Summary

마우스의 기관 내 삽관<em>를 통해</em이경 사용> 직접 후두경

Published: April 05, 2014
doi:

Summary

우리는 2.0 mm 검경과 이경을 사용하여 직접 후두경을 통해 마우스에서 기관 내 삽관을위한 간단하고 신뢰할 수있는, 그리고 상대적으로 저렴한 방법을 개발했습니다. 이 기술은 atraumatic이고 만성 실험에서 반복 측정에 사용될 수있다. 우리는 우수한 기관 절개 또는 이전에 비수술 적 방법을보고 찾을 수 있습니다.

Abstract

마우스는 야생형 및 유전자 변형 모두는 현재 생물 의학 연구의 주요 포유류의 모델입니다. 삽관 및 기계적 환기 깊은 마취 또는 폐 기능의 측정에 따라 수술을 필요로 전체 동물 실험을 위해 필요합니다. 기관 절개술은 기계 환기를 허용하는이 마우스에서기도 삽관을위한 표준이다. Orotracheal 삽관 때문에 상당한 기술적 어려움이나 고도의 전문과 고가의 장비에 대한 요구 사항의보고되었지만 성공적으로 많은 연구에 사용되지 않았습니다. 여기서 우리는 2.0 mm 검경 장착 이경을 사용하여 기관 내 튜브로 20 G 정맥 카테터를 사용하여 직접 후두경의 기술을보고합니다. 우리는 삽관과 생쥐의 폐 기능의 정확한 평가를 수행하기 위해 광범위하고 안정적​​으로이 기술을 사용하고 있습니다. 이 기술은 경험이 풍부한 손에 본질적으로 동물 손실, 안전 입증했다. 또한,이 기술만성 모델 마우스의 반복 된 연구에 사용할 수 있습니다.

Introduction

실험실 마우스 생물학 한테 진찰 Pathobiology의 주요 포유류의 모델로 거의 모든 종을 대신하게했다. 실험실 마우스는 명확하고 광범위하게 인간의 질병의 모델로서 가치가있을 것으로 나타났다 인간 생물학 및 질병에 대한 우리의 이해의 발전에 귀중한 입증 된 가장 작은 포유류의 종입니다. 짧은 임신 기간의 시간과 실질적으로 낮은 비용으로는 생물 의학 연구에서 일반적인 도구로 널 (null)과 형질 전환 마우스의 개발과 연구를 허용했다. 그러나, 평균 실험실 마우스 (20 ~ 25 g)을의 크기는 결과적으로 연구자에 큰 포유 동물 종을 연구, 생리 학적 또는 외과 적 기반 연구에 자신의 연구를 제한하고있다. 이 연구에 마우스를 사용하는 장애는 깊은 마취 생리적 측정 또는 광범위한 수술을 허용하는 삽관 기술로 발생하는 어려움이다. 기관 절개 1 TE 표준으로 사용되었다필요하기 때문에이 기술과 겸손 기술을 수행하는보다 쉽게​​ 대신 삽관의 chnique. 그러나, 기관 절개술은 만성 또는 복구 수술 연구에 도움이되지 않습니다; 따라서, 급성 실험에 한한다. 기관 절개술은 또한 염증이나 민감한 생리적 반사 신경이 중요 한 연구에서 교란 변수가 될 수 있습니다.

우리 연구실은 다른 연구자에 의해 설명 된 기술의 대부분을 시도하고 여러 가지 이유로 그 불충분 함을 발견했습니다. 기관 절개도이다 외상성 출혈 및기도 염증을 유도한다. 훨씬 더 문제가 그것에서 실질적으로 반복 될 수 있다는 것이다. 장비 겸손한 투자를 필요로하는 많은 상대적으로 비 침습적 기술은 충분히 신뢰할 수 없습니다. 다른 기술은 장비가 특정 응용 프로그램에서 작동하는지 몰라도 정당화하기 어려운 고가의 장비를 필요로합니다. 따라서, 우리는 더 이상 t을 요구하지 않는 비 외상성 기술을 개발하기 위해 노력한 특수 장비의 소극적인 투자는 빠르게 달성 될 수 있고, 안정적으로, 만성 모델에서 반복 될 수 있고, 많은 수의 동물에서 사용될 수있다. 여기에서 우리는 이러한 기술을보고합니다.

Protocol

1. 동물 준비 (작은 마우스는 전문가에 의해 삽관 할 수있다) 8 주 이내에 세 이상 20g 생쥐를 얻습니다. 마취 복강 preanesthetic으로 케타민과 자일 라진 20 ㎎ / ㎏, 각, 생쥐를 주입한다. (이 용량은 완전히 마우스를 마취하기에 충분하지만, 기계 환기에 삽관 후 안전한 전송을 용이하게한다.) 그러나, 투여 량의 조정 기관의 수의사와 협의하여 마취 반응에 따라 필요할 수 있습니?…

Representative Results

위의 기술을 가진 삽관 법은 안정적이고 빠르다. 기관 내 튜브의 적절한 배치는 쉽게의 침수 호기 사지에서 배출 가스 버블 링을 관찰에 의해 확인 된 인공 호흡기 회로 (일반적으로 PEEP 트랩에서) (그림 1)를 추적기도 압력에 부정적인 편향의. 기도 압력 추적에 부정적인 편향은 가장 신뢰할 수 있습니다. 기타 호기 인공 호흡기 회로 (2)에 연결 정맥 튜브의 작은 액체 방울의 ?…

Discussion

이 보고서에서 우리는 비 외상성과 같은 동물에서 반복적으로 사용할 수있는 마우스를 삽관하는 간단하고 신뢰할 수있는 기술을 설명합니다. 이 기술은 겸손한 합계 구입하실 수 있습니다 간단한 실험실이나 의료 장비를 수행 할 수 있습니다. 원래 스팅 및 동료 (4)에 의해보고 된 직접적인 후두경의 기술은, 다양한 용도로도 이용 될 수 있지만 주로 정확하게 하부 호흡기에 시험 물질을 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

베테랑 담당 부서에서 메리트 그랜트와 건강의 국립 연구소의 NHLBI에서 T32-HL098062 그랜트는이 작업을 지원했다. 우리는 기꺼이 랜돌프 H. Hasting, MD, 박사의 조언을 인정하고자하는 그리고 조언과 VA 샌디에고 헬스 케어 시스템의 수의학 단위의 지원.

Materials

Operating Otoscope Head Welch Allyn 21700  $188.98
Otoscope Handle Welch Allyn 71000  $112.20
Reuseable Speculum Welch Allyn 22002  $ 3.98
Fine Forceps Miltex 18-779  $107.18
Small clamp stand to hold otoscope
Optional Equipment
Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling) Summit Medical $3,000
Flexivent (Animal Ventilator) SCIREQ $35,000
Supplies
Intravenous catheter (20 ga x 1 inch) BD 381233  $  9.62
Polyethylene tubing (PE10) (0.011 inch I.D., 0.024 inch O.D.) 100 ft Intramedic, Clay-Adams 427401  $115.70
Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle) Butler 23061  $10.00
Xylazine (100 ml bottle) Vedco 24105  $20.00
Isoflurane (250 ml bottle)  $15.00
vecuronium bromide 10 mg/10 ml Pfizer NDC 0069-0094-01 $15.00

References

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Cite This Article
Thomas, J. L., Dumouchel, J., Li, J., Magat, J., Balitzer, D., Bigby, T. D. Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope. J. Vis. Exp. (86), e50269, doi:10.3791/50269 (2014).

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