Göz Yüzeyi Hastalıklarının Tedavisinde Trombositten Zengin Plazma Lizat
Summary
Trombosit lizatları, oküler yüzey hastalıklarının tedavisinde ortaya çıkan bir araçtır. Burada, trombosit donörlerinden toplanan trombosit lizatının hazırlanması, dağıtılması, depolanması ve karakterizasyonu için bir yöntem öneriyoruz.
Abstract
Çeşitli oküler yüzey hastalıkları kan kaynaklı göz damlaları ile tedavi edilir. Göz yüzeyi yenilenmesini destekleyen metabolit ve büyüme faktörü içeriği nedeniyle kullanımları klinik pratikte tanıtılmıştır. Kan bazlı göz damlaları, farklı kaynaklardan (yani, tam kan veya trombosit aferez bağışı) ve farklı protokollerle (örneğin, farklı seyreltmeler ve donma / çözülme döngüleri) hazırlanabilir. Bu değişkenlik, klinik protokollerin standardizasyonunu ve dolayısıyla klinik etkinliklerinin değerlendirilmesini engellemektedir. Metodolojik prosedürlerin detaylandırılması ve paylaşılması, ortak kılavuzların tanımlanmasına katkıda bulunabilir. Son yıllarda, allojenik ürünler, daha yüksek etkinlik standartlarını garanti ettikleri için otolog tedavilere alternatif olarak yayılmaktadır; Bunlar arasında, trombositten zengin plazma lizat (PRP-L) göz damlaları basit üretim prosedürleri ile hazırlanır. İtalya’nın AUSL-IRCCS di Reggio Emilia kentindeki transfüzyon tıbbı ünitesinde PRP-L, trombosit-aferez bağışından elde edilir. Bu ürün başlangıçta% 0.9 NaCl’de 0.3 x 10 9 trombosit / mL’ye (ortalama 1 x 109 trombosit / mL konsantrasyonundan başlayarak) seyreltilir. Seyreltilmiş trombositler dondurulur / çözülür ve daha sonra kalıntıları gidermek için santrifüj edilir. Son hacim 1.45 mL alikotlara bölünür ve -80 ° C’de saklanır. Hastalara dağıtılmadan önce, göz damlaları sterilite açısından test edilir. Hastalar trombosit lizatlarını 1 aya kadar -15 ° C’de saklayabilirler. Büyüme faktörü bileşimi rastgele seçilmiş alikotlardan da değerlendirilir ve ortalama değerler burada bildirilir.
Introduction
Kan türevi ürünler yara bakımı1, maksillofasiyal ve ortopedik cerrahide ve kuru göz hastalığı (DED)3 gibi farklı oküler yüzey hastalıklarının2 tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. DED’de, gözyaşı filmi homeostazı, gözyaşı üretimi ve oküler yüzey bütünlüğünde rol oynayan farklı faktörlerin anormal işleyişinin bir sonucu olarak bozulur 4,5.
DED, nedenler ve şiddet 6,7,8’de heterojenlik ile karakterizedir ve yaşlanma, cinsiyet9, kontakt lensler, topikal veya sistemik ilaçlar 10 veya Sjögrensendromu 10 gibi önceden var olan durumlar gibi farklı faktörlerin bir sonucu olabilir. Hafif semptomlara sahip olmasına rağmen, DED dünya çapında milyonlarca insanı etkileyerek yaşam kalitelerini ve sağlık sistemlerini de etkilemektedir6.
Bu patoloji için birçok tedavi bildirilmiştir, ancak en etkili çözüm12 üzerinde hala bir fikir birliği yoktur. Bugüne kadar, yapay gözyaşları, gözyaşı filminin sulu bileşimini restore etmeyi amaçlayan ilk tedavi hattıdır, ancak bu ikameler, doğal gözyaşlarının ana biyolojik olarak aktif solutlarını içermez 6,11. Trombosit bazlı ürünler suni gözyaşlarına12,13 oranında geçerli bir alternatif olarak kabul edilir, ancak klinik etkinlikleri, kullanım önerileri ve preparat yöntemleri hala tartışma konusudur3.
Kan bazlı ürünler, metabolitler14, proteinler, lipitler, vitaminler, iyonlar, büyüme faktörleri (GF’ler), antioksidan bileşikler11 ve ozmolarite (300 mOsm / L) 11 açısından gözyaşları ile benzer bir bileşimi paylaşır. Bileşenlerinin sinerjik aktivitesi sayesinde, kornea epitelinin yenilenmesini teşvik eder, enflamatuar sitokinlerin salınımını inhibe eder ve kadeh hücrelerinin sayısını ve konjonktiva 2,3’teki müsinlerin ekspresyonunu arttırır.
Şimdiye kadar, oftalmik kan bazlı ürünlerdeki heterojenlik literatürde belgelenmiştir; Bu ürünler kan bağışçılarının kökenine, yani otolog veya allojenik olana ve ayrıca kan kaynağına, yani periferik kan, kordon kanı, serum veya trombositlere göre sınıflandırılabilir.
Otolog ürünler en yaygın3 olmasına rağmen, allojenik ürünler artık tercih edilen seçenek haline gelmektedir, çünkü daha yüksek etkinlik ve güvenlik standartları 15 ve maliyetlerde önemli bir azalma sağlamaktadır16,17. Önceki çalışmalar, otoimmün ve / veya sistemik hastalıkları olan hastalardan elde edilen kan bazlı ürünlerin değişmiş kalite ve işlevsellik gösterebileceğini kanıtlamıştır 6,16,17. Serum bazlı göz damlalarının en yaygın olmasına rağmen, trombosit bazlı ürünler son zamanlarda geçerli bir alternatif olarak onaylanmaktadır, çünkü önemli etkinlik seviyelerini korurken kolayca hazırlanabilirler 3,11. Şu anda mevcut trombosit bazlı ürünler, trombositten zengin plazma (PRP), trombositten zengin plazma lizatı (PRP-L) ve büyüme faktörleri bakımından zengin plazma (PRGF)3 olarak ayrılabilir.
Bunlar arasında PRP-L, uzun ömürlü dondurulmuş bir ürün olma avantajına sahiptir. PRP-L, aferez, kabarık paltolar ve hatta süresi dolan trombositlerden (PLT’ler)18,19 hazırlanabilir ve bu da israflarını değerli bir şekilde azaltır. Alikotlar, -80 ° C’de kan transfüzyon merkezlerinde veya hatta hastaların evlerinde -15 ° C’de daha kısa süreler için aylarca saklanabilir.
PRP-L, göz yüzeyi rejenerasyonunu uyardığı kanıtlanmış GF’lerde oldukça zenginleştirilmiştir12,20,21. Bununla birlikte, bu alanda bildirilen çok az sayıda klinik çalışma vardır ve hepsinde otolog kaynaklarkullanılmıştır 3,22. PRP-L, göz yüzeyi hastalıklarının tedavisinde rutin olarak kullanılmadan önce hala daha fazla doğrulama ve karakterizasyona ihtiyaç duymaktadır, çünkü hazırlanması, dağıtılması ve depolanması için standartlaştırılmış bir kılavuz yoktur3.
Burada, İtalya’nın AUSL-IRCCS di Reggio Emilia kentindeki Transfüzyon Tıbbı Ünitesinde kullanılan PRP-L’nin üretimi ve DED’li hastalara dağıtılması için ayrıntılı bir protokol paylaşılmaktadır. Bilimsel topluluğun, dünya çapındaki çalışmalarda ve klinik yaklaşımlarda homojenliği ve tutarlılığı artırabilecek standart hazırlama yöntemleri geliştirmesine yardımcı olmayı amaçlıyoruz.
Protocol
Representative Results
Discussion
Son yıllarda, trombosit bazlı ürünlerin oküler yüzey patolojileri için klinik kullanımı artmıştır, ancak bilimsel sağlamlık eksikliği nedeniyle difüzyonları engellenmektedir. Bunun temel nedeni, donör kaynaklarındaki ve hazırlama protokollerindeki geniş heterojenliktir, bunlar genellikle tam olarak açıklanmayan veya dağıtıldıkları amaç için özel olarak tasarlanmamıştır. Özellikle aferez tarafından toplanan trombosit bazlı ürünler hakkında bilgi halen eksiktir. Bu nedenle bu çalı?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar, donör kaynaklı trombosit konsantreleri sağladığı için “Casa del Dono di Reggio Emilia” ya teşekkür etmek istiyor.
Materials
| Equipments | |||
| CompoSeal Mobilea II | Fresenius Kabi, Germany | bag sealer | |
| HeraSafe hood | Heraeus Instruments, Germany | Class II biohazard hood | |
| MCS+ 9000 Mobile Platelet Collection System | Haemonetics, Italy | automated plasma and multicomponent collection equipment for donating platelet, red cell, plasma, or combination blood components | |
| Platelet shaker, PF396i | Helmer, USA | Platelet shaker | |
| Raycell X-ray Blood Irradiator | MDS Nordion, Canada | X-ray Blood Irradiator | |
| ROTIXA 50RS | Hettich Zentrifugen, Germany | High speed entrifuge | |
| Sysmex XS-1000i | Sysmex Europe GMBH, Germany | haemocytometer for platelet count | |
| Warm bath, WB-M15 | Falc Instruments, Italy | Warm bath | |
| Materials | |||
| ACD-A anticoagulant solution A | Fenwal Inc., USA | DIN 00788139 | anticoagulant solution for platelet apheresis (1000 ml) |
| BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials | BD Biosciences, USA | BD 442020 | Sterility assay |
| BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials | BD Biosciences, USA | 442020 | At least 2 vials for sterility assay |
| BD Luer Lok Syringe | BD Plastipack, USA | 300865 | At least 4 sterile syringes (50 ml) |
| Bio-Plex Human Cancer Panel 1 | BioRad Laboratories, USA | 171AC500M | Standard panel for PDGF isoforms assessment |
| Bio-Plex Human Cancer Panel 2 | BioRad Laboratories, USA | 171AC600M | Standard panel for EGF assessment |
| Bio-Plex MAGPIX Multiplex Reader | BioRad Laboratories, USA | Magpix | This instrument allows multiple immunoassays using functionalized magnetic beads. |
| Bio-Plex Pro TGF-b Assay | BioRad Laboratories, USA | 10024984 | Set and standards for TGFb isoforms assessment |
| BioRet | ARIES s.r.l., Italy | A2DH0020 | At least 4 piercing spike for blood bags |
| Blood collection tube | BD Vacutainer, USA | 367835 | 1 tube, necessary to perform platelet counts |
| Eye drops kit. COL Medical Device for the application and preservation of eye drops from haemocomponents | Biomed Device s.r.l., Italy | COLC50 | Eye drops kit. At least 2 kits for each PRP unit collected |
| Human Cancer PDGF-AB/BB Set 1x96well | BioRad Laboratories, USA | 171BC511 | Set for PDGF isoforms assessment |
| Human Cancer2 EGF Set 1x96well | BioRad Laboratories, USA | 171BC603M | Set for EGF assessment |
| NaCl 0.9% sterile solution | Baxter S.p.A., Italy | B05BB01 | 1000 ml |
| OSDI Questionnaire | Allergan Inc., USA | OSDI | Ocular Surface Disease Index Questionnaire |
| Piercing spike | BioRet ARIES s.r.l., Italy | BS051004 | Spike |
| Platelet Additive Solution A+ T-PAS+ | TERUMO BCT Inc., Italy | 40842 | preservative solution for platelet concentrates (1000 ml) |
| Software Excel | Microsoft, USA | Excel | Data analysis software |
| Teruflex Transfer bag 1000 ml | TERUMO BCT Inc., Italy | BB*T100BM | 1 for PRP dilution |
| Teruflex Transfer bag 300 ml | TERUMO BCT Inc., Italy | BB*030CM | At least 6 for each PRP unit collected |
References
- Everts, P. A., et al. Platelet-rich plasma and platelet gel: A review. The Journal of Extra-Corporeal Technology. 38 (2), 174 (2006).
- Giannaccare, G., et al. Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases. Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).
- Bernabei, F., et al. Blood-based treatments for severe dry eye disease: The need of a consensus. Journal of Clinical Medicine. 8 (9), 1478 (2019).
- Findlay, Q., Reid, K. Dry eye disease: When to treat and when to refer. Australian Prescriber. 41 (5), 160-163 (2018).
- Clayton, J. A. Dry eye. New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).
- Jones, L., et al. TFOS DEWS II management and therapy report. The Ocular Surface. 15 (3), 575-628 (2017).
- Holland, E. J., Darvish, M., Nichols, K. K., Jones, L., Karpecki, P. M. Efficacy of topical ophthalmic drugs in the treatment of dry eye disease: A systematic literature review. The Ocular Surface. 17 (3), 412-423 (2019).
- Shih, K. C., Lun, C. N., Jhanji, V., Thong, B. Y. H., Tong, L. Systematic review of randomized controlled trials in the treatment of dry eye disease in Sjogren syndrome. Journal of Inflammation. 14, 26 (2017).
- Rusciano, D., et al. Age-related dry eye lactoferrin and lactobionic acid. Ophthalmic Research. 60 (2), 94-99 (2018).
- Craig, J. P., et al. TFOS DEWS II definition and classification report. The Ocular Surface. 15 (3), 276-283 (2017).
- Drew, V. J., Tseng, C. L., Seghatchian, J., Burnouf, T. Reflections on dry eye syndrome treatment: Therapeutic role of blood products. Frontiers in Medicine. 5, 33 (2018).
- Giannaccare, G., et al. Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases. Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).
- Acebes-Huerta, A., et al. Platelet-derived bio-products: Classification update, applications, concerns and new perspectives. Transfusion and Apheresis Science. 59 (1), 102716 (2020).
- Quartieri, E., et al. Metabolomics comparison of cord and peripheral blood-derived serum eye drops for the treatment of dry eye disease. Transfusion and Apheresis Science. 60 (4), 103155 (2021).
- Badami, K. G., McKellar, M. Allogeneic serum eye drops: Time these became the norm. British Journal of Ophthalmology. 96 (8), 1151-1152 (2012).
- Hwang, J., et al. Comparison of clinical efficacies of autologous serum eye drops in patients with primary and secondary Sjögren syndrome. Cornea. 33 (7), 663-667 (2014).
- Chiang, C. C., Lin, J. M., Chen, W. L., Tsai, Y. Y. Allogeneic serum eye drops for the treatment of severe dry eye in patients with chronic graft-versus-host disease. Cornea. 26 (7), 861-863 (2007).
- Jonsdottir-Buch, S. M., Lieder, R., Sigurjonsson, O. E. Platelet lysates produced from expired platelet concentrates support growth and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells. PLoS One. 8 (7), 68984 (2013).
- Altaie, A., Owston, H., Jones, E. Use of platelet lysate for bone regeneration – Are we ready for clinical translation. World Journal of Stem Cells. 8 (2), 47-55 (2016).
- Vesaluoma, M., Teppo, A. M., Grönhagen-Riska, C., Tervo, T. Platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) in tear fluid: A potential modulator of corneal wound healing following photorefractive keratectomy. Current Eye Research. 16 (8), 825-831 (1997).
- Zheng, X., et al. Evaluation of the transforming growth factor β activity in normal and dry eye human tears by CCL-185 cell bioassay. Cornea. 29 (9), 1048 (2010).
- Zamani, M., et al. Novel therapeutic approaches in utilizing platelet lysate in regenerative medicine: Are we ready for clinical use. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 17172-17186 (2019).
- Ministro della Salute. Disposizioni relative ai requisiti di qualità e sicurezza del sangue e degli emocomponenti. Italian Ministry of Health. , (2015).
- Aprili, G., et al. Raccomandazioni SIMTI sugli emocomponenti per uso non trasfusionale. Società Italiana di Medicina Trasfusionale e Immunoematologia. , (2012).
- Schiroli, D., et al. Comparison of two alternative procedures to obtain packed red blood cells for β-thalassemia major transfusion therapy. Biomolecules. 11 (11), 1638 (2021).
- Pulcini, S., et al. Apheresis platelet rich-plasma for regenerative medicine: An in vitro study on osteogenic potential. International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8764 (2021).
- Ohashi, Y., et al. Presence of epidermal growth factor in human tears. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 30 (8), 1879-1882 (1989).
- Vitale, S., Goodman, L. A., Reed, G. F., Smith, J. A. Comparison of the NEI-VFQ and OSDI questionnaires in patients with Sjögren’s syndrome-related dry eye. Health Quality of Life Outcomes. 2, 44 (2004).
- Schiffman, R. M., Christianson, M. D., Jacobsen, G., Hirsch, J. D., Reis, B. L. Reliability and validity of the Ocular Surface Disease Index. Archives of Ophthalmology. 118 (5), 615-621 (2000).
- Zhang, J., et al. Characteristics of platelet lysate compared to autologous and allogeneic serum eye drops. Translational Vision Science and Technology. 9 (4), 24 (2020).
- Henschler, R., Gabriel, C., Schallmoser, K., Burnouf, T., Koh, M. B. Human platelet lysate current standards and future developments. Transfusion. 59 (4), 1407-1413 (2019).
- Samarkanova, D., et al. Clinical evaluation of allogeneic eye drops from cord blood platelet lysate. Blood Transfusion. 19 (4), 347-356 (2021).
- Strunk, D., et al. International Forum on GMP-grade human platelet lysate for cell propagation: Summary. Vox Sanguinis. 113 (1), 80-87 (2018).
- Schiroli, D., et al. The impact of COVID-19 outbreak on the Transfusion Medicine Unit of a Northern Italy Hospital and Cancer Centre. Vox Sanguinis. 117 (2), 235-242 (2021).
- Klatte-Schulz, F., et al. Comparative analysis of different platelet lysates and platelet rich preparations to stimulate tendon cell biology: An in vitro study. International Journal of Molecular Science. 19 (1), 212 (2018).
- Fea, A. M., et al. The effect of autologous platelet lysate eye drops: An in vivo confocal microscopy study. BioMed Research International. 2016, 8406832 (2016).
- Abu-Ameerh, M. A., et al. Platelet lysate promotes re-epithelialization of persistent epithelial defects: A pilot study. International Ophthalmology. 39 (7), 1483-1490 (2019).
- Geremicca, W., Fonte, C., Vecchio, S. Blood components for topical use in tissue regeneration: evaluation of corneal lesions treated with platelet lysate and considerations on repair mechanisms. Blood Transfusion. 8 (2), 107-112 (2010).
- De Paiva, C. S., et al. Disruption of TGF-β signaling improves ocular surface epithelial disease in experimental autoimmune keratoconjunctivitis sicca. PLoS One. 6 (12), 29017 (2011).
