Summary
Den foreliggende protokollen beskriver en metode for å levere medikamenter og genuttrykksmodifiserende midler perivaskulært i et in utero utviklende foster. Det er viktig at effekten av medisiner / midler på blodstrømmen kan måles med graviditetens progresjon.
Abstract
En organismes evne til å opprettholde en konstant blodstrøm til hjernen som respons på plutselige økninger i systemisk blodtrykk (BP) er kjent som cerebral autoregulering (CAR), som forekommer i halspulsåren. I motsetning til fullbårne nyfødte, er premature nyfødte ikke i stand til å redusere cerebral blodstrøm (CBF) som respons på økt systemisk BP. Hos premature nyfødte utsetter dette de skjøre hjerneskarene for høyt perfusjonstrykk, noe som fører til brudd og hjerneskade. Ex vivo-studier ved bruk av trådmyografi har vist at halspulsårene fra kortsiktige fostre trekker seg sammen som respons på aktivering av adrenerge alfa1-reseptorer. Dette svaret er avstumpet i det premature fosteret. For å undersøke rollen som alfa-1-AR in vivo, presenteres her en innovativ tilnærming for å bestemme effekten av legemidler på et halspulsårig segment in vivo i et sauefest under utviklingsprogresjonen av svangerskapet. De presenterte dataene viser samtidig måling av føtal blodstrøm og blodtrykk. Det perivaskulære leveringssystemet kan brukes til å gjennomføre en langsiktig studie over flere dager. Ytterligere anvendelser for denne metoden kan inkludere virale leveringssystemer for å endre uttrykket av gener i et segment av halspulsåren. Disse metodene kan brukes på andre blodkar i den voksende organismen i utero så vel som i voksne organismer.
Introduction
Fødsel forårsaker stress for fosteret, og det er en betydelig økning i nivåene av katekolamin, det viktigste stresshormonet 1,2. Dette øker det systemiske BP, og hvis dette trykket overføres til de skjøre hjernekapillærene via halspulsårene, kan dette føre til brudd 3,4,5. Overspenninger i systemisk BP forhindres i å nå hjernen ved innsnevring av karoten arterier i fulltidsfosteret. Denne mekanismen er imidlertid ikke utviklet i det premature fosteret, og dette er ansvarlig for den betydelig høyere sannsynligheten for hjerneskade hos premature fostre 4,5.
For tiden finnes det ingen egnet metode for å undersøke modningen av veiene som er involvert i regulering av karoten blodstrøm med utviklende fostre. Disse studiene på carotis blodstrøm og vasoresponsivitet er avgjørende fra både grunnleggende vitenskap og kliniske perspektiver. For tiden, for å bestemme molekylære veier involvert i reguleringen av arteriell kontraktilitet, innebærer standardmetoden å isolere arterielle segmenter postmortem. Deretter utføres forsøkene ved hjelp av trådmyografi for å bestemme vasokontraktiliteten til forskjellige farmakologiske molekyler som definerer regulatoriske veier involvert i arteriell kontraktilitet 6,7. Merk at ex vivo-funnene ikke er i stand til å replikere in vivo-miljøet fullt ut på grunn av blodstrømsreguleringen oppstrøms og nedstrøms for halspulsåren. Dermed har denne studien som mål å utvikle en teknikk som kan bestemme effekten av vasoresponsive kjemikalier eller midler på blodstrømmen i en arterie in vivo.
Den perivaskulære leveringsmetodikken beskrevet i denne artikkelen gir en in vivo tilnærming for å studere effekten av farmakologisk eller genetisk manipulering av signalveier på forskjellige arterielle segmenter. Ved hjelp av denne metoden kan man manipulere fosterets blodtrykk og karoten blodstrøm. I tillegg er eksperimenter med sauefostre demonstrert for å studere effekten av signalmolekyler i et utviklende foster. Forhåpentligvis vil den detaljerte metodikken som tilbys føre til nye undersøkelser innen blodstrømsstudier, spesielt i forhold til fosterfysiologi og patologi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
For denne studien ble godkjenning for dyreforsøkene innhentet fra Animal Care and Use Committee ved University of Arizona. En tidsparret, drektig Columbia-Rambouillet-søyer mellom 2-4 år ble brukt i denne studien. Dyrene ble hentet fra University of Arizona Sheep Unit.
1. Vedlikehold av dyr
- Få tak i dyr fra hvilken som helst sauegård.
- Transporter søyene til laboratoriet i 105 dager ± 5 dager til 137 dager ± 5 dagers svangerskapsalder (dGA). Hold sauene ved en temperatur på 22 °C ± 1 °C i omgivelsesfuktighet. Gi alfalfa pellets (se tabell over materialer), salter og vann ad libitum.
2. Materiell forberedelse
- Konstruer det perivaskulære katetersystemet.
- Koble den ene enden av 4 fot Tygon-slange til et 2 cm manifoldpumperør (MPT) (se materialfortegnelse). Fest den andre enden av 2 cm MPT til et annet 4 fot Tygon-rør.
- Lag en liten spalt i MPT slik at væsken/midlene kan komme ut i det perivaskulære rommet.
- Steriliser strømningssondene (se materialfortegnelse), katetre og en liten skrutrekker ved hjelp av gasssteriliseringsmetoden.
3. Prekirurgisk dyreforberedelse
- Få godkjenning for dyreforsøk fra Institutional Animal Care and Use Committee.
- Før operasjonen, hold søyene på null per os (NPO) mat i 24 timer og NPO vann i 16 timer. På operasjonsdagen, pakk søyens ansikt med en pute for å beskytte øynene. Barber venstre side av nakken for å eksponere halsvenen, og rengjør huden med povidon-jod og 70% etanol.
- Plasser et intravenøst (IV) kateter i vena jugularis og fest det til huden med vanntett tape og sårklemmer (se materialfortegnelse).
- Bedøv søyene med i.v. administrering av diazepam (0,15 mg/kg) og ketaminhydroklorid (16 mg/kg). Administrer en IM-injeksjon av penicillin G prokainsuspensjon (25 000 I / kg) og IV ketoprofen (2,2 mg / kg) (se materialtabellen).
- Barbere snittstedet til sauene og de omkringliggende områdene (mage, flanker og lyske) med # 10 bladklippere. For å sikre at ullen er helt fjernet, barber du området på nytt med et #40-blad. Vask det barberte området med et bakteriedrepende rengjøringsmiddel (se materialfortegnelse) og vann. Tørk med en engangspute.
- Bekreft anestesidybden (bestemt og vedlikeholdt ved respons på hudklemme, hornhinnerefleks og vurdering av kjevetone), og intuber deretter søyen med et 6,5-7,5 mm endotrakealrør med indre diameter (se materialtabell), og fest røret på plass. Plasser søyen på et løftebord i lateral liggende stilling, og overfør til et V-topp kirurgisk bord i liggende stilling.
- Fest søyens lemmer til V-topp operasjonsbordet med kirurgiske bindinger. Ta ewe inn i Trendelenburg-posisjonen for å lette presset på foster-placenta-enheten.
- Fest en pulsoksymetersonde (se materialfortegnelse) til søyens tunge / øre for kontinuerlig å overvåke oksyhemoglobinmetningen og hjertefrekvensen. Plasser et termometer under søyens tunge for å overvåke temperaturen.
- Koble endotrakealrøret til anestesimaskinens respiratoriske kretsløp, og start mekanisk ventilasjon mens du overvåker den utgåtte CO2.
- Oppretthold anestesien ved å justere isofluran mellom 2,5% -4% gjennom hele operasjonen. Sørg for at dyret er tilstrekkelig bedøvet ved å klemme på øret. Administrer en balansert polyionisk (saltvann 0,9 % w/v) oppløsning ved 5 ml/kg/time ved bruk av jugulær kateter plassert i trinn 3.2.1.
- Utfør en steril skrubbe. Spray bukområdet og flankene med povidonoppløsning (10% jodoppløsning). Skrubb området med en jod-gjennomvåt gasbind som starter fra snittstedet og arbeider utover, og sørg for ikke å gå tilbake til sentrum etter å ha skrubbet utover.
- Spray deretter området med etanol (70% etanol w / v), og skrubb med en etanol-gjennomvåt gasbind på samme måte som skrubbing med povidon. Gjenta hele prosessen tre ganger. Spray området med povidonoppløsning.
- Varm saltvann i en steril beholder, og bring den til 37 °C. Hold dette nær operasjonsbordet. Koble kauteriet (se Materialfortegnelse).
- Få de kirurgiske teammedlemmene til å kle seg i caps, ansiktsmasker og skodeksler, vaske hendene (kirurgisk skrubb) og ta på steriliserte kirurgiske kjoler og hansker. Fra dette tidspunktet må en streng steril kirurgisk praksis følges.
- Draper den steriliserte sauens mageområde med sterile håndklær.
4. Kirurgisk prosedyre
- Eksteriorisering av fosteret
- Etter å ha sikret en tilstrekkelig dybde av anestesi, utfør et 10 cm standard laparotomi snitt ved hjelp av en skalpell (# 20 blad) over linea alba fra navlestrengen til kranialdelen av juret. Kontroller blødningen mens du gjør et snitt med et cautery (strøminnstillinger: 50 kutt og 25 koagulasjon).
- Lag et lite snitt gjennom midtlinjen av kroppsveggen under hudsnittet, og åpne bukhulen med Metzenbaum-saks (se materialfortegnelse).
- Eksteriorisere livmoren som inneholder fosteret gjennom bukveggen mens du plasserer sterile kirurgiske håndklær under (mellom mors mage og livmor). Palpere livmoren for å bestemme fosterstilling og cotyledoner. Bruk en cautery, gjør en ~ 10 cm snitt gjennom livmorveggen med en stor krumning over dorsum av hodet, unngå synlige blodkar og placentomes.
- Bruk fire Babcock-klemmer (se materialfortegnelse) for å sikre livmor og placentamembraner, og trekk Babcock-klemmene i de fire motsatte hjørnene for å gjøre fosterhodet synlig. Eksterioriser den kraniale halvdelen av fosteret gjennom dette snittet, og dekk fosterhodet med en steril, ikke-latekshanske fylt med varmt, sterilt saltvann (37 °C) for å forhindre pustestart.
- Etter å ha sikret en tilstrekkelig dybde av anestesi, utfør et 10 cm standard laparotomi snitt ved hjelp av en skalpell (# 20 blad) over linea alba fra navlestrengen til kranialdelen av juret. Kontroller blødningen mens du gjør et snitt med et cautery (strøminnstillinger: 50 kutt og 25 koagulasjon).
- Instrumentering av halspulsåren perivaskulært kateter
- Når du fjerner fosterhodet fra livmoren, må du få en assistent til å holde Babcock-tangen forsiktig oppreist for å minimere fostervannstap. Med fosterets hals eksponert, utfør et 3-3,5 cm skrå hudsnitt langs den fremre grensen til sternoleidomastoid (SCM) muskel på den ene siden av nakken i midtregionen, og skille fascia med myggtang.
- Del platysma, og utfør en disseksjon langs mediale grensen til SCM-muskelen fra senen overlegen nivået av omohyoidmuskelen dårligere. Tilbaketrekking av SCM vil eksponere halsbrekket, som overfladisk inneholder en tynnvegget indre jugularven, og under den vil det være halspulsåren som et tykkvegget kar.
- Trekk huden tilbake med Babcock-klemmer, og utfør en stump disseksjon for å frigjøre halspulsåren fra det omkringliggende vevet og carotisarket.
- Ta 3 mm strømningssonden (se materialfortegnelsen) fra den sterile pakningen, skru av sondens bakplate og skyv den åpen for å eksponere L-braketten. Løft forsiktig halspulsåren, og hekt forsiktig braketten under fartøyet mens du unngår kontakt med fartøyet.
- Bruk tang til å lukke strømningsprobebraketten ved å skyve bakplaten forsiktig til lukket stilling. Fest strømningssondebraketten ved å stramme underskruen på strømningssonden. For å lette denne prosessen, ta forsiktig tak i endene av strømningssonden med tang for å stabilisere strømningssonden mens skruen strammes.
- Forskyll det perivaskulære kateteret, og plasser det i umiddelbar nærhet av halspulsåren proksimalt for strømningssonden. Sørg for at den åpne spalten av det perivaskulære kateteret er i nærheten av halspulsåren.
- Med en 3-0 silke ikke-absorberbar sutur, fest de proksimale og distale endene av det perivaskulære systemet og strømningssonden til det nærliggende interstitielle vevet. Lukk snittstedet ved hjelp av en kontinuerlig søm, lukk fosterhuden med en 3-0 silke ikke-absorberbar sutur, og fest katetrene til huden ved å vikle suturen rundt kateteret tre ganger. Fjern hansken, og legg fosterhodet tilbake i livmoren.
- Når du fjerner fosterhodet fra livmoren, må du få en assistent til å holde Babcock-tangen forsiktig oppreist for å minimere fostervannstap. Med fosterets hals eksponert, utfør et 3-3,5 cm skrå hudsnitt langs den fremre grensen til sternoleidomastoid (SCM) muskel på den ene siden av nakken i midtregionen, og skille fascia med myggtang.
- Kateterisering av fosterets lemmer
- Utvend fosterets bakben. Hold benet, og vri det sidelengs for å visualisere det indre lårområdet. Rengjør området med sterilt gasbind, utfør et snitt på 2 cm og utsett lårarterien. Plasser og fest strømningssonden etter en lignende prosedyre som gjort med karoten, og lukk deretter snittet.
- Lag et snitt på 2 cm langs det mediale aspektet av tibia ~0,5 cm distalt for kneet. Utsett den bakre tibialarterien (tykkvegget) og saphenøs vene (tynnvegget). Sett polyvinylkatetre (ytre diameter: 1,4 mm og indre diameter: 0,9 mm) inn i den bakre tibialarterien og saphenøse venen ved hjelp av en standard nedskjæringsteknikk, som nevnt nedenfor:
- Frigjør fartøyet av interesse med stump disseksjon. Liger den distale delen av fartøyet med en 3-0 silkesutur (uten nål) ved hjelp av en firkantet knute med tre kast. Plasser et nytt silkefritt slips på det proksimale aspektet av fartøyet (under fartøyet), men la ligaturen være ubundet. Bruk Castroviejo saks (se materialfortegnelse), gjør en liten, tverrgående kutt i beholderen 2 mm proksimal til den distale ligaturen. Lengden på kuttet skal være ~ 25% av fartøyets diameter.
- Begrens fartøyets blodstrøm ved forsiktig å trekke opp på den proksimale, ubundne suturen. Fyll kateteret med sterilt heparinisert saltvann. Sett inn den fasede enden av kateteret, og før spissen 20 cm inn i fosterkaret.
- Hold kateteret på plass med tang mens en assistent binder den proksimale silkefrie sufturen for å feste fartøyet til kateteret; Liger beholderen helt rundt det innsatte kateteret ved hjelp av firkantede knuter 2 mm fra innføringsstedet med tre kast. Bind den distale ligaturen proksimalt til det proksimale båndet som fester karet til kateteret.
- Lukk hudsnittet med en 3-0 silke ikke-absorberbar sutur ved hjelp av et kontinuerlig suturmønster. Sørg for at suturene er bundet rundt katetrene for å unngå å begrense blodstrømmen hvis de trekkes. Plasser et forspylt kateter i livmoren, og fest det til fosteret med en sutur ved hjelp av en 3-0 ikke-absorberbar silkeutur.
5. Plassere fosteret tilbake og lukke såret
- Returner fosteret til livmoren. Sutur fostermembranene ved hjelp av 3-0 ikke-absorberbare silkessuturer med et kontinuerlig låsemønster (Cushing). Lukk livmormuskellaget med en 3-0 ikke-absorberbar silkeutur.
- Sett en 18 i rustfritt stål kirurgisk stang subkutant langs bukveggen opp til parakostalområdet. La den proksimale enden av stangen gå ut av parakostalstedet ved å utføre et 1 cm snitt.
- Fest katetre til den distale enden av operasjonsstangen, og la en assistent mate katetrene og strømningssondekabelen gjennom paracostalutgangsstedet ved å skyve stangen helt gjennom parakostalåpningen.
- Fest alle katetre og strømningssondekabler på parakostalsnittstedet. Plasser med vanntett tape, og syr katetrene til huden på søyen. Sutur en plastpose til utsiden av ewe over katetrene og sonde for å lagre katetrene.
- Bruk et 1-0 monofilament syntetisk absorberbart suturmateriale, fest linea alba med et kontinuerlig mønster. Fest hudlaget med kirurgiske stifter.
- Stopp narkosen, og ekstuber ewe når larynxrefleksene har returnert til normal baseline. Ikke la dyret være uten tilsyn før det har gjenvunnet fullstendig bevissthet. Flytt søyen til stoffskiftevognen når hun er stabil etter narkose. Sett dyret tilbake til det postoperative forsøksrommet etter fullstendig gjenoppretting fra anestesien.
- Postoperative analgetika administreres intravenøst (fenylbutazon 10 mg/kg/dag) i 3 dager. Skyll vaskulære katetre daglig med heparinisert saltoppløsning (100 E/ml heparin i 0,9 % NaCl-oppløsning).
6. Postoperative in vivo-eksperimenter
- Skyll katetrene hver dag med heparinisert saltvann (75 E/ml). Vent i 72 timer før du foretar noen målinger. For å måle blodstrømmen, fest strømningssondene som er satt inn i fosteret med den perivaskulære strømningsmodulen til PowerLab og en tilkoblet datamaskin.
MERK: Opptakene kan gjøres på PowerLab-programvaren (se Materialfortegnelse) for å måle carotis og femoral blodstrøm. Ta basismålingen i 30 minutter. - Fest arterielle og amniotiske katetre til broforsterkeren festet til en analog-til-digital-omformer (se materialfortegnelse). Administrer en 1 ml bolus på 10 uM fenylefrin til fosteret intravenøst, og mål carotis og femoral flow i 15 minutter. Vent deretter i 30 minutter eller til blodstrømmen går tilbake til baseline.
- Tilfør 1 ml 10 uM fenylefrin i det perivaskulære kateteret, og mål blodstrømmen i 15 minutter. Vask ut fenylefrinet ved å administrere 5 ml varm saltvann gjennom det perivaskulære kateteret. Vent deretter i 30 minutter eller til blodstrømmen går tilbake til baseline.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For å undersøke lokalisert in vivo manipulering av blodstrømmen, ble 1 ml fenylefrin (10 μM), en α 1-AR-agonist, administrert inn i det perivaskulære rommet av halspulsåren av et eksteriorisert infusjonskatetisk for å bestemme effekten på den lokale carotisblodstrømmen og effekten på det systemiske blodtrykket. Figur 1A viser en signifikant reduksjon i carotisblodstrømmen uten noen effekt på systemisk blodtrykk hos kortbåren fostersau. Figur 1B viser de samme dataene for et for tidlig foster. Administrering av 1 ml PHE ved IV-ruten økte den systemiske blodstrømmen uten å påvirke carotisblodstrømmen hos føtale sauer på kort sikt (figur 1C). Figur 1D viser de samme dataene for et for tidlig foster. I motsetning til dette hadde administrering av PHE ved et perivaskulært kateter ingen effekt hos premature sauer; Intravenøs administrering forårsaket imidlertid en signifikant økning i både carotisblodstrømmen og systemisk BP. Dette eksperimentet demonstrerer en fullt funksjonell perivaskulær hylse som kan regulere blodstrømmen i halspulsåren in utero uten å påvirke systemisk BP. Resultatene viser at premature fostre ikke reagerer på fenylefrinmediert carotisblodstrømregulering; Responsen er imidlertid moden hos korttidsfostre (figur 1E). Det er viktig at IV-administrering av PHE økte carotisblodstrømmen bare hos premature fostre, uten signifikant effekt hos kortsiktige fostre (figur 1G). Imidlertid økte IV-administrering av PHE det systemiske blodtrykket hos både premature og nærtidsfostre (figur 1H). Resultatene viser også at perivaskulær instillasjon av fenylefrin ikke hadde noen effekt på det systemiske blodtrykket (figur 1F).
Figur 1: In vivo manipulering av blodstrømmen. Et eksemplarisk spor av systemisk blodtrykk og halspulsåren blodstrøm baseline målinger og endringer etter administrering av fenylefrin (PHE) gjennom perivaskulært kateter fra (A) en in utero nær sikt foster og (B) en in utero premature foster. Et eksemplarisk spor av systemisk blodtrykk og halspulsåren blodstrøm baseline målinger og endringer etter intravenøs administrering av fenylefrin (PHE) fra (C) en in utero nær sikt foster og (D) en in utero premature foster. Endringene i (E) prosentandel av carotis blodstrøm og (F) systemisk blodtrykk via perivaskulært kateterleveringssystem for kortsiktige og premature sauer er vist. Endringene i (G) prosentandel av carotisblodstrøm og (H) systemisk blodtrykk via systemisk administrasjon for kortsiktige og premature sauer er vist. Feilfeltene viser standardfeilen til gjennomsnittet. N = 4 i hver gruppe. *P < 0,05 med en Student t-test. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
For tiden finnes det ingen metode for å undersøke fartøyets kontraktilitet og dilatasjon in vivo som respons på legemiddelforbindelser og genmanipulasjon. Som standard i feltet måles in vivo blodstrøm av Doppler-strømningsprober, mikrosfærer og radioaktive molekyler som tritiert vann. For å manipulere reseptorenes funksjoner eller nedstrøms signalering, ofres dyrene, og eksperimenter utføres in vitro i organbad etter isolering av arterielle segmenter. De nåværende metodene gir en måte å utføre in vivo-manipulasjoner av arterielle segmenter ved å introdusere kjemikalier eller vektorer for å modifisere genuttrykk. Videre har denne metoden minimal effekt på systemisk sirkulasjon på grunn av lokal levering av midlene.
De nåværende forsøkene viser at administrasjonen av fenylefrin resulterer i innsnevring av halspulsåren med en reduksjon i blodstrømmen. Ovennevnte undersøkelse belyser rollen som alfa-adrenerge reseptorer i regulering av karoten arterie blodstrøm til hjernen. Denne teknikken kan brukes til å undersøke effekten av forskjellige farmakologiske forbindelser på blodstrømmen i sanntid hos levende fostre. Det perivaskulære kateteret kan også brukes til å innpode lentivirus i det perivaskulære rommet, som tas opp av vaskulaturen, for å resultere i knockdown eller overekspresjon av ønsket signalprotein eller reseptor.
I flere tiår har organ- og vevsbad gitt nyttige data om fartøyets kontraktilitet 6,8,9. Imidlertid er disse studiene ex vivo, noe som reiser spørsmål om reproduserbarheten in vivo og betyr at kontinuerlige målinger ikke kan utføres. For å overvinne denne begrensningen, undersøker denne innovative tilnærmingen blodstrømmen i halspulsåren in vivo. Et ytterligere fremskritt i denne metoden vil inkludere vedtak av genetisk modulering ved hjelp av virusleveringsmetoder, noe som gjør at arterielle segmenter kan endres genetisk for å oppregulere og nedregulere genuttrykk ved å levere shRNA eller CRISPR / Cas9.
Det kritiske trinnet i protokollen er å plassere det perivaskulære kateteret parallelt med fartøyet i umiddelbar nærhet. For at dette skal fungere, må man vite diameteren på den målrettede arterien. I tillegg er det viktig å utvikle en skikkelig hylse. Man kan plassere hylsen ved siden av arterien som skal moduleres i stedet for å omgi den. Dette vil også gi lokal levering av kjemikaliene og målrettingsmidlene.
Begrensningen av metoden er at den bare regulerer et segment av arterien, og resultatene angående organ eller vev blodstrøm bør tolkes nøye. Man kan bli pålagt å endre lengden på hylsen og mengden kjemikalier for å oppnå ønsket effekt. Metoden har brede anvendelser i modulerende genregulering hos levende fostre. Dette kan tilpasses for å modulere genfunksjon og uttrykk i en del av et hvilket som helst vev. I tillegg kan metoden brukes til å modulere genuttrykk i en voksen organisme.
Selv om det finnes andre metoder for å måle blodstrømmen in vivo , for eksempel bruk av transoniske strømningsprober10, laserdoppler11 og mikrosfærer12, tillater ingen av disse metodene å undersøke den lokale effekten av legemidlene på blodstrømmen i arterielle segmentet i motsetning til de systemiske effektene av intervensjonen. Dermed er den nåværende metoden unik, da den kan måle og modulere den lokale blodstrømmen uten systemiske effekter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen avsløringer.
Acknowledgments
Intramural midler fra University of Arizona ble brukt til disse studiene.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Aaron Bovie Electrosurgical Cautery | Henry Schein, Inc | 5905974 | |
| Aaron Bovie Electrosurgical Generator | Henry Schein, Inc | 1229913 | |
| Alfalfa Pellets | Sacate Pellet Mills, Inc. Maricopa AZ | 100-80 | |
| Analog to Digital Converter | ADI Instruments | Powerlab | |
| Babcock forceps | Roboz Surgicals | RS8020 | |
| Bridge Amplifier | ADI Instruments | Bridge Amplifier | |
| Castroviejo scissors | Roboz Surgicals | RS5650SC | |
| Diazepam | Henry Schein, Inc | 1278188 | |
| Endotracheal Tube | Henry Schein, Inc | 7020408 | |
| Flow Probes | Transonic Systems Inc. | MC2PSS-JS-WC100-CRS10-GC, MC3PSS-LS-WC100-CRS10-GC | |
| Heparin | Henry Schein, Inc | 1162406 | |
| Isoflurane | Henry Schein, Inc | 1182097 | |
| Ketamine | Henry Schein, Inc | 1273383 | |
| Ketoprofen | Zoetis Inc., Kalamazoo, MI | Ketofen | |
| Manifold Pump Tubing | Fisher Scientific | 14-190-508 | |
| Metzenbaum scissors | Roboz Surgicals | RS6010 | |
| Narkomed 4 Anesthesia Machine | North American Dräger | Narkomed 4 | |
| Normal Saline | Fisher Scientific | Z1376 | |
| penicillin G procaine suspension | Henry Schein, Inc | 7455874 | |
| phenylbutazone | VetOne Boise, ID | 510226 | |
| Phenylephrine | Sigma Aldrich Inc. | P1240000 | |
| Pivodine Scrub | VetOne | 510094 | Germicidal cleanser |
| PowerLab | ADInstruments | Data acquisition hardware device | |
| Pulse Oximeter | Amazon Inc. | UT100V | |
| Tygon Tubing | Fisher Scientific | ND-100-80 | |
| V-Top Surgical Table | VetLine Veterinary Classic Surgery | TSP-4010 | |
| Wound Clips | Fisher Scientific | 10-001-024 |
References
- Lagercrantz, H., Slotkin, T. A.
- Ronca, A. E., Abel, R. A., Ronan, P. J., Renner, K. J., Alberts, J. R. Effects of labor contractions on catecholamine release and breathing frequency in newborn rats. Behavioral Neuroscience. 120 (6), 1308-1314 (2006).
- Czynski, A., et al. Cerebral autoregulation is minimally influenced by the superior cervical ganglion in two- week-old lambs, and absent in preterm lambs immediately following delivery. PLoS One. 8 (12), e82326 (2013).
- Ballabh, P. Pathogenesis and prevention of intraventricular hemorrhage. Clinics in Perinatology. 41 (1), 47-67 (2014).
- Ballabh, P. Intraventricular hemorrhage in premature infants: Mechanism of disease. Pediatric Research. 67 (1), 1-8 (2010).
- Goyal, R., Goyal, D., Chu, N., Van Wickle, J., Longo, L. Cerebral artery alpha-1 AR subtypes: High altitude long-term acclimatization responses. PLoS One. 9 (11), e112784 (2014).
- Goyal, R., Mittal, A., Chu, N., Zhang, L., Longo, L. D. alpha(1)-Adrenergic receptor subtype function in fetal and adult cerebral arteries. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 298 (1), H1797-H1806 (2010).
- Goyal, D., Goyal, R. Developmental maturation and alpha-1 adrenergic receptors-mediated gene expression changes in ovine middle cerebral arteries. Scientific Reports. 8 (1), 1772 (2018).
- Goyal, R., et al. Maturation and the role of PKC-mediated contractility in ovine cerebral arteries. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 297 (6), H2242-H2252 (2009).
- Gratton, R., Carmichael, L., Homan, J., Richardson, B. Carotid arterial blood flow in the ovine fetus as a continuous measure of cerebral blood flow. Journal of the Society for Gynecologic Investigation. 3 (2), 60-65 (1996).
- Bishai, J. M., Blood, A. B., Hunter, C. J., Longo, L. D., Power, G. G. Fetal lamb cerebral blood flow (CBF) and oxygen tensions during hypoxia: a comparison of laser Doppler and microsphere measurements of CBF. Journal of Physiology. 546, 869-878 (2003).
- Ashwal, S., Dale, P. S., Longo, L. D. Regional cerebral blood flow: studies in the fetal lamb during hypoxia, hypercapnia, acidosis, and hypotension). Pediatric Research. 18 (12), 1309-1316 (1984).
