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Um ensaio de poliacrilamida-baseado formato multi bem para estudar o efeito da rigidez da matriz extracelular sobre a infecção bacteriana das células aderentes
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
A Multi-well Format Polyacrylamide-based Assay for Studying the Effect of Extracellular Matrix Stiffness on the Bacterial Infection of Adherent Cells

Um ensaio de poliacrilamida-baseado formato multi bem para estudar o efeito da rigidez da matriz extracelular sobre a infecção bacteriana das células aderentes

DOI:
10.3791/57361-v

•

11:51 min

•

July 05, 2018

•

, , ,
1Department of Biochemistry,Stanford University School of Medicine, 2Department of Mechanical and Aerospace Engineering,University of California San Diego, 3Departments of Biochemistry, Microbiology and Immunology and Howard Hughes Medical Institute,Stanford University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:39Manufacturing Thin Two-layered Polyacrylamide Hydrogels on Multi-well Plates
  • 01:36Polyacrylamide Hydrogel Fabrication
  • 05:22Infection of Human Microvascular Endothelial Cells with L. monocytogenes
  • 07:11Flow Cytometry to Quantify Extracellular-matrix-stiffness Dependent Susceptibility of Host Cells to Infection
  • 08:02Quantitative Time-lapse Microscopy to Assess Extracellular-matrix-stiffness Dependent L. monocytogenes Dissemination Through Endothelial Cells
  • 09:01Results: The Effect of Extracellular Matrix Stiffness on L. monocytogenes Infection of HMEC-1 Cells
  • 10:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Nós desenvolvemos um ensaio de poliacrilamida-baseado multi bem formato para sondar o efeito da rigidez da matriz extracelular em infecção bacteriana das células aderentes. Este ensaio é compatível com citometria de fluxo, imunocoloração e microscopia de força de tração, permitindo medições quantitativas das interações biomecânicas entre células, matriz extracelular e bactérias patogênicas.

Tags

PolyacrylamideExtracellular MatrixStiffnessBacterial InfectionAdherent CellsHost-pathogen BiomechanicsHydrogelsAcrylamideBis-acrylamideTEMEDAPSFluorescent Microbeads

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