellularization التروية هو تقنية جديدة لإنتاج السقالات الكبد كله أن يحتفظ تكوين الجهاز في المصفوفة خارج الخلية والمعمارية المصغرة. هنا ، وصفت طريقة إعداد السقالات الجهاز بأكمله باستخدام decellularization نضح وإعادة تعمير لاحقة مع خلايا الكبد. يمكن أن تتولد ترقيع الكبد الوظيفية وزرع باستخدام هذه التقنية.
Abstract
الكبد هو جهاز معقد الذي يتطلب نضح المستمر لتسليم المواد الغذائية والأوكسجين وإزالة النفايات من أجل البقاء على قيد الحياة 1. جهود لإعادة أو تقليد المجهرية الكبد مع أسس النهج حتى باستخدام هندسة الأنسجة وتقنيات التصنيع الدقيق لم تكن ناجحة حتى الآن لهذا التحدي بتصميم. بالإضافة إلى ذلك ، كانت محدودة الحيوية الاصطناعية المستخدمة لإنشاء السقالات لتطبيقات هندسة الأنسجة في الكبد إحداث تجديد وإصلاح الأنسجة في جزء كبير منه بسبب عدم وجود الحافز خلية محددة وملزمة من شأنها أن تحفز الخلايا السليمة وظائف 2. وقد وجدت الأم الأنسجة Decellularized الأوعية الدموية مثل 3 و 4 على الجلد من ناحية أخرى العديد من التطبيقات في هندسة الأنسجة ، وقدمت حلا عمليا لبعض التحديات. ميزة المصفوفة decellularized الأصلي هو أنه يحتفظ ، إلى حد ما ، وتكوين الأصلي ، والمجهرية ، وبالتالي تعزيز ارتباط الخلية واعادة التنظيم 5.
في هذا العمل الذي نقوم وصف الطرق لأداء نضح – decellularization في الكبد ، مثل أن حصلت على حالها bioscaffold الكبد الذي يحتفظ بنية الأوعية الدموية الرئيسية. علاوة على ذلك ، نحن تصف هذه الأساليب لrecellularize bioscaffolds مع خلايا الكبد الأولية الكبار ، وخلق طعم الكبد وظيفية في المختبر ، والوصول إلى السفينة اللازمة لزرعها في الجسم الحي.
Protocol
Discussion
الأسلوب decellularization نضح الموصوفة هنا تنتج كل سقالة الكبد يحتوي على نفس الهيكل الإجمالي والمعمارية المصغرة الأوعية الدموية للكبد الأم. السقالة لديه تكوين المصفوفة خارج الخلية مماثل للكبد الأم. الأسلوب recellularization يحقق إعادة تعمير السقالة مع الخلايا في الكفاءة العالية و?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
فإن الكتاب أود أن أشكر جاك Milwid للتصميم في غرفة نضح المختبر. وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة الأميركية ، وR01DK59766 R01DK084053 لR00DK080942 ، MY إلى KU الأميركية ، وجبهة الخلاص الوطني CBET – 0853569 لجامعة الكويت ومستشفيات للأطفال لShriners بيو (منحة رقم 8503). ونحن نقر أيضا الدعم والمستشفيات Shriners للأطفال.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sodium dodecyl sulfate | Sigma-Aldrich | L4390 | ||
| Triton X-100 | Sigma-Aldrich | T8787 | ||
| Masterflex L/S Digital Drive | Cole-Parmer | EW-07523-80 | ||
| Masterflex L/S Standard pump head | Cole-Parmer | EW- 07013-81 | ||
| Bubble trap | Radnoti | 130149 |
References
- Kulig, K. M., Vacanti, J. P. Hepatic tissue engineering. Transpl Immunol. 12, 303-310 (2004).
- Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering. Nature biotechnology. 23, 47-55 (2005).
- Dahl, S. L., Koh, J., Prabhakar, V., Niklason, L. E. Decellularized native and engineered arterial scaffolds for transplantation. Cell Transplant. 12, 659-666 (2003).
- Schechner, J. S. Engraftment of a vascularized human skin equivalent. FASEB J. 17, 2250-2256 (2003).
- Gilbert, T. W., Sellaro, T. L., Badylak, S. F., F, S. Decellularization of tissues and organs. Biomaterials. 27, 3675-3683 (2006).
- Uygun, B. E. Organ reengineering through development of a transplantable recellularized liver graft using decellularized liver matrix. Nat Med. , (2010).
