Introduction
Lige siden dens udvikling i midten af 1990'erne SOD1 G93A-transgene musemodel har været den mest udbredte dyremodel for amyotrofisk lateral sklerose (ALS) 1. Dette transgen musemodel blev gensplejset til at overudtrykke en mutant form af det humane Cu / Zn superoxiddismutase 1 (SOD1) genet, der huser ALS-associerede glycin til alanin-mutation ved aminosyre 93 (G93A). Den G93A mutationen er en af mange mutationer i SOD1 gen, som tilsammen make-up omkring en femtedel af familiære ALS tilfælde 2.
Den SOD1-G93A model er blevet en arbejdshest af ALS lægemiddeludvikling forskning, fordi der ud over dens indlysende genetiske link til ALS, det sammenfatter mange af de patologiske funktioner i ALS hos mennesker såsom motorisk neuron tab, progressiv muskelsvaghed og atrofi, med eventuel lammelse og død 3. Dog, som det ofte er tilfældet med transgene dyremodeller, der er en iboende bigiske variation forbundet med SOD1 G93A-mus. Scott et al. har fastslået, at der er behov for kohorter af mindst 24 kuld-matchede køns- balanceret mus i lægemiddel-effektstudie designs for at overvinde den støj, skabt af den biologiske variabilitet 4. Det store antal dyr, der kræves i disse studier i kombination med den aggressive sygdomsprogression og behovet for daglig overvågning forbyder brugen af udførlige, tidskrævende og potentielt stressende teknikker til måling af neuromuskulær styrke og funktion (f.eks, elektromyografi, gribestyrke, roterende stang etc.). I stedet fremhæver det behovet for en in vivo screeningsværktøj, som pålideligt vurderer neuromuskulære funktion SOD1-G93A mus på en hurtig måde.
På ALS TDI en protokol blev udviklet, der giver mulighed for pålidelig vurdering af den neuromuskulære funktion SOD1-G93A mus på mindre end 30 sek pr mus i gennemsnit. Denne protokol encompaSSES daglig vurdering af bagben funktion ved hjælp af en simpel neurologisk scoringssystem (NeuroScore), som er beskrevet i denne rapport i pressen og i video. NeuroScore er fokuseret på bagben funktion, fordi bagbenenes underskud er det tidligste rapporterede neurologiske tegn på sygdom i SOD1-G93A mus 5,6. Endvidere protokol udviklet af ALS TDI giver en objektiv vurdering af indtræden af parese (let eller delvis paralyse), progression og sværhedsgraden af lammelse og den er følsom nok til at identificere lægemiddelinducerede ændringer i sygdomsprogression.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle forsøg udføres i overensstemmelse med de protokoller, der er beskrevet af National Institutes of Health Guide til pleje og anvendelse af dyr, og blev godkendt af ALS TDI institutionelle dyr pleje og brug udvalg (IACUC).
1. Dyr, Boliger og studiedesign
Bemærk: SOD1 G93A-musekolonien blev afledt fra højt kopiantal B6SJLTgN (SOD1G93A) 1Gur stamme oprindeligt produceret af Gurney et al 7.. Kolonien er i færd med at blive opretholdt ved at krydse transgene C57BL / 6-SJL hanner med vildtype-C57BL / 6-SJL F1-hunner. F1 dyr genereres ved at krydse SJL hanner med B6 hunner. Mus sendes til ALS TDI ugentligt ved 35-45 dages alderen.
- Tillad mus mindst en uge at akklimatisere til dyret anlægget (12-timers lys / mørke-cyklus ved en temperatur på 18-23 ° C og 40-60% fugtighed) før tildele en undersøgelse.
- Hus mandlige SOD1-G93A mikrofone en mus pr bur, da gruppen husede mænd har tendens til at kæmpe. Hus kvindelige SOD1-G93A mus op til to pr bur. Giv miljøberigelse, i form af plast hytter. Sørge for mad og vand ad libitum, medmindre mus er en del af en undersøgelse, der kræver medicin administration i drikkevand / mad. I disse tilfælde ration og optage mad og vand.
- Begynd et lægemiddel-effektstudie omkring alder dag 50 og omfatter 64 kuld-matchede køns- balanceret mus (32 per kohorte). Endelig, at forskerne udfører undersøgelserne er blændet til de eksperimentelle betingelser.
Bemærk: Det anbefales, at en typisk lægemiddel-effektstudie starter i en alder af 50 dage imidlertid baseret på den type af terapeutisk intervention kan det være at foretrække at starte undersøgelsen tidligere eller senere.
Bemærk: En undersøgelse med 32 mus pr kohorte er drevet til at opdage kønsspecifikke narkotika-effekter. Hvis der ikke kønsspecifikke sammenligninger er påkrævet, bør 24 mus pr kohorte tilstrækkeligt til at påvise generelle narkotika-effekter.
2. Kropsvægt
- Optag kropsvægt for alle mus i forsøg dagligt med en præcision på en tiendedel af et gram. Bemærk: Kropsvægten er en følsom indikator for sygdomsprogression og eventuelle utilpashed, der kunne medføre kronisk medicinsk behandling.
- Mus kropsvægt varierer betydeligt i løbet af en dag, er højere om morgenen, og dermed registrere dem omkring samme tid hver dag.
3. Neurologisk Scoring System (NeuroScore)
- Vurdere neurologiske score (NS) for hver mus dagligt ved at observere musen under følgende tre betingelser udføres sekventielt: a) musen er ophængt ved dens hale, b) musen lades gå, og efter indtræden af parese c) mus anbringes på siden.
- For halen suspensionsprøvning, holde musen ca. 1,5 "fra haleroden over tråden toppen af deres eget bur i 1-2 sek, væk fra fødevarer bassinet, mens obsErving de bagben. Gentag suspensionen test 3 gange og registrere den mest konsekvente resultater.
- Til fods testen, skal du placere musen på en ren overflade, der giver en vis trækkraft og en gåafstand på 25 cm (f.eks., En papirserviet tapede ned for at forhindre udskridning). Tillad musen til at gå i alt 75 cm (3X papirets længde håndklæde) ind i den rigtige gangart.
- For "oprettende refleks" test, skal du placere musen på sin venstre eller højre side og bruge en stop-ur måle den tid, det tager at rette sig op uden hjælp fra begge sider. Bemærk: Kun én forsøg med denne test er påkrævet.
- Bestem NS hvert bagben (venstre eller højre) uafhængigt på en skala fra 0 til 4. Bemærk: For eksempel en score på 0, 1 indikerer, at venstre bagben NS er 0, mens den højre bagben NS er 1.
- Tildel neurologiske score (0-4), der svarer til følgende sæt observationer (resumé i tabel 1):
- Tildel NS 0 (Pre-symptomatiske), hvis følgende observeres: Når musen er ophængt i halen, det bagben præsenterer en normal defekter dvs, er det fuldt udvidet væk fra den laterale midterlinjen og den forbliver i denne position i 2 sekunder eller længere. Når musen er tilladt at gå, observeres normale gangart.
- Tildel NS 1 (Første symptomer), hvis der observeres følgende: Når musen er ophængt i halen, det bagben præsenterer en unormal defekter, dvs., det er kollapset eller delvist kollapsede mod lateral midterlinjen ELLER det ryster under hale suspension eller det er trukket tilbage / foldet. Når musen er tilladt at gå, observeres normale eller lidt langsom gangart.
- Tildel NS 2 (indtræder parese), hvis følgende observeres: Når musen er ophængt i halen, det bagben er delvist eller helt brudt sammen, ikke strækker meget. (Der kan stadig være fælles bevægelse). Når musen er tilladt at gå, er bagbenet anvendes til frem motion dog tæerne krøller nedad mindst to gange i løbet af en 90 cm gåtur eller en hvilken som helst del af foden trækker langs buret bund / tabel. Når musen er placeret på sin højre og venstre side, det er i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider.
- Tildel NS 3 (Lammelse), hvis følgende observeres: Når musen er suspenderet af halen, der er stiv lammelse i bagben eller minimal fælles bevægelse. Når musen er tilladt at gå der fremadgående bevægelse imidlertid bagbenet ikke anvendes til bevægelse fremad. Når musen er placeret på sin højre og venstre side, det er i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider. Bemærk: Sjældent, efter udbrud af lammelse, kan urin fugt vises på bagben. Venstre ubehandlet urin fugt kan resultere i urin "brænde" og hudlæsioner. Forkæl urin fugt ved at klippe håret, anvende varmt vand opsuger at fjerne urin, og forsigtigt tørres. Hvis hudlæsioner er til stede gælder Antibiotic salve.
- Tildel NS 4 (Human endepunkt), hvis følgende observeres: Når musen er suspenderet af halen, der er stiv lammelse i bagben. Når musen er tilladt at gå, er der ingen fremadgående bevægelse. Når musen er placeret på sin højre og venstre side er det ikke i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider. Dvs fravær af oprettende refleks.
4. Data Entry og analyse
- I løbet af et lægemiddel effektstudie, indtaste data indsamlet for hver mus i en Laboratory Information Management System (LIMS), eller ind i en kommercielt tilgængelig regneark software.
Bemærk: ALS TDI-udviklede lims software er et centralt register for alle data, der er indsamlet fra interne undersøgelser, hvilket gør disse data let tilgængelig over tid for ALS TDI efterforskere. Lims sporer individuelle mus, med sin unikke id, tilbage til sin slægt, kropsvægt eller neurologisk score på alle studiedage,og omfatter alle andre observationer bemærkede i sin levetid. LIMS sidste ende genererer et regneark, der anvendes til efterfølgende analyse. - Efter afslutningen af et lægemiddel effektstudie, dvs. når alle mus nå human endepunkt, bruge regneark software (se tabel Materialer) til at beregne den kombinerede NS for hver mus, for hver dag ved at midle venstre og højre bagben NS . Dernæst beregne medianalderen ved hvert NS for hver mus og antallet af dage hver mus tilbringer på et bestemt NS.
- Analyser samlede ændringer i NS over tid ved at importere data fra regneark til statistisk software (se tabel of Materials). Monter disse data ved hjælp af en model af ordinal logistisk regression, der estimerer den forventede NS, med medianalderen på NS og narkotika-behandling som effekter i regressionen. Brug af log-rank chi square test estimere effekten sandsynlighed sandsynlighed og afgøre, om lægemiddel-behandling effekt på NS progression er statistiskly signifikant (se supplerende kode fil til trin-for-trin instruktioner).
Bemærk: En p-værdi på <0,05 anses for statistisk signifikant.
Bemærk: Denne metode statistisk analyse respekterer ordinal karakter af NS data og den variable karakter af NS baner for de enkelte mus. Det foretrækkes, fordi individuelle NS baner kan være markant anderledes resulterer i NS tid-associeret gruppe gennemsnit, der ikke er tilstrækkeligt afspejler NS reaktioner. Derudover i nogle tilfælde NS kan svinge, især når de er i nul-til-en rækkevidde. - Endelig brug graftegning software (se tabel Materialer) til at generere "Ordinal Forventet NS vs Median Alder ved NS" grafer for lægemiddelbehandlede og kontroldyr (Figur 2, se supplerende kode fil til trin-for-trin instruktioner). Brug disse diagrammer til at bekvemt estimere skift mellem lægemiddelbehandlede og kontrolgrupper ved at interpolere fra y-aksen medianalderen for sygdomsdebut (i.e., NS 2) på x-aksen.
Bemærk: Forskellen i median alder mellem de to grupper repræsenterer en lægemiddel-induceret skift og behandles som en praktisk foranstaltning af størrelsen af effekten.
Bemærk: højregående forskydninger i den forventede NS vs. medianalderen kurve angiver bremset symptomatisk sygdomsprogression. Omvendt venstregående forskydninger i den forventede NS vs. medianalderen kurve angiver accelereret symptomatisk sygdomsprogression.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De neurologiske score data for 90 mandlige og 94 kvindelige ikke-behandlede SOD1-G93A mus studerede på ALS TDI løbet 2014 blev evalueret. Resultaterne viser, at hanmus har typisk en mere aggressiv sygdomsprogression end hunmus, som det fremgår af en større andel af deres levetid på NS 1 i forhold til kvinder. NS 2 og 3 NS forekomme med praktisk taget lige store hyppighed uafhængigt af køn. NS 0 blev udelukket fra analysen, fordi det betragtes som en "normal" fænotype. NS 4 blev også udelukket, fordi per definition det kan kun ske én gang i en SOD1-G93A mus levetid (Tabel 2 og figur 1).
NS data præsenteres fra en ALS sygdomsprogression effekten farmakologisk undersøgelse af testforbindelse TDI173 i SOD1-G93A mus (n = 16 pr køn / behandling 64 total mus). I figur 2 er hastigheden af neurologiske sygdomsprogression præsenteres som opfanges af ordinal regressionsanalyse af data captured hjælp af NeuroScore protokollen beskrevet heri. TDI173-behandlede mus blev sammenlignet med behandlet vehikelkontrol. Ingen statistisk blev observeret signifikante forskelle, når køn blev separat analyseret, men statistisk signifikans blev nået, da køn blev fusioneret. Kaplan-Meier analyse af overlevelse, selvom vise lignende tendenser som ordenstal logistisk statistisk analyse, var ikke følsomme nok til at afsløre signifikante forskelle, selv når køn blev slået sammen (Figur 3).
| NS 1 | Den bagben præsenterer en unormal defekter, dvs., den er brudt sammen eller delvist kollapsede mod lateral midterlinjen ELLER det ryster under hale suspension eller det er trukket tilbage / foldede. | Normal eller lidt langsommere gangart. | NA |
| NS 2 | Den bagben er helt eller delvist brudt sammen, ikke strækker meget. Der kan stdårligt være fælles bevægelse. | Den bagben bruges til bevægelse fremad dog tæerne krøller nedad mindst to gange i løbet af en 75 cm gåtur eller en hvilken som helst del af foden trækker langs buret bund / tabel. | Musen er i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider. |
| NS 3 | Stive lammelse i bagben eller minimal fælles bevægelse. | Bevægelse fremad dog bagben ikke bruges til bevægelse fremad. | Musen er i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider. |
| NS 4 | Stive lammelse i bagben. | Ingen bevægelse fremad. | Musen er ikke i stand til at rette sig inden for 10 sek fra begge sider. |
Tabel 1: Sammenfatning af fænotypiske observationer blev anvendt til at tildele neurologiske score.
| Hyppighed af NS1 | Hyppighed af NS2 | Hyppighed af NS3 | ||||
| Mand | Kvinde | Mand | Kvinde | Mand | Kvinde | |
| Antallet af mus | 90 | 94 | 90 | 94 | 90 | 94 |
| Minimum | 12 | 5 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| 25% | 29 | 16 | 4 | 4 | 0 | 0 |
| Median | 37 | 27,5 | 5 | 5 | 1 | 1 |
| 75% | 44 | 37,5 | 7.5 | 6.5 | 2.5 | 3 |
| Maksimum | 61 | 60 | 28 | 11 | 8 | 9 |
Tabel 2: En frekvensanalyse af NS data fra ikke-behandlede SOD1-G93A mus scoret dagligt fra alder dag 50 indtil døden. Fordelinger blev beregnet for NS 1, 2 og 3.
Figur 1. Grafisk repræsentation af antallet af dage på hver unormale NeuroScore for hver mus fra populationen af ubehandlet SOD1-G93A mus i vores koloni i 2014 (mandlige n = 90, kvindelige n = 94). Scoringsafsnittene frekvenser til den samme mus er repræsenteret for hver mulig NS. NS 4 blev udeladt, fordi begivenheden kun kan forekomme én gang i hver mus levetid per definition. Klik her for at se et større versio n af dette tal.
Figur 2 En typisk ordinal logistisk statistisk analyse graf sammenligner nervesygdom progression af TDI173-behandlede mus (rød linje) til kuld matchede vehikelbehandlede kontrolmus.. (Blå linje; Rapporteret p-værdier repræsenterer log-rank chi square test) Klik her for at se en større version af dette tal.
. Figur 3 En typisk Kaplan-Meier analyse graf sammenligner levetid TDI173-behandlede mus (rød linje) til kuld matchede bærerbehandlede kontrol mus (blå linje Rapporterede p-værdier repræsenterer log-rank test).jove.com/files/ftp_upload/53257/53257fig3large.jpg "target =" _ blank "> Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I denne rapport beskriver vi en hurtig og enkel video-protokol, som, hvis det anvendes korrekt, er i stand til pålideligt at vurdere sygdommens progression i SOD1-G93A mus og identificere lægemiddelinducerede ændringer. Mens forskellige grupper har udviklet fænotypiske pointsystemer for SOD1-G93A mus 8-10, de ofte ikke giver tilstrækkelige oplysninger om proceduren og er utilstrækkelige for replikation. Som følge heraf er pointsystemer sjældent anvendes uden den særlige gruppe, der udvikler dem. I denne rapport, at kombinationen af en detaljeret manuskript med video minimerer scoring uklarheder og inter-forsøgslederen variabilitet dermed giver mulighed for den protokol, der skal vedtages af andre laboratorier og muliggør sammenligninger mellem undersøgelser, der finder sted ved forskellige indstillinger.
Den neurologiske pointsystem er beskrevet i denne rapport, der omtales som NeuroScore, genererer ordinale data, hvor de nøjagtige numeriske værdier tilskrives de sæt af tegn og symptoms har ingen betydning ud over oprettelse rangeret sygdommens sværhedsgrad. I dette tilfælde, NS 0 er den mindst alvorlige sygdomstilstand og betegner en mus med normal bagben funktion, mens NS 4 er den mest alvorlige sygdomstilstand med mus på eller nærmer sygelighed sekundært til neuromuskulær sygdom. Selvom pointsystemet gør brug af symptomatiske tærskler, hver ordinal NS værdi omfatter et bredt spektrum af mulige kliniske præsentationer hvoraf mange blev fanget på video og er medtaget i denne rapport.
NS 1 omfatter spektret af tidlige symptomer på sygdom i SOD1 G93A-mus, som kan variere meget fra mus til mus. Nogle mus udviser en unormal defekter med baglemmer kollapser mod midterlinjen, mens andre viser bagbenenes rystelser og nogle endda vise bagben tilbagetrækning eller Lukning. Endvidere i de tidlige stadier af sygdommen NS af nogle mus kan svinge i flere dage mellem NS 1 og 0. uvægerligt dog i SOD1-G93A mus frekvensenaf NS 1 øges med tiden, og det omfatter flere og flere af de forskellige fænotyper beskrevne. I gennemsnit mandlige og kvindelige SOD1-G93A mus typisk bruger 37 og 28 dage henholdsvis på dette tidspunkt.
NS 2 repræsenterer begyndelsen af parese (let eller delvis lammelse) og giver ubestridelige beviser for tilstedeværelsen af patologi. Selv om det er ikke ualmindeligt for en vildtype-mus til tider til stede som NS 1, NS 2 forekommer kun i SOD1 G93A-mus. I lighed med NS 1, NS 2 indfanger et spektrum af tegn og symptomer. I en fase præsentation af NS 2 tidlig musen er ambulant og energisk. En mere avanceret præsentation af NS 2 afslører en mus med en stærkt begrænset evne til at bevæge sig. Avanceret parese i baglemmer kan forhindre musene i at nå mad og vand på toppen af buret, så foderpiller skal placeres i bunden af buret eller hydratiseret fødevarer bør gives. Desuden bør længere Sipper rør anbringes på vandflasker. SOD1-G93A mus typically tilbringe 5 dage på dette tidspunkt.
NS 3 betegner fuldstændig bagben lammelse, og efter alt at dømme er den nemmeste fænotype at identificere og score. De lammelsessymptomer omfattet af NS 3 kan enten være slap eller spastisk, men er typisk spastisk. Ved dette punkt, musene er meget syg og bør overvåges hyppigt. I gennemsnit SOD1-G93A mus tilbringer 1 til 2 dage på dette stadium.
NS 4 betegner fraværet af "opretningsrefleks", som ikke udelukkende er afhængige af bagbenet funktion som NS 0-3, men i stedet det afspejler hele kroppen wellness af musen. Evnen for en mus at udvise en normal "vridningsrefleks" kræver motivation, energi, men også funktionen af flere muskelgrupper herunder bagben, forbens- og mave. Det er vigtigt at bemærke, at sygdomsprogression i disse mus er ofte ikke symmetrisk og en mus, der kan fuldføre stabilitetsrefleksen når de anbringes på den ene side may være i stand til at gøre det, når de placeres på den anden side. Det er derfor vigtigt, til human behandling af dyr og for integriteten af undersøgelsen, at udføre test på begge sider og aflive musen, hvis den ikke rette sig på begge sider.
NS 4 defineres datoen for eutanasi og som standard direkte flugter med overlevelsesdata. Men det samlede sygdomsprogression, som defineret i ordinal regressionsanalyse af NS, måske ikke helt overlapper Kaplan-Meier-overlevelseskurver og kropsvægt data. Visse terapeutiske indgreb kan påvirke sygdommens udbrud eller symptomer, men undlader at påvirke den samlede levetid.
Selvom det ikke er drøftet indgående i denne rapport, kan kropsvægt være en anden foranstaltning, der kan anvendes i kombination til NS til at vurdere sygdommens debut og progression i SOD1-G93A men det kan være skæv af forskelle i kostvaner og ved terapi, der forårsager ødem eller indflydelse fedtforbrændingen 11,12.
13 og ikke bagben motoriske underskud, en fænotype, der ikke er fanget af NeuroScore. En anden begrænsning af denne protokol, er det faktum, at det er designet til, og gælder kun for høj kopi SOD1-G93A mus. Det er vores erfaring, den kliniske præsentation af sygdom i andre musemodeller for ALS, ligesom den lave kopi SOD1-G93A mus 14 eller TDP-43 mus 15,16, er anderledes end i den høje kopi SOD1-G93A mus, og denne NS-system kan være dårligt egnet til disse modeller. Det er således vigtigt at bestemme transgenet kopitallet af mus før tildele dem til undersøgelser og kontroller, at det er lig med højt kopiantal positive-kontrolmus. Uanset, at fordelene ved osing denne neurologiske pointsystem opvejer sine begrænsninger, og denne video protokol kan tjene som en glimrende træningsredskab til ALS forskere.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| B6SJLTgN(SOD1G93A)1Gur strain | The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME | 002726 | Strain of mice used in this study |
| Breeders | Biomedical Research Models, Inc., Worcester, MA | Colony maintainance | |
| Scale | Navigator OHAUS, Parsippany, NJ | Model N14120 | Used to weigh mice |
| Nutra-GelH | Bio-Serv, Flemington, NJ | #S4798 | Wet food provided to sick mice |
| Irradiated Lab Animal Diet | Harlan, Indianapolis, IN | 2918-111914M | Chow diet |
| Lab-grade Sani-chips | Harlan Teklad, Indianapolis, IN | 7090 | Bedding |
| JMPH | SAS Institute, Inc., SAS Campus Drive, Cary, NC | v10.0.2 | Statistical software |
| Microsoft Excel | Microsoft, One Microsoft Way, Redmond, WA | Excel 2013 (v 15.0) | Spreadsheet software |
| GraphPad Prism 5 | GraphPad software Inc., La Jolla, CA | v5.4 | Graphing software |
| Mouse Huts | Bio-Serv, Flemington, NJ | K3272 | For environmental enrichment |
References
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Rosen, D. R., et al. Mutations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature. 362 (6415), 59-62 (1993).
- Gurney, M. E. The use of transgenic mouse models of amyotrophic lateral sclerosis in preclinical drug studies. J Neurol Sci. 152, Suppl. 1 (6415), (1997).
- Scott, S., et al. Design, power, and interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Hegedus, J., Putman, C. T., Gordon, T. Time course of preferential motor unit loss in the SOD1 G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 28 (2), 154-164 (2007).
- Gordon, T., Ly, V., Hegedus, J., Tyreman, N. Early detection of denervated muscle fibers in hindlimb muscles after sciatic nerve transection in wild type mice and in the G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurol. Res. 31 (1), 28-42 (2009).
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Kim, K., Moore, D. H., Makriyannis, A., Abood, M. E. AM1241, a cannabinoid CB2 receptor selective compound, delays disease progression in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Eur. J. Pharmacol. 542 (1-3), 1-3 (2006).
- Weydt, P., Hong, S. Y., Kliot, M., Moller, T. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Azari, M. F., et al. Behavioural and anatomical effects of systemically administered leukemia inhibitory factor in the SOD1(G93A G1H) mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis. Brain Res. 982 (1), 92-97 (2003).
- Guan, Y., et al. Thiazolidinediones expand body fluid volume through PPARgamma stimulation of ENaC-mediated renal salt absorption. Nat. Med. 11 (8), 861-866 (2005).
- Savcheniuk, O. A., et al. The effect of probiotic therapy on development of experimental obesity in rats caused by monosodium glutamate. Fiziol. Zh. 60 (2), 63-69 (2014).
- Smittkamp, S. E., Brown, J. W., Stanford, J. A. Time-course and characterization of orolingual motor deficits in B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J mice. Neuroscience. 151 (2), 613-621 (2008).
- C, M., Gurney, M. E. A low expressor line of transgenic mice carrying a mutant human Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene develops pathological changes that most closely resemble those in human amyotrophic lateral sclerosis. Acta Neuropathol. 93 (6), 537-550 (1997).
- Wegorzewska, I., Baloh, R. H. TDP-43-based animal models of neurodegeneration: new insights into ALS pathology and pathophysiology. Neurodegener. Dis. 8 (4), 262-274 (2011).
- Hatzipetros, T., et al. C57BL/6J congenic Prp-TDP43A315T mice develop progressive neurodegeneration in the myenteric plexus of the colon without exhibiting key features of ALS. Brain Res. 1584, 59-72 (2014).
