कार्बन टेट्राक्लोराइड (सीसीएल4)एक्सपोजर के माध्यम से चूहों में तीव्र जिगर की चोट को प्रेरित करना एक ओरोगास्ट्रिक ट्यूब के माध्यम से
Summary
यह प्रोटोकॉल एक ओरोगास्ट्रिक ट्यूब के माध्यम से सीसीएल4 एक्सपोजर के माध्यम से तीव्र यकृत चोट (अली) को प्रेरित करने की एक आम और व्यवहार्य विधि का वर्णन करता है। सीसीएल4 एक्सपोजर लिवर में अपने बायोट्रांसफॉर्मेशन के दौरान रिएक्टिव ऑक्सीजन प्रजातियों के गठन के माध्यम से अली को प्रेरित करता है। इस विधि का उपयोग अली के रोगविज्ञान का विश्लेषण करने और विभिन्न हेपेटोप्रोटेक्टिव रणनीतियों की जांच करने के लिए किया जाता है।
Abstract
तीव्र जिगर की चोट (अली) हेपेटिक विफलता के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जो हेपेटिक एन्सेफेलोपैथी और बिगड़ा प्रोटीन संश्लेषण जैसी जटिलताओं सहित गंभीर यकृत रोग की विशेषता है। उपयुक्त पशु मॉडल अली के तंत्र और रोगविज्ञान का परीक्षण करने और विभिन्न हेपेटोप्रोटेक्टिव रणनीतियों की जांच करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। रासायनिक परिवर्तनों को करने की क्षमता के कारण, कार्बन टेट्राक्लोराइड (सीसीएल4)का व्यापक रूप से प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के गठन के माध्यम से अली को प्रेरित करने के लिए जिगर में उपयोग किया जाता है। सीसीएल4 एक्सपोजर को इंट्रापेरिटोनी, साँस लेने, या नासोगास्ट्रिक या ओरोगास्ट्रिक ट्यूब के माध्यम से किया जा सकता है। यहां, हम एक कृंतक मॉडल का वर्णन करते हैं, जिसमें अली को एक ओरोगास्ट्रिक ट्यूब के माध्यम से सीसीएल4 एक्सपोजर द्वारा प्रेरित किया जाता है। यह विधि सस्ती है, आसानी से किया जाता है, और इसमें न्यूनतम जोखिम होता है। मॉडल अत्यधिक प्रजनन योग्य है और व्यापक रूप से संभावित हेपेटोप्रोटेक्टिव रणनीतियों की प्रभावकारिता निर्धारित करने और जिगर की चोट के मार्कर का आकलन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है।
Introduction
खासकर शराब और नशीली दवाओं के सेवन के कारण लिवर के जहरीले अपमान की आवृत्ति बढ़ रही है । तीव्र जिगर की चोट (अली) उच्च मृत्यु दर के साथ जुड़ा हुआ है और नैदानिक चिंताओं का कारण बना है1,,2। विषाक्त चोट जिगर में मौत संकेत रास्ते की ओर जाता है, जिसके परिणामस्वरूप हेपेटोसाइट एपोप्टोसिस, परिगलन, या पायरोप्टोसिस होता है। अली हेपेटिक विफलता के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जो हेपेटिक एंसेफेलोपैथी और बिगड़ा प्रोटीन संश्लेषण3,4जैसी जटिलताओं सहित गंभीर यकृत रोग की विशेषता है । हालांकि हाल के शोध ने हेपेटिक विफलता के साथ शारीरिक और रोग परिवर्तनों के बारे में हमारे ज्ञान में वृद्धि की है, लेकिन इसने रोगआणविक विशेषताओं को पूरी तरह से नहीं समझाया है जो कोशिका मृत्यु के तंत्र को प्रभावित करते हैं। इसके अलावा, अली रोगियों में प्रगतिशील गिरावट को रिवर्स करने के लिए वर्तमान में कोई दवा उपलब्ध नहीं है। वर्तमान में, केवल काफी प्रभावी उपचार जिगर प्रत्यारोपण5,6है ।
अली के तंत्र और रोगविज्ञान की जांच करने और विभिन्न हेपेटोप्रोटेक्टिव रणनीतियों का परीक्षण करने के लिए, अली को प्रेरित करने के लिए विभिन्न पशु मॉडलों का उपयोग किया जाता है। अली के एक बेहतर पशु मॉडल को एक विश्वसनीय, मान्य, सस्ती और विधि लागू करने में आसान के माध्यम से रोग की रोग प्रक्रिया की नकल करनी चाहिए। प्रयोगात्मक मॉडलों के उदाहरणों में हेपेटोटॉक्सिक एजेंट, सर्जिकल प्रक्रियाएं जैसे कुल या आंशिक हेपेटेक्टोमी, पूर्ण या क्षणिक देवस्कुलीकरण, और संक्रमित प्रक्रियाएं7,,8,,9शामिल हैं। ज्ञात हेपेटोटॉक्सिक पदार्थों में गैलेक्टोसामाइन, एसीटामिनोफेन, थिओएसेटामाइड, एज़ऑक्सीमेथेन और सीसीएल4शामिल हैं। इनमें से सीसीएल4 का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, हालांकि इसे अभी तक,10, 11 ,1211,13की अच्छी तरह से चित्रित नहीं किया गया है।,
सीसीएल4 एक मीठी गंध के साथ एक कार्बनिक रंगहीन तरल यौगिक है और कम तापमान पर लगभग कोई ज्वलनशीलता नहीं है। सीसीएल4 की उच्च सांद्रता के संपर्क में आने से केंद्रीय तंत्रिका तंत्र को नुकसान हो सकता है, जिसमें यकृत और गुर्दे की गिरावट शामिल है। सीसीएल4 लिवर में अपने बायोट्रांसफॉर्मेशन के जरिए अली को प्रेरित करती है, जो रिएक्टिव ऑक्सीजन प्रजाति बनाती है । यह P450 साइटोक्रोम एंजाइम 2E1 के माध्यम से होता है, जो एक सक्रिय मेटाबोलाइट बनाता है और जिसके परिणामस्वरूप मैक्रोमॉलिक्यूल बाइंडिंग, लिपिड पेरोक्सिडिशन की वृद्धि और इंट्रासेल्युलर कैल्शियम होमोस्टोसिस14की अशांति होती है। इसके अलावा, सीसीएल4 मॉडल का उपयोग आरएनए संश्लेषण15के स्तर पर एस्ट्रोसाइट्स को प्रोत्साहित करने के लिए किया जा सकता है। यह हेपेटोटॉक्सिन इंट्रापेरिटोनियल, इंट्रापोर्टल, ओरल और इंट्रागैस्ट्रिकरूट्स 16द्वारा प्रशासित किया गया है।
इस प्रोटोकॉल में, हम एक orogastric ट्यूब के माध्यम से चूहों मेंसीटी4प्रेरित अली विस्तार से वर्णन करते हैं। यह विधि मजबूत और प्रजनन योग्य अली को प्रेरित करती है जिसका उपयोग अली के रोगजनन की जांच के लिए किया जा सकता है। जिगर की बीमारी की गंभीरता के निर्धारण सीरम ग्लूटामेट-पायरुवेट ट्रांसामिनेज (जीपीटी), ग्लूटामिक ऑक्सालोसेटिक ट्रांसामिनेज (जीएसटी) एंजाइमों और कुल बिलीरुबिन (टीबी) के साथ-साथ हेमेटोक्सिलिन और इओसिन (एच एंड ई) सना हुआ जिगर के ऊतकों द्वारा निश्चित हिस्टोलॉजिकल निदान के माप द्वारा निगरानी की जाती है। इंट्रागास्ट्रिक एक्सेस के माध्यम से सीसीएल4 के संपर्क में आने से न्यूनतम जोखिम के साथ व्यावहारिक, सस्ती, न्यूनतम आक्रामक विधि की अनुमति होती है।
Protocol
Representative Results
Discussion
इस प्रोटोकॉल में, सीसीएल4 चूहों में अली को प्रेरित करने के लिए एक जिगर विष के रूप में प्रयोग किया जाता है। अली को हेपेटिक पैरानचिमा के नुकसान और यकृत के मेटाबोलिक और सिंथेटिक कार्यों के बाद के डिस्र?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों कृतज्ञता Bertha Delgado, पैथोलॉजी विभाग, Soroka मेडिकल सेंटर, स्वास्थ्य विज्ञान के संकाय, Negev के बेन Gurion विश्वविद्यालय, प्रयोगशाला में उसकी मदद के लिए के रूप में के रूप में अच्छी तरह से हिटोलॉजी विश्लेषण में स्वीकार करते हैं ।
Materials
| 22 G catheter BD Neoflon TM | Becton Dickinson Infusion Therapy AB | ||
| 4% buffered formaldehyde solution | Sigma – Aldrich lab materials technologies | ||
| BD Microtainer SST TM Tubes | Becton Dickinson and Company | ||
| Carbone tetrachloride | Sigma – Aldrich lab materials technologies | CAS 56-23-5 | |
| Isofluran, USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | ||
| Olympus AU2700 Chemistry-Immuno Analyzer | Olympus (MN, USA) | Analysis of blood samples was done by the fluorescence method | |
| Olympus BX 40 microscope | Olympus | ||
| RAT Feeding Needles | ORCHID SCIENTIFICS | ||
| SYRINGE SET 1 and 2 ml MEDI -PLUS | Shandong Zibo Shanchuan Medical Instruments Co., Ltd |
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