マウスの表在性リンパ節手術
Summary
同じマウス内で時間をかけて免疫応答の進行を追跡するには、リンパ節は、順次手術によって除去することができる。ここでは、この手法を実行する方法について説明します。
Abstract
ワクチン、感染症や腫瘍に対する免疫応答の進行を理解する免疫学の分野では、応答は、しばしば時間をかけて続いています。同様に、リンパ球の恒常性の研究では、時間経過実験をする必要があります。同じマウス内でこれらの研究を実行すると、実験的な変動と同様に使用されるマウスの数を減らすことが理想的です。血液の撤退は時間経過実験のパフォーマンスを可能にする、それが唯一の循環リンパ球に関する情報を提供し、細胞1-4の限られた数を提供しています。体を循環するリンパ節に存在するリンパ球は異なる特性を持っているので、両方の場所を調べることが重要です。手術によるリンパ節の連続除去が免疫応答や時間をかけて同じマウスの免疫細胞の増殖に従うユニークな機会を提供しています。 PEに十分であるリンパ節あたり1×10 6個の細胞の間にさらに、この技術は、収量表現型の特性および/または機能アッセイをrform。シーケンシャルリンパ節の手術やリンパ節郭清が正常に私たちと他の5月11日によって使用されています。ここでは、上腕動脈と鼠径部リンパ節がanesthetisedマウスの皮膚に小切開を行うことにより除去することができる方法について説明します。手術は表面的な、急速に行われるので、マウスは非常に迅速に回復し、よくヒールや過度の痛みを経験していません。一日おきに、それは時間のコースの実験を可能にする1つまたは2つのリンパ節を採取することが可能です。この手法は、時間をかけてリンパ節に存在するリンパ球の特性を研究するため、適しています。このアプローチは、様々な実験デザインに適しており、我々は多くの研究室は、順次リンパ節の手術を行うことの恩恵を受けるだろうと信じています。
Protocol
Discussion
我々は、多くの実験系に適用することができLN手術のプロトコルを記述している。免疫応答または免疫細胞の恒常性に従うことが非常に有用ですが、このテクニックはいくつかの制約があります。まず、4つのみLNSを収穫することができます。第二に、研究免疫応答は、全身であるか、浅鼠径または上腕（皮排水）LNSで実行する必要があります。最後に、採取した細胞の数は、LNの除去、絶対?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
私たちは、プロトコルの重要な読書のためのシルヴィージャンルサージとすべてのラボのメンバーに感謝します。この作品は、健康の研究（CIHR）のカナダの協会からの助成金（MOP-77545）によってサポートされていました。ナタリーLabrecqueはFRSQシニア奨学金によってサポートされており、メリッサマチューはNSERCアレクサンダー·グラハム·ベル·カナダ大学院奨学金を受けています。
Materials
| Reagent Name | Company | Catalog number | Comments |
| Graefe Fine Pattern Premium Forceps | Harvard Apparatus | 52-2144 | Strongly Curved, 10 cm (4 in), 0.8 mm tip |
| Michel Clip Applying and Removing Forceps | Harvard Apparatus | 52-3779 | 12.5 cm (5 in) |
| Michel Clip 100 | Harvard Apparatus | 52-3746 | 7.5-1.75 mm |
| Temgesic (Buprenorphine hydrochloride) | Schering-Plough | ||
| Vetalar (Ketamine hydrochloride) | Boniche Animal Healthcare | DIN: 01989529 | |
| Rompun (Xylazine) | Bayer | DIN: 02169592 | |
| Isoflurane | ABBOTT | DIN: 02032384 | |
| Hypotears eye ointment | Novartis Ophtalmics | DIN: 02133288 | |
| Baxedin (Clorhexidine gluconate 2% in isopropyl alcohol 70%) | Omega | L0000017 | DIN: 02251477 |
References
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