Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Immunology and Infection
Click here for the English version

Immunology and Infection

Terapeutisk evaluering av fekal mikrobiotatransplantasjon i en interleukin 10-mangelfull musemodell

Published: April 6, 2022 doi: 10.3791/63350
Automatic Translation
1,2, 1, 2, 1
1Division of Gastroenterology, Department of Internal Medicine, University of Texas Medical Branch at Galveston, 2Department of Gastroenterology, Xiangya Hospital of Central South University

Summary

Samspillet mellom genetisk følsomhet, slimhinneimmunitet og intestinal mikroøkologisk miljø er involvert i patogenesen av inflammatorisk tarmsykdom (IBD). I denne studien brukte vi fekal mikrobiotatransplantasjon på IL-10 mangelfulle mus og undersøkte dens innvirkning på kolonbetennelse og hjertefunksjon.

Abstract

Med utviklingen av mikroøkologi de siste årene har forholdet mellom tarmbakterier og inflammatorisk tarmsykdom (IBD) vakt stor oppmerksomhet. Akkumulerende bevis tyder på at dysbiotisk mikrobiota spiller en aktiv rolle i å utløse eller forverre den inflammatoriske prosessen i IBD, og at fekal mikrobiotatransplantasjon (FMT) er en attraktiv terapeutisk strategi siden overføring av en sunn mikrobiota til IBD-pasient kan gjenopprette riktig vertsmikrobiotakommunikasjon. De molekylære mekanismene er imidlertid uklare, og effekten av FMT er ikke veldig godt etablert. Dermed er det nødvendig med ytterligere studier i dyremodeller av IBD. I denne metoden brukte vi FMT fra villtype C57BL / 6J mus til IL-10 mangelfulle mus, en mye brukt musemodell av kolitt. Studien utdyper innsamling av fekale pellets fra donormusene, fremstilling av fekalløsning/suspensjon, administrering av fekalløsning og overvåking av sykdommen. Vi fant at FMT signifikant reduserte hjertesvikten i IL-10 knockout-mus, og understreket det terapeutiske potensialet for IBD-behandling.

Introduction

Det menneskelige intestinale mikroøkosystemet er ekstremt komplekst, med mer enn 1000 arter av bakterier i tarmen til en sunn person1. Tarmfloraen er involvert i å opprettholde tarmens normale fysiologiske funksjoner og immunresponsen og har et uadskillelig forhold til menneskekroppen. Akkumulerende bevis tyder på at tarmmikrobiomet utgjør det siste menneskelige organet, som er en del av menneskekroppen, ikke bare en gruppe parasitter2. Et "sunt" symbiotisk forhold mellom tarmmikrobiotaen, deres metabolitter og vertsimmunsystemet etablert tidlig i livet, er avgjørende for å opprettholde tarmhomeostase. I noen unormale tilstander som kronisk betennelse, forstyrrer endringer i kroppens indre og ytre miljø tarmhomeostase alvorlig, noe som resulterer i en vedvarende ubalanse i tarmens mikrobielle samfunn, kalt dysbiose3. Faktisk kan eksponering for flere miljøfaktorer, inkludert kosthold, medisiner og patogener, føre til endringer i mikrobiotaen.

Dysbiose er assosiert med patogenesen av en rekke tarmsykdommer, som inflammatorisk tarmsykdom (IBD), irritabel tarmsyndrom (IBS) og pseudomembranøs enteritt, samt en voksende liste over ekstra-tarmlidelser, inkludert kardiovaskulær sykdom, fedme og allergi4. Mikrobiotaprofilering viste at pasienter med IBD har en dramatisk reduksjon i bakteriell mangfold, samt markerte endringer i populasjonene av noen spesifikke bakteriestammer 5,6. Disse studiene viste mindre Lachnospiraceae og Bacteroidetes, men flere Proteobacteria og Actinobacteria hos IBD-pasienter. Det antas at patogenesen av IBD er relatert til ulike patogene faktorer, inkludert unormal tarmflora, dysregulert immunrespons, miljøutfordringer og genetiske varianter7. Rikelig bevis tyder på at tarmbakterier spiller en rolle i initierings- og applikasjonsfasene av IBD8,9, noe som indikerer at korrigering av tarmdysbiose kan representere en ny tilnærming til terapi og / eller vedlikeholdsbehandling av IBD.

Prototypen av fekal mikrobiotatransplantasjon (FMT) begynte i det gamle Kina10. I 1958 behandlet Dr. Eiseman og hans kolleger vellykket fire tilfeller av alvorlig pseudomembranøs enteritt med avføring fra friske givere via klyster, og åpnet et nytt kapittel i moderne vestlig medisin ved hjelp av menneskelig avføring for å behandle menneskelige sykdommer11. Clostridium difficile-infeksjon (CDI) har vist seg å være hovedårsaken til pseudomembranøs enteritt12 , og FMT er svært effektiv i behandlingen av CDI. I løpet av de siste åtte årene har FMT blitt en standardbehandling for behandling av tilbakevendende CDI13, noe som fører til videre studier som undersøker FMTs rolle i andre lidelser, som IBD. I løpet av de siste tjue årene har mange kasuistikker og kohortstudier dokumentert bruk av FMT hos pasienter med IBD14. En meta-analyse, inkludert 12 studier, viste at 62% av pasientene med Crohns sykdom (CD) oppnådde klinisk remisjon etter FMT, og 69% av CD-pasientene hadde klinisk respons15. Til tross for disse oppmuntrende funnene, er FMTs rolle i behandlingen av IBD fortsatt usikker, og mekanismene som FMT forbedrer tarmbetennelsen er dårlig forstått. Videre undersøkelser er nødvendig før FMT kan bli med i dagens armamentarium av behandlingsalternativer for IBD i klinikkene.

I denne protokollen brukte vi FMT på IL-10-/- mus, som utvikler kolitt spontant etter avvenning og har tjent som en gullstandard for å speile den multifaktorielle naturen til IBD16,17,18. IL-10−/− mus har blitt mye brukt til å dissekere IBD-etiologi fordi de presenterer lignende molekylære og histologiske trekk til IBD-pasienter, og som pasienter kan sykdommen forbedres med anti-TNFα-terapi16. Aldrende IL10−/− mus (>9 måneder) har økt hjertestørrelse og nedsatt hjertefunksjon sammenlignet med aldersmatchede villtypemus19, noe som gjør den til en utmerket modell for å studere kolittinduserte hjertesykdommer. Imidlertid kan andre murine modeller av kolitt, som dextran natriumsulfatmodellen og T-celle-indusert kolittmodell, også brukes. Vi administrerte fekal suspensjon via oral gavage, vist seg å være en effektiv og bedre rute enn klyster hos mennesker20.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle prosedyrer utført på dyr ble godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee ved University of Texas Medical Branch i Galveston (protokoll # 1512071A).

1. Samling av ferske fekale pellets

  1. Forbered sterile papirhåndklær, stumpe tang og 50 ml koniske rør.
    1. Legg noen papirhåndklær og tang i separate autoklavposer og autoklav dem ved 180 °C i tørr varme i 30 minutter. Bruk sterile koniske rør også. Vei de koniske rørene og skriv ned vekten på rørene.
  2. Slå på biosikkerhetsskapet i dyrerommet.
  3. Ta et autoklavert rent musebur uten sengetøy og legg det i biosikkerhetsskapet. Fjern dekselet og matstativet og legg dem inne i skapet.
  4. Legg noen sterile papirhåndklær på bunnen av buret og legg metallstativet tilbake på toppen av buret.
  5. Identifiser aldersbestemte fekale givere og plasser museburet i biosikkerhetsskapet. Åpne buret og ta forsiktig en donormus (C57BL/6J) i halen og legg den på metallstativet på toppen av det rene buret.
  6. Plasser burdekselet på toppen av stativet og vent til dyret (e) skal gjøre sitt fornødne.
    MERK: Legg noen musematter på stativet samtidig.
  7. Samle fekale pellets og legg dem i et sterilt 50 ml konisk rør. Pool pellets etter kjønn. Ikke bland fekale pellets samlet fra menn og kvinner.
  8. Vekt røret igjen og beregne vekten av fekalpellets.

2. Tilberedning av fekal suspensjon

  1. Forbered en steril løsning (10% glyserol i vanlig saltvann).
  2. Tilsett 10 ml 10% glyserol / normal saltvann til det koniske røret for hvert gram fekale pellets.
    MERK: Øk oppløsningsvolumet til 20 ml om nødvendig. Denne studien brukte 1 ml oppløsning for hver pellet (5-10 mg) også.
  3. Homogeniser blandingen med lav hastighet med en benk homogenisator eller en blender inne i en avtrekksvifte for å resuspendere avføringen (3 X 30 s).
  4. Filtrer fekalsuspensjonen gjennom 2 lag sterilt bomullsgass (10,2 cm x 10,2 cm). Oppbevar filtratet midlertidig i kjøleskap i opptil 6 timer eller pakk det inn i sterile kryogene hetteglass og oppbevar det i en fryser på -80 °C.
  5. Rengjør homogenisatoren eller blenderen grundig etter en standard prosedyre.

3. Administrering av fekal suspensjon ved oral gavage

  1. Tine den frosne fekale suspensjonen på is hvis du bruker frosne prøver. Bland den tinte fekale suspensjonen ved vortexing.
  2. Overfør den friske eller tinte fekale suspensjonen til 1 ml sprøyter.
    MERK: Hver mus vil motta totalt 200 μL fekal suspensjon, og hver IL-10-/- mus i kontrollgruppen vil få 200 μL 10% glyserol / normal saltvann17.
  3. Vei musene og velg riktig gavage nålstørrelse og maksimalt doseringsvolum.
    MERK: For mus med kroppsvekt mellom 20-25 gram, bruk en 20 G 3,81 cm buet gavage nål med en 2,25 mm ball. Vennligst sjekk gavageneedle.com for mer informasjon.
  4. Test gavage nålen ved å måle lengden fra spissen av musens nese til xiphoid-prosessen (bunnen av brystbenet). Fyll sprøyten med 10 % glyserol/saltvann eller fekal suspensjon og fjern luftbobler inne i sprøyten og nålen.
    MERK: Hvis nålen er lengre enn lengden, sett et merke på nåleskaftet/slangen på nesenivå. Ikke før nålen/slangen gjennom dyret forbi dette punktet for å forhindre mageperforering.
  5. Plasser ett musebur i biosikkerhetsskapet, fjern plastburdekselet og la metallstativet være på plass.
  6. Ta en mus ved halen og legg den på metallstativet. Hold musen i halen med en hånd og bruk tommelen og langfingrene på en annen hånd for å holde dyret fast ved å gripe huden over skuldrene. På denne måten strekkes forbenene ut til siden, noe som forhindrer at de fremre føttene skyver nålen ut. Strekk forsiktig dyrets hode bakover og hold hodet på plass med en hånd.
    MERK: Øv musehåndtering til eksperimentøren har full tillit før du går videre til eksperimentet.
  7. Plasser gavage nålen på toppen av tungen inne i munnen. Gå forsiktig fremover langs øvre gane til nålen når spiserøret. Før nålen jevnt i én bevegelse. Ikke tving nålen hvis det kjennes motstand. Ta kanylen ut og prøv igjen.
  8. Når kanylen er riktig plassert og verifisert, administreres materialet langsomt ved å trykke sprøyten festet til nålen. Ikke roter nålen eller skyv nålen fremover, noe som kan sprekke spiserøret. Trekk kanylen forsiktig ut etter dosering.
  9. Sett musen tilbake til hjemmeburet. Overvåk dyret i 5-10 minutter ved å se etter tegn på anstrengt pust eller nød. Overvåk musene igjen mellom 12-24 timer etter FMT.

4. Sykdomsovervåking og eutanasi

  1. Overvåk musene i lengderetningen for IBD-utbrudd ved okkult fekalt blod og/eller koloskopi21. Evaluer hjertefunksjonen ved trans-thorax ekkokardiografi22,23.
  2. Avlive dyrene ved halshugging under et dypt anestesiplan med isofluran (1%-4%).
  3. Samle blodet i mikrosentrifugerør med antikoagulant og sentrifuge ved 1000-2000 x g i 10 minutter i en nedkjølt sentrifuge (4 °C). Lagre supernatanten, betegnet plasma i en -80 ° C fryser.
  4. Ved avliving klargjør du musekolon ved hjelp av sveitsisk rulleteknikk24 for histopatologisk analyse (H&E-farging)25.
  5. Mål B-type natriuretisk peptid (BNP) i plasma ved hjelp av et enzymimmunoassay (EIA) kit23.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Vi utførte frisk donor FMT 3 ganger (en gang i måneden i 3 måneder) på 2 måneder gamle C57BL/6J wild type (WT) og IL-10 knockout mus. Aldersmatchede C57BL/6J-mus (aldersforskjellen bør være <2 måneder) fungerte som fekale donorer og ferske fekale pellets ble brukt hver gang. EIA-analyser viste at BNP var markant forhøyet i plasma av IL-10-mangelmus, og at sunn donor FMT signifikant reduserte økningen i BNP-nivåer (figur 1A, n = 5, p < 0,05). Ekkokardiografi oppdaget en signifikant reduksjon i venstre ventrikkels ejeksjonsfraksjon (LVEF) i IL-10-/- musene, sammenlignet med WT-musene ; reduksjonen ble signifikant opphevet av FMT (figur 1B, n = 5, p < 0,05). Disse funnene tyder på at sunn donor FMT reduserte kolittindusert hjertesvikt.

Figure 1
Figur 1. BNP-oppregulering og LVEF-nedregulering ble redusert ved fekal mikrobiotatransplantasjon (FMT) hos IL-10 knockout-mus. (A) Plasma BNP-konsentrasjon (pg/ml) i villtype (WT) og IL-10 knockout (KO) mus behandlet med kjøretøy (Veh) eller FMT. (B) LVEF av WT og IL-10 KO mus behandlet med / uten FMT. Resultatene ble presentert som gjennomsnitt ± SD (n = 5). * p < 0,05 vs WT mus behandlet med kjøretøy (Veh). # p < 0,05 vs IL-10 KO mus behandlet med Veh. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Som en innovativ undersøkelsesbehandling har FMT blitt et hett tema i behandlingen av ulike lidelser de siste årene siden dysbiose av den kommensale mikrobiotaen er involvert i patogenesen av flere menneskelige sykdommer, inkludert IBD, fedme, diabetes mellitus, autisme, hjertesykdom og kreft26. Selv om mekanismen ikke er bestemt, antas det at FMT virker ved å bygge en ny biologisk flora og forhindre tap av restbakterier. Metoden som presenteres her, vedtok oral gavage som leveringsvei, som har vist seg å være effektiv27. Vi valgte den orale ruten fordi oral administrasjon er den mest praktiske og økonomiske og foretrekkes av de fleste pasienter. I tillegg har FMT av orale kapsler vist seg å være en effektiv tilnærming til behandling av tilbakevendende CDI i kliniske studier28. Andre vanlige øvre GI leveringsruter er nasogastrisk rør, nasojejunal tube, jejunostomy tube, og esophagogastroduodenoscopy. De vanlige nedre GI-leveringsrutene inkluderer koloskopi, kolontransendoskopisk enteralrør (TET) og rektal klyster. Den optimale ruten for FMT er imidlertid fortsatt usikker20. For tiden anses øvre GI-administrasjon som mest hensiktsmessig29, men det er ingen ideell rute som passer alle pasienter.

Verktøyene og beholderne som brukes i fekalpelletssamlingen, skal være sterile for å forhindre krysskontaminering. Fekale pellets samlet fra menn og kvinner bør ikke blandes på grunn av kjønnsforskjeller i immunitet. I dyremodeller og mennesker er det forskjeller i mikrobiota mellom kjønnene30. Disse kjønnsforskjellene resulterer ofte i kjønnsavhengige endringer i lokal GI-betennelse, vertsimmunitet og følsomhet for en rekke inflammatoriske lidelser31. Fekalpellets kan homogeniseres i steril fosfatbufret saltvann eller 10-50% glyserol/normal saltvann, og 10% glyserol er allment vedtatt29. I denne studien ble 10%, 20% og 50% glyserol / saltvann brukt, og de tilbød alle god bakteriell bevaring under fryseforhold. Homogenisering bør gjøres med lav hastighet og inne i en avtrekkshette for å minimere eksponering for respirable aerosoler produsert i denne prosessen. Fekalsuspensjonen bør filtreres gjennom to lag sterilt gasbind eller et 20 μm nylonfilter for å kvitte seg med store partikler som kan blokkere gavage nåler. Den filtrerte fekale suspensjonen for umiddelbar bruk skal plasseres i kjøleskap, og resten kan aliquoted og oppbevares i en -80 ° C fryser. Frysing er spesielt nødvendig hvis avføringen er oppnådd fra menneskelige givere. Meta-analyse har funnet ut at frossen FMT er like effektiv som fersk FMT hos pasienter med tilbakevendende CDI32,33,34. Cui og medarbeidere observerte imidlertid også at ved 6 måneder etter FMT var responsraten 26,7% høyere hos CD-pasienter i den ferske fekale bakteriegruppen enn i den frosne fekale bakteriegruppen35, noe som tyder på at fersk FMT er et bedre valg enn frossen FMT i noen tilfeller.

Den optimale dosen og hyppigheten av FMT-infusjon forblir ukjent på dette stadiet. Studier har funnet at varigheten av klinisk respons på enkelt FMT-behandling er forbigående og utilstrekkelig til å indusere grunnleggende endringer i mottakerens tarmflora, og sekvensiell FMT-behandling er nødvendig for å opprettholde CD-remisjon36,37. Vi utførte FMT én gang i måneden i 3 sammenhengende måneder, og våre data viste god terapeutisk effekt. I en pågående studie utfører vi månedlig FMT i en gruppe IL-10-mangelfulle mus i 12 måneder og vil evaluere tarmmikrobiota, tarmbetennelse og hjertefunksjon på slutten av studien. Vi forventer at sekvensiell FMT vil vise bedre terapeutisk effekt enn enkelt FMT.

Mens FMT gir et enormt potensial for å reparere forstyrret tarmmikrobiota og sikkerhetsdata dukker opp38,39, er det fortsatt mangel på medisinsk bevis på sikkerhet, administrasjonsmåte, bakteriell dose, administrasjonsfrekvens og langsiktig prognose av FMT for behandling av menneskelige sykdommer. 12. mars 2020 utstedte FDA et sikkerhetsvarsel om at FMT er forbundet med en potensiell risiko for alvorlige eller livstruende infeksjoner40. Infeksjonene var forårsaket av enteropatogen E. coli og Shiga toksinproduserende E. coli, og FMT-produktet ble levert av et avføringsbankfirma basert i USA. Dermed er det fortsatt nødvendig med ytterligere mekanistiske studier og langsiktige observasjoner hos dyr for å virkelig forstå bruken av FMT som behandlingsmodalitet hos pasienter. FMT hos gnagere vil forbli et kraftig verktøy i mikrobiomforskning, noe som til slutt kan gjøre FMT-prosedyren til en lett tilgjengelig behandling med lavere toksisitet enn andre syntetiske stoffer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne erklærer at de ikke har noen konkurrerende interesser.

Acknowledgments

Dette arbeidet ble delvis støttet av tilskudd fra National Institutes of Health (R01 HL152683 og R21 AI126097 til Q. Li) og av American Heart Association Grant-in-Aid 17GRNT33460395 (til Q. Li) (heart.org).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
BD Syringe, 1 mL Fisher Scientific 14-829-10F
Blunt end forceps Knipex 926443
Brain natriuretic peptide EIA kit Sigma RAB0386
C57BL/6J mice Jackson Lab 000664
Centrifuge Eppendorf 5415R
Conical tubes ThermoFisher 339650
Curved feeding Needles Kent Scientific FNC-20-1.5-2
GLH-115 homogenizer Omni International GLH-115
Glycerol MilliporeSigma G5516
IL-10 knockout mice Jackson Lab 004366
Isoflurane Piramal Critical care NDC66794-017-10
USP normal saline Grainger 6280
Vaporizer Euthanex Corp. EZ-108SA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. D'Argenio, V., Salvatore, F. The role of the gut microbiome in the healthy adult status. Clinica Chimica Acta. 451, Pt A 97-102 (2015).
  2. Baquero, F., Nombela, C. The microbiome as a human organ. Clinical Microbiology and Infection. 18, Suppl 4 2-4 (2012).
  3. Hawrelak, J. A., Myers, S. P. The causes of intestinal dysbiosis: a review. Alternative Medcine Review. 9 (2), 180-197 (2004).
  4. Carding, S., Verbeke, K., Vipond, D. T., Corfe, B. M., Owen, L. J. Dysbiosis of the gut microbiota in disease. Microbial Ecology in Health and Disease. 26 (1), 26191 (2015).
  5. Ma, H. Q., Yu, T. T., Zhao, X. J., Zhang, Y., Zhang, H. J. Fecal microbial dysbiosis in Chinese patients with inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 24 (13), 1464-1477 (2018).
  6. Chu, Y., et al. Specific changes of enteric mycobiota and virome in inflammatory bowel disease. Journal of Digestive Diseases. 19 (1), 2-7 (2018).
  7. Manichanh, C., Borruel, N., Casellas, F., Guarner, F. The gut microbiota in IBD. Nature reviews Gastroenterology and Hepatology. 9 (10), 599-608 (2012).
  8. Podolsky, D. K. Inflammatory bowel disease. The New England Journal of Medicine. 347 (6), 417-429 (2002).
  9. Tamboli, C. P., Neut, C., Desreumaux, P., Colombel, J. F. Dysbiosis in inflammatory bowel disease. Gut. 53 (1), 1-4 (2004).
  10. Shi, Y. C., Yang, Y. S. Fecal microbiota transplantation: Current status and challenges in China. JGH Open: An Open Access Journal of Gastroenterology and Hepatology. 2 (4), 114-116 (2018).
  11. Markley, J. C., Carson, R. P., Holzer, C. E. Pseudomembranous enterocolitis: A clinico pathologic study of fourteen cases with a common etiologic factor. AMA Archives of Surgery. 77 (3), 452-461 (1958).
  12. Wilcox, M. H. Clostridium difficile infection and pseudomembranous colitis. Best Practice and Research Clinical Gastroenterology. 17 (3), 475-493 (2003).
  13. Kelly, C. R., de Leon, L., Jasutkar, N. Fecal microbiota transplantation for relapsing Clostridium difficile infection in 26 patients: methodology and results. Journal of Clinical Gastroenterology. 46 (2), 145-149 (2012).
  14. Borody, T. J., Warren, E. F., Leis, S., Surace, R., Ashman, O. Treatment of ulcerative colitis using fecal bacteriotherapy. Journal of Clinical Gastroenterology. 37 (1), 42-47 (2003).
  15. Cheng, F., Huang, Z., Wei, W., Li, Z. Fecal microbiota transplantation for Crohn's disease: a systematic review and meta-analysis. Techniques in Coloproctology. 25 (5), 495-504 (2021).
  16. Scheinin, T., Butler, D. M., Salway, F., Scallon, B., Feldmann, M. Validation of the interleukin-10 knockout mouse model of colitis: antitumour necrosis factor-antibodies suppress the progression of colitis. Clinical and Experimental Immunology. 133 (1), 38-43 (2003).
  17. Keubler, L. M., Buettner, M., Hager, C., Bleich, A. A multihit model: Colitis lessons from the interleukin-10-deficient mouse. Inflammatory Bowel Diseases. 21 (8), 1967-1975 (2015).
  18. Kiesler, P., Fuss, I. J., Strober, W. Experimental models of inflammatory bowel diseases. Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 1 (2), 154-170 (2015).
  19. Sikka, G., et al. Interleukin 10 knockout frail mice develop cardiac and vascular dysfunction with increased age. Experimental Gerontology. 48 (2), 128-135 (2013).
  20. Fecal microbiota transplantation-standardization study group. Nanjing consensus on methodology of washed microbiota transplantation. Chinese Medical Journal (Engl). 133 (19), 2330-2332 (2020).
  21. Kodani, T., et al. Flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system). Journal of Visualized Experiments: JoVE. (80), e50843 (2013).
  22. Cheng, H. -W., et al. Assessment of right ventricular structure and function in mouse model of pulmonary artery constriction by transthoracic echocardiography. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (84), e51041 (2014).
  23. Tang, Y., et al. Chronic colitis upregulates microRNAs suppressing brain-derived neurotrophic factor in the adult heart. PLoS One. 16 (9), 0257280 (2021).
  24. Orner, G. A., et al. Suppression of tumorigenesis in the Apc(min) mouse: down-regulation of beta-catenin signaling by a combination of tea plus sulindac. Carcinogenesis. 24 (2), 263-267 (2003).
  25. Kline, K. T., et al. Neonatal injury increases gut permeability by epigenetically suppressing E-Cadherin in adulthood. The Journal of Immunology. 204 (4), 980-989 (2020).
  26. DeGruttola, A. K., Low, D., Mizoguchi, A., Mizoguchi, E. Current understanding of dysbiosis in disease in human and animal models. Inflammatory Bowel Diseases. 22 (5), 1137-1150 (2016).
  27. Chevalier, G., et al. Effect of gut microbiota on depressive-like behaviors in mice is mediated by the endocannabinoid system. Nature Communications. 11 (1), 6363 (2020).
  28. Kao, D., et al. Effect of oral capsule- vs colonoscopy-delivered fecal microbiota transplantation on recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 318 (20), 1985-1993 (2017).
  29. Cammarota, G., et al. International consensus conference on stool banking for faecal microbiota transplantation in clinical practice. Gut. 68 (12), 2111-2121 (2019).
  30. Vemuri, R., et al. The microgenderome revealed: sex differences in bidirectional interactions between the microbiota, hormones, immunity and disease susceptibility. Seminar Immunopathology. 41 (2), 265-275 (2019).
  31. Wilkinson, N. M., Chen, H. -C., Lechner, M. G., Su, M. A. Sex differences in immunity. Annual Review of Immunology. , (2022).
  32. Lee, C. H., et al. Frozen vs fresh fecal microbiota transplantation and clinical resolution of diarrhea in patients with recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 315 (2), 142-149 (2016).
  33. Hamilton, M. J., Weingarden, A. R., Sadowsky, M. J., Khoruts, A. Standardized frozen preparation for transplantation of fecal microbiota for recurrent clostridium difficile infection. American Journal of Gastroenterology. 107 (5), 761-767 (2012).
  34. Tang, G., Yin, W., Liu, W. Is frozen fecal microbiota transplantation as effective as fresh fecal microbiota transplantation in patients with recurrent or refractory Clostridium difficile infection: A meta-analysis. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 88 (4), 322-329 (2017).
  35. Cui, B., et al. Fecal microbiota transplantation through mid-gut for refractory Crohn's disease: safety, feasibility, and efficacy trial results. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 30 (1), 51-58 (2015).
  36. Li, P., et al. Timing for the second fecal microbiota transplantation to maintain the long-term benefit from the first treatment for Crohn's disease. Applied Microbiology and Biotechnology. 103 (1), 349-360 (2019).
  37. Moayyedi, P. Update on fecal microbiota transplantation in patients with inflammatory bowel disease. Gastroenterology and Hepatology. 14 (5), 319 (2018).
  38. Saha, S., Mara, K., Pardi, D. S., Khanna, S. Long-term safety of fecal microbiota transplantation for recurrent clostridioides difficile infection. Gastroenterology. 160 (6), 1961-1969 (2021).
  39. Perler, B. K., et al. Long-term efficacy and safety of fecal microbiota transplantation for treatment of recurrent clostridioides difficile infection. Journal of Clinical Gastroenterology. 54 (8), 701-706 (2020).
  40. Safety alert regarding use of fecal microbiota for transplantation and risk of serious adverse events likely due to transmission of pathogenic organisms. FDA. , Available from: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/safety-availability-biologics/safety-alert-regarding-use-fecal-microbiota-tramsplantation-and-risk-serious-adverse-events-likely (2020).

Tags

Immunologi og infeksjon utgave 182 inflammatorisk tarmsykdom fekal mikrobiotatransplantasjon ulcerøs kolitt Crohns sykdom dysbiose interleukin 10
Terapeutisk evaluering av fekal mikrobiotatransplantasjon i en interleukin 10-mangelfull musemodell
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, … More

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, Q. Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model. J. Vis. Exp. (182), e63350, doi:10.3791/63350 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter