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Un ensayo de base poliacrilamida formato multi-bien para estudiar el efecto de la rigidez de la matriz extracelular en la infección bacteriana de las células adherentes
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
A Multi-well Format Polyacrylamide-based Assay for Studying the Effect of Extracellular Matrix Stiffness on the Bacterial Infection of Adherent Cells
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Un ensayo de base poliacrilamida formato multi-bien para estudiar el efecto de la rigidez de la matriz extracelular en la infección bacteriana de las células adherentes

DOI:
10.3791/57361-v

•

11:51 min

•

July 05, 2018

•

, , ,
1Department of Biochemistry,Stanford University School of Medicine, 2Department of Mechanical and Aerospace Engineering,University of California San Diego, 3Departments of Biochemistry, Microbiology and Immunology and Howard Hughes Medical Institute,Stanford University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:39Manufacturing Thin Two-layered Polyacrylamide Hydrogels on Multi-well Plates
  • 01:36Polyacrylamide Hydrogel Fabrication
  • 05:22Infection of Human Microvascular Endothelial Cells with L. monocytogenes
  • 07:11Flow Cytometry to Quantify Extracellular-matrix-stiffness Dependent Susceptibility of Host Cells to Infection
  • 08:02Quantitative Time-lapse Microscopy to Assess Extracellular-matrix-stiffness Dependent L. monocytogenes Dissemination Through Endothelial Cells
  • 09:01Results: The Effect of Extracellular Matrix Stiffness on L. monocytogenes Infection of HMEC-1 Cells
  • 10:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Hemos desarrollado un ensayo de base poliacrilamida formato multi-bien para sondear el efecto de la rigidez de la matriz extracelular en la infección bacteriana de las células adherentes. Este análisis es compatible con citometría de flujo, inmunotinción y microscopía de fuerza de tracción, lo que permite mediciones cuantitativas de las interacciones biomecánicas entre las células y su matriz extracelular, las bacterias patógenas.

Tags

PolyacrylamideExtracellular MatrixStiffnessBacterial InfectionAdherent CellsHost-pathogen BiomechanicsHydrogelsAcrylamideBis-acrylamideTEMEDAPSFluorescent Microbeads

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