Интубации трахеи у мышей<em> Через</em> Прямая Ларингоскопия Использование Otoscope
Summary
Мы разработали простой, надежный и относительно недорогой метод для интубации трахеи у мышей через прямой ларингоскопии с использованием отоскоп с 2,0 мм зеркалах. Этот метод атравматичность и могут быть использованы для повторных измерений в хронических экспериментах. Мы находим его превосходит трахеостомии или ранее сообщалось нехирургических методов.
Abstract
Мыши, как дикого типа и трансгенные, являются основной модели млекопитающих в биомедицинских исследованиях себе. Интубации и механической вентиляции необходимы для целых экспериментах на животных, которые требуют хирургического вмешательства под глубокими анестезии или измерений функции легких. Трахеостомия был стандартный для интубации дыхательных путей у этих мышей, чтобы искусственной вентиляции легких. Оротрахеальная интубация сообщалось, но не был успешно используется во многих исследованиях из-за существенного технической сложности или требования для узкоспециализированной и дорогостоящего оборудования. Здесь мы сообщаем методику прямой ларингоскопии с использованием отоскоп оснащенный 2,0 мм зеркалах и с помощью 20 G внутривенный катетер как эндотрахеальной трубки. Мы использовали эту технику широко и надежно интубировать и провести точные оценки функции легких у мышей. Этот метод доказал сейф, практически без потери животных в опытных руках. Более того, этот методмогут быть использованы для повторных исследований мышам в хронических моделей.
Introduction
Лаборатория мыши вытеснил практически все виды, как основной модели млекопитающих биологии и патобиологии. Лаборатория мыши самый маленький вид млекопитающих, который был четко и подробно показаны свою ценность в качестве модели заболеваний человека и оказывается очень полезной в достижений нашего понимания человеческой биологии и болезней. Короткое время беременности и существенно более низкая стоимость позволило разработать и изучение нулевых и трансгенных мышей в качестве банального инструмента в биомедицинских исследованиях. Тем не менее, размер средней лабораторных мышей (20-25 г) ограничивает их исследование в исследованиях физиологически или хирургическим основе и, следовательно, некоторые исследователи изучают крупных видов млекопитающих. Препятствием для использования мышей в этих исследованиях является трудность с методами интубации, которые позволили бы физиологические измерения или обширные хирургические процедуры под глубоким наркозом. Трахеостомия 1 был использован в качестве стандартной тэchnique вместо интубации из-за большей простоты выполнения этой техники и скромный мастерство требуется. Тем не менее, трахеостомия не способствует хронических или восстановления исследований хирургии; Таким образом, оно ограничено острых опытах. Трахеостомия также может быть смешанным переменной в исследовании, в котором воспаление или чувствительные физиологические рефлексы важны.
Наша лаборатория попробовали большинство из методов, описанных другими исследователями и нашли их недостаточными для целого ряда причин. Трахеостомия слишком травматично и индуцирует кровотечение и воспаление дыхательных путей. Гораздо более проблематичным в том, что она не может быть реально повторяется. Многие относительно неинвазивные методы, которые требуют скромный инвестиций в оборудование, не являются достаточно надежными. Другие методы требуют дорогого оборудования, которое трудно оправдать, не зная, если оборудование будет работать в конкретном приложении. Таким образом, мы стремились разработать нетравматического технику, которая не требуется не больше тHan скромные инвестиции в специализированном оборудовании, может быть достигнуто быстро и надежно, может быть повторен при хронических моделей, и может быть использован в большом количестве животных. Здесь мы сообщаем такую технику.
Protocol
Representative Results
Discussion
В этом докладе мы опишем простой, надежный способ, чтобы интубировать мышей, что является нетравматическое и могут быть использованы повторно в том же животного. Эта техника может быть достигнуто с простой лаборатории или медицинского оборудования, которые можно приобрести за скромну…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Заслуги Грант из Департамента по делам ветеранов и T32-HL098062 грант от NHLBI из Национальных Институтов Здоровья поддержала эту работу. Мы хотим благодарят за консультацией Рэндольф H. Hasting, MD, Ph.D. и советы и поддержку ветеринарной медицинской части В.А. Сан-Диего системы здравоохранения.
Materials
| Operating Otoscope Head | Welch Allyn | 21700 | $188.98 |
| Otoscope Handle | Welch Allyn | 71000 | $112.20 |
| Reuseable Speculum | Welch Allyn | 22002 | $ 3.98 |
| Fine Forceps | Miltex | 18-779 | $107.18 |
| Small clamp stand to hold otoscope | |||
| Optional Equipment | |||
| Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling) | Summit Medical | $3,000 | |
| Flexivent (Animal Ventilator) | SCIREQ | $35,000 | |
| Supplies | |||
| Intravenous catheter (20 ga x 1 inch) | BD | 381233 | $ 9.62 |
| Polyethylene tubing (PE10) (0.011 inch I.D., 0.024 inch O.D.) 100 ft | Intramedic, Clay-Adams | 427401 | $115.70 |
| Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle) | Butler | 23061 | $10.00 |
| Xylazine (100 ml bottle) | Vedco | 24105 | $20.00 |
| Isoflurane (250 ml bottle) | $15.00 | ||
| vecuronium bromide 10 mg/10 ml | Pfizer | NDC 0069-0094-01 | $15.00 |
References
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. natl. Acad. Sci. U.S.A. 88, 8277-8281 (1991).
- Watanabe, A., Hashimoto, Y., Ochiai, E., Sato, A., Kamei, K. A simple method for confirming correct endotracheal intubation in mice. Lab. Anim. 43, 399-401 (2009).
- Orebaugh, S. L. Succinylcholine: adverse effects and alternatives in emergency medicine. Am. J. Emerg. Med. 17, 715-721 (1999).
- Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemp. Lab. Anim. Sci. 38, 33-35 (1999).
- Berul, C. I., Aronovitz, M. J., Wang, P. J., Mendelsohn, M. E. In vivo cardiac electrophysiology studies in the mouse. Circulation. 94, 2641-2648 (1996).
- Ewart, S. L., Gavett, S. H., Margolick, J., Wills-Karp, M. Cyclosporin A attenuates genetic airway hyperresponsiveness in mice but not through inhibition of CD4+ or CD8+ T cells. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 627-634 (1996).
- Ewart, S. L., Mitzner, W., DiSilvestre, D. A., Meyers, D. A., Levitt, R. C. Airway hyperresponsiveness to acetylcholine: segregation analysis and evidence for linkage to murine chromosome 6. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 487-495 (1996).
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Lab. 41, 128-135 (2007).
- Boll, H., et al. High-speed single-breath-hold micro-computed tomography of thoracic and abdominal structures in mice using a simplified method for intubation. J. Comput. Assist. Tomogr. 34, 783-790 (2010).
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
- Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Lab. Anim. 37, 204-206 (2003).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 8, 103-106 (2004).
- Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Lab. Anim. 42, 222-230 (2008).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Cont. Top. Lab. Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
- De Vleeschauwer, S. p. I., et al. Repeated invasive lung function measurements in intubated mice: an approach for longitudinal lung research. Lab. Anim. 45, 81-89 (2011).
- Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab. Anim. 35, 39-42 (2006).
- Singer, T., et al. Left-sided mouse intubation: description and evaluation. Exp. Lung Res. 36, 25-30 (2010).
