Intubation endotrachéale chez des souris<em> Par</em> Laryngoscopie directe en utilisant un otoscope
Summary
Nous avons développé une méthode simple, fiable et relativement peu coûteux pour l'intubation endotrachéale chez des souris par laryngoscopie directe en utilisant un otoscope avec un 2.0 mm spéculum. Cette technique est atraumatique et peut être utilisé pour des mesures répétées dans des expériences chroniques. Nous trouvons supérieure de trachéotomie ou précédemment rapporté des techniques non chirurgicales.
Abstract
Souris, à la fois de type sauvage et transgénique, sont le principal modèle mammifère dans la recherche biomédicale pour le moment. Intubation et la ventilation mécanique sont nécessaires pour des expériences animales entières qui nécessitent une intervention chirurgicale sous anesthésie profonde ou des mesures de la fonction pulmonaire. Trachéotomie a été la norme pour l'intubation des voies aériennes chez ces souris pour permettre une ventilation mécanique. Intubation oro-trachéale a été rapportée mais n'a pas été utilisé avec succès dans de nombreuses études en raison de la difficulté technique importante ou une exigence pour l'équipement hautement spécialisé et coûteux. Nous rapportons ici une technique de laryngoscopie directe en utilisant un otoscope équipé d'un 2.0 mm spéculum et l'aide d'un cathéter intraveineux 20 G comme une sonde endotrachéale. Nous avons utilisé cette technique largement et de manière fiable à intuber et procéder à des évaluations précises de la fonction pulmonaire chez la souris. Cette technique s'est avérée sûre, avec pratiquement aucune perte de animal dans des mains expérimentées. De plus, cette techniquepeut être utilisé pour des études répétées de souris dans des modèles chroniques.
Introduction
La souris de laboratoire a supplanté presque toutes les espèces comme le principal modèle mammifère de la biologie et pathobiology. La souris de laboratoire est la plus petite espèce de mammifère qui a été clairement et largement montré pour être de valeur comme un modèle de la maladie humaine et s'est avérée inestimable pour les progrès de notre compréhension de la biologie humaine et la maladie. Le temps de gestation courte et le coût nettement plus faible a permis le développement et l'étude de souris transgéniques nulles et comme un outil banal dans la recherche biomédicale. Toutefois, la taille de la souris de laboratoire moyenne (20-25 g) a limité leur étude dans des études à base physiologique ou chirurgicalement et, par conséquent, certains chercheurs étudient les espèces de mammifères plus grands. Un obstacle à l'utilisation de la souris dans ces études est la difficulté rencontrée avec les techniques d'intubation qui permettraient des mesures physiologiques ou des interventions chirurgicales importantes sous anesthésie profonde. Trachéotomie 1 a été utilisé comme une norme technique la place de l'intubation en raison de la plus grande facilité d'exécution de cette technique et modeste compétence requis. Cependant, la trachéotomie n'est pas propice à des études chroniques ou de récupération chirurgie; ainsi, il est limité à des expériences aiguës. Trachéotomie peut aussi être un facteur de confusion dans la recherche dans laquelle l'inflammation ou réflexes physiologiques sensibles sont importants.
Notre laboratoire a essayé la plupart des techniques décrites par d'autres chercheurs et les a trouvés insuffisants pour une variété de raisons. Trachéotomie est trop traumatisant et induit des saignements et l'inflammation des voies respiratoires. Beaucoup plus problématique est qu'il peut ne pas être faisable répété. Beaucoup de techniques non invasives relativement exigeant un investissement modeste dans les équipements ne sont pas suffisamment fiables. D'autres techniques nécessitent des équipements coûteux qui est difficile à justifier sans savoir si l'équipement fonctionne dans une application spécifique. Ainsi, nous avons cherché à développer une technique non traumatique nécessitant pas plus than un investissement modeste dans l'équipement spécialisé, pourrait être réalisé rapidement et de manière fiable, pourrait être répétée dans les modèles chroniques, et pourrait être utilisé dans un grand nombre d'animaux. Nous rapportons ici une telle technique.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans ce rapport, nous décrivons une technique simple et fiable pour intuber les souris qui est non traumatique et peuvent être utilisés à plusieurs reprises dans le même animal. Cette technique peut être réalisée avec une simple laboratoire ou équipements médicaux qui peuvent être achetés pour une somme modique. La technique de laryngoscopie directe, à l'origine par Hastings et collaborateurs 4, peut également être utilisé pour une variété de buts, mais principalement pour délivrer avec…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Une subvention de mérite du ministère des Anciens combattants et une subvention T32-HL098062 du NHLBI des Instituts nationaux de la santé pris en charge ce travail. Nous tenons à remercier sincèrement les conseils de Randolph H. Hasting, MD, Ph.D. et les conseils et le soutien de l'Unité des médecins vétérinaires du Système de Santé de VA San Diego.
Materials
| Operating Otoscope Head | Welch Allyn | 21700 | $188.98 |
| Otoscope Handle | Welch Allyn | 71000 | $112.20 |
| Reuseable Speculum | Welch Allyn | 22002 | $ 3.98 |
| Fine Forceps | Miltex | 18-779 | $107.18 |
| Small clamp stand to hold otoscope | |||
| Optional Equipment | |||
| Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling) | Summit Medical | $3,000 | |
| Flexivent (Animal Ventilator) | SCIREQ | $35,000 | |
| Supplies | |||
| Intravenous catheter (20 ga x 1 inch) | BD | 381233 | $ 9.62 |
| Polyethylene tubing (PE10) (0.011 inch I.D., 0.024 inch O.D.) 100 ft | Intramedic, Clay-Adams | 427401 | $115.70 |
| Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle) | Butler | 23061 | $10.00 |
| Xylazine (100 ml bottle) | Vedco | 24105 | $20.00 |
| Isoflurane (250 ml bottle) | $15.00 | ||
| vecuronium bromide 10 mg/10 ml | Pfizer | NDC 0069-0094-01 | $15.00 |
References
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